不同濃度血液保存液對速率法檢測ALT結果的影響

田國萍 閆曉紅

（吉林省遼源市紅十字中心血站，吉林 遼源 136200）

不同濃度血液保存液對速率法檢測ALT結果的影響

田國萍 閆曉紅

（吉林省遼源市紅十字中心血站，吉林 遼源 136200）

目的 研究不同濃度血液保存液對速率法檢測ALT結果的影響。方法 對50例獻血者的血清樣本和血袋導管樣本進行檢驗，按照隨機的原則選擇3份ALT異常血樣，用復方枸櫞酸鈉注射液（血液CPD保存液）進行梯度稀釋，每個濃度檢測20次，比較分析檢測結果。結果 混入CPD保存液＞1.5%（1∶64）時檢測結果變化有統計學意義（P＜0.01），混入CPD保存液＜1∶128時，檢測結果無統計學意義（P＞0.05）。結論 不同濃度血液保存液對速率法檢測ALT結果有一定的影響，在實際工作中，需要檢驗人員加強責任心，提高業務能力及時發現問題，解決異常情況，為臨床提供可靠的診斷依據。

血液保存液；速率法；影響

丙氨酸氨基轉移酶（ALT）主要分布在肝細胞內，當肝細胞收到損害時，大量ALT進入血漿中，使血液內ALT活性顯著升高，故ALT常被臨床用于肝膽疾病的診斷[1-2]，ALT的檢測方法為比色法和速率法，速率法因其簡單方便，本血液中心在對獻血員進行ALT檢測時多采用此方法。本文進行了對比研究，具體內容如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

2008年2月至2009年3月來本血液中心無償獻血標本50份，采集方法嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版進行，在標本采血前排除藥物、飲食、運動等對ALT的影響，排除嚴重脂血、溶血、黃疸患者。

1.2 主要材料與儀器

OLYMPUS AU640全自動生化分析儀（日本），MM-1型微量振蕩器（江蘇省姜堰市醫療器材廠生產）ALT速率法試劑盒（浙江東歐生物工程有限公司，批號20091102），血液保存液（取自長春泰爾茂醫用器具有限公司生產的血袋，批號：20061123X），真空采血管及采血針購自江蘇康健醫療用品有限公司，所有材料和試劑均有檢定合格標識和報告，并在有效期內使用。

1.3 方法

做好儀器每天的維護及保養，使儀器處于最佳狀態，嚴格按照儀器的操作規程進行操作，從50份血液樣本中隨機選擇3份ALT異常血樣，用復方枸櫞酸鈉注射液（血液CPD保存液）進行梯度稀釋，每個濃度檢測20次，比較分析檢測結果。

1.4 統計學方法

采用SPSS13.0統計軟件進行統計分析，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

通過對3份ALT異常的血液樣本用復方枸櫞酸鈉注射液（血液CPD保存液）進行梯度稀釋后發現：混入CPD保存液＞1.5%（1∶64）時檢測結果變化有統計學意義（P＜0.01），混入CPD保存液＜1∶128時，檢測結果無統計學意義（P＞0.05）。

3 討 論

血液和其他體液標本酶濃度的測定可以作為醫師對疾病診斷的依據，尤其是丙氨酸氨基轉移酶（ALT）作為一種重要的催化酶，存在于肝細胞中[3-4]，當有肝類疾病時，ALT就會有相應的變化，所以在臨床上測定ALT的指數常常作為醫師對肝膽疾病診斷的重要依據，為了防止經血傳播病毒性肝炎的發生，保障用血安全，ALT是GBl8467-2001中規定對獻血者必檢的項目之一。

速率法檢測ALT的基本原理是根據測定區域單位時間內酶作用底物溶液的吸光度變化與酶濃度成比例，ALT酶促反應中產生的丙酮酸偶聯LD催化丙酮酸還原乳酸使NADH變為NAD+的指示酶反應[5-7]，其廣泛存在于肝臟、心肌、骨骼肌、腎、腦、胰、肺、白細胞和紅細胞中，臨床上常用來檢測對肝臟、心肌等疾病的檢查，其利用NAD+在340nm處有特異吸光度的特異性連續監測，NADH被氧化成NAD+的速率（吸光度下降的速率一△A340nn∥△t）其速率與ALT成正比，從而測得ALT的濃度，當樣品中酶的含量特別高時，高含量的標本在反應的延遲期內已大量消耗基質或基質耗盡，使反應期內△A/min很小而產生錯誤的結果，在到達測定區域前底物已經耗盡，在到達測定區域時酶反應曲線已成為一條平坦的直線，說明吸光度基本上沒有變化，從而測定結果很低甚至為負值，酶速率法分析時一定要觀察各標本反應的起始吸光度，起始吸光度過低或過高和對提示無反應區間的標本應稀釋后再重新測定防止高值漏檢，速率法檢測ALT一般經過4個步驟，即預孵育期，遲滯期、線性期和偏離線性期，4個步驟相輔相成，其檢測方法省時、省力、操作簡單、結果準確，在加上近年來全自動生化分析儀等精密儀器的運用，使其可以一次性處理大批量的標本，使其廣泛應用于血站系統對獻血者的初級篩查。

本文通過分析，匯總各項數據后結果顯示：混入CPD保存液＞1.5%（1∶64）時檢測結果變化有統計學意義（P＜0.01），混入CPD保存液＜1∶128時，檢測結果無統計學意義（P＞0.05）。說明不同濃度血液保存液對速率法檢測ALT結果有一定的影響，此外血脂和黃疸對ALT的測定也有影響。有些患者血清標本呈奶油狀，黏稠狀，而血脂中的大量的乳糜微粒對入射光產生散射，使生化分析儀失靈，無法準確測定吸光度的改變，使測定的結果出現誤差或者根本無法測定，黃疸血清膽紅素值超過正常范圍后也影響正常的吸光度值，黃疸標本在340nm處有較強的吸光峰，這類的標本中高含量的ALT會導致底物耗盡而在340nm處仍維持較高的吸光度值，應稀釋后才能檢測到最準確的結果。綜上所述，ALT檢測結果的影響因素較多，為保證檢測結果的準確性，檢驗人員要加強責任心，嚴格按照儀器和試劑的說明書進行操作，認真對待每個病人的結果，善于觀察異常結果和異常反應曲線，及時解決分析前、分析中和分析后出現的異常情況，多學習臨床知識，加強對獻血者獻血前的宣傳教育，獻血前獻血者應該保證充足的睡眠和充分的營養，檢驗時將檢驗與臨床結合起來，為臨床提供真實可靠的診斷依據，確保血液質量，避免浪費血液資源的現象發生。

[1] 吳敏,朱薦,何亞琴.快速全血生化分析儀用于ALT快速初篩的評價[J].中國輸血雜志,2009,17(1):27-28.

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B

1671-8194（2013）35-0112-02