ICU產ESBLs大腸埃希菌氨基糖苷類修飾酶基因的分析

芮球紅，廖于峰，陳燕敏

(寧波市第二醫院檢驗科，浙江寧波315010)

大腸埃希菌是臨床常見的條件致病菌，也是重癥監護病房(ICU)感染的主要病原菌之一。近年來，隨著抗生素的廣泛使用，產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)大腸埃希菌日益增多。ESBLs由質粒介導，易在種屬甚至不同種屬細菌間傳遞造成暴發流行［1］。這一現象已成為醫院感染的突出問題。氨基糖苷類抗菌藥物(aminoglycosides，AGs)是一種治療革蘭陰性菌感染的重要抗菌藥物。細菌對該類藥物耐藥主要是通過產氨基糖苷類修飾酶(AMEs)。我們收集了ICU分離的82株大腸埃希菌，通過ESBLs檢測、體外藥敏試驗和AMEs基因攜帶情況分析，了解ICU大腸埃希菌產ESBLs感染發生率，探討產ESBLs株AGs耐藥和AMEs基因之間的關系，以期為臨床合理選用抗菌藥物提供理論依據。

一、材料和方法

1.菌株來源 82株大腸埃希菌臨床分離株(不含同一病例相同部位的重復分離株)來自寧波市第二醫院2011年1月至2012年7月期間ICU住院患者，其中痰標本20份、尿標本26份、分泌物標本21份、膿液標本11份、靜脈導管標本4份。藥敏質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922(購自衛生部臨床檢驗中心)。

2.儀器與試劑 VITEK全自動微生物分析系統、M-H瓊脂培養基、LB培養基購自法國 BioMerieux公司;藥敏紙片購自英國 Oxoid公司;5418型低溫離心機為Eppendorf公司產品;Power-PAC3000型電泳儀、Gel Doc XR凝膠成像系統為美國Bio-Rad公司產品;聚合酶鏈反應(PCR)試劑購自大連寶生物公司。

3.ESBLs表型確證試驗［2］參照美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)推薦的紙片確證擴散法標準進行，將頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸、頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸紙片貼在涂有待測菌的培養基上孵育，對2組中任何一個藥物加與不加克拉維酸的抑菌圈直徑差值≥5 mm時，可確證該菌株產ESBLs。……