65株臨床分離MRSA的SCCmec基因分型及耐藥性研究

王愛玲，紀(jì) 冰，孫萬菊，孟 瑋，安新業(yè)，宿振國，王連文，張玉梅

(1.濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東濱州256603;2.濱州醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室，山東煙臺(tái)264003)

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillinresistant Staphylococcus aureus，MRSA)是一種引起醫(yī)院內(nèi)獲得性感染的多重耐藥菌。1961年在英國發(fā)現(xiàn)了世界首例MRSA，從此MRSA的感染遍布全世界，并成為醫(yī)院和社區(qū)獲得性感染的主要病原菌。由于其耐藥譜廣、耐藥強(qiáng)度高，給臨床治療帶來了很大困難，也因此受到廣泛關(guān)注和重視。了解MRSA的耐藥情況，并對當(dāng)前流行的MRSA臨床株進(jìn)行快速、準(zhǔn)確地分型，對于臨床合理選用藥物、了解菌株來源以及制定MRSA感染的防控措施有重要意義。我們采用多重聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)對分離的MRSA進(jìn)行基因分型及耐藥基因檢測，以了解MRSA的葡萄球菌盒染色體(SCCmec)基因型分布特征及耐藥狀況。

材料和方法

一、材料

1.菌株來源及鑒定 受檢菌株均分離自濱州市某三級甲等醫(yī)院各臨床標(biāo)本，共計(jì)115株;其中甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(methicillin-sensitive Staphylococcus aureus，MSSA)50 株，MRSA 65株。菌株鑒定采用先德自動(dòng)化微生物鑒定儀(英國)鑒定，MRSA的篩選應(yīng)用美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的頭孢西丁紙片擴(kuò)散法進(jìn)行篩選。質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌(ATCC 29213)、金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)為本實(shí)驗(yàn)室保存。

2.主要試劑與儀器 細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒、100 bp DNA Ladder Marker、PCR 試劑均購自寶生物工程(大連)有限公司，溶葡萄球菌酶購自生工生物(上海)有限公司。抗菌藥物:青霉素、氯霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/達(dá)福普汀、萬古霉素、替考拉寧、環(huán)丙沙星、克拉霉素、克林霉素、紅霉素、加替沙星、慶大霉素、利福平 、四環(huán)素、頭孢唑啉、頭孢吡肟、頭孢曲松、氨芐西林 、復(fù)方磺胺甲口惡唑購自O(shè)XIOD公司(英國)。……