生化分析儀測定磷酸肌酸激酶假性降低原因分析

關鍵詞：磷酸肌酸激酶、假性降低、基質(zhì)耗盡、生化分析儀

中圖分類號：R818.053 文獻標識碼：A 文章編號：1005-0515（2013）5-021-01

我們在平時用全自動生化分析儀檢測磷酸肌酸激酶（CK）時，發(fā)現(xiàn)兩例CK較高值標本檢測出結果卻很低，經(jīng)稀釋后重測結果很高。為此我們進行了多次實驗分析，得出結果很低原因，現(xiàn)報道如下：

一、材料與方法

1、儀器與試劑

1.1儀器：日立7180全自動生化分析儀

1.2試劑：寧波美康公司CK試劑，批號：20120815，當天CK質(zhì)控結果在質(zhì)控范圍。

2.病例：兩例病人均為胸悶、心悸、呼吸困難來我院就診。

二、結果

2.1兩例患者心肌酶譜結果均值為天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）342U/L，磷酸肌酸激酶（CK）8U/L，肌酸激酶同功酶（CK-MB）324U/L，乳酸脫氫酶（LDH）912U/L。兩患者心肌酶譜結果均很高，唯有CK值很低與其臨床表現(xiàn)和其他檢查結果明顯不相符，CK結果儀器未出現(xiàn)任何提示。

2.2將患者血清標本直接重復再檢測3次CK結果為6-10U/L，平均為8U/L，平均吸光度（A）值0.0042，與初次測定結果基本相同，該標本在檢測過程中儀器無任何提示。然而將標本用9g/L NaCL溶液稀釋10倍后重新測定3次，平均1120U/L，A值為0.1250，結果乘以稀釋倍數(shù)10，最后結果為11200U/L。

三、討論

3.1底物耗盡現(xiàn)象是由于各實驗室在線性反應期內(nèi)進行檢測，當所檢測的酶濃度特別高時，在延遲反應時間或測量點范圍內(nèi)就已經(jīng)大量消耗基質(zhì)，以致線性期內(nèi)檢測不到吸光度的變化而出現(xiàn)低值結果。

3.2本文報道的兩例CK初次測定結果很低不準確原因就是因CK測定系統(tǒng)發(fā)生了基質(zhì)耗盡，使得初次檢測結果為6U/L。在酶活性檢測工作中，檢測試劑由試劑公司提供，不同公司提供的試劑其酶活性檢測線性范圍與試劑質(zhì)量有直接關系，試劑公司提供的試劑盒所含的底物濃度在一般情況下是足夠大的，可以滿足絕大多數(shù)臨床標本的實際檢測需要，而本文中兩例患者CK酶的活性遠遠超過試劑盒所提供檢測線性范圍，也就是零級反應期非常短，不能有效完成速率法檢測，以至于檢測結果很低。

3.3在動力學方法的實驗中，特別是一些酶的測定中應特別注意基質(zhì)耗盡問題[1]。不同型號生化分析儀的設計不一樣，有的為零點與監(jiān)測第一A值的差額；有的A值上升或下降至指定A值的數(shù)值。超過限額說明樣本酶活性非常高，底物將要耗盡，或已經(jīng)耗盡，隨后監(jiān)測A值已不可靠，樣本應稀釋5-10倍[2]，甚至更多倍。大型生化分析儀可以設置限額參數(shù)來監(jiān)測是否基質(zhì)耗盡[3]。本報道的兩例CK測定的A值顯然已大大超過了A值設定的限額范圍，所以無法得到真實的數(shù)據(jù)。

3.4在其它酶的測定中也應引起注意， 如當人體肝臟、心臟等器官發(fā)生損傷時，ALT、AST、CK、等酶的釋放使血中濃度大幅度升高，但通常這些酶活性不會超過試劑盒所提供的檢測線性范圍，所以絕大多數(shù)檢測結果是可靠、準確的。但是，當器官損傷特別嚴重，樣本中酶的活性遠遠超過試劑盒所提供檢測線性范圍時，也就是零級反應期非常短，不能有效完成速率法檢測，此時的檢測結果就是無效的、不準確的，應高度重視，以防漏報錯報結果，以免耽誤診斷治療。

參考文獻：

[1]顧光煜，王以立，陳維忠，等.臨床化學自動分析儀應用指南[M].北京：海洋出版社，1993.82-87，138-140.

[2]周新，涂植光.臨床生物化學和生物化學檢驗[M].第3版.北京：人民出版社，2004.154.

[3]石寅皓.全自動生化分析儀限額參數(shù)的設置[J].臨床檢驗雜志，1998，16（2）：95-96.