蓖麻籽蛋白質的粗分離

摘要：以蓖麻籽中總蛋白為研究對象，對磷酸鹽法提取蓖麻籽中粗蛋白過程進行優(yōu)化。結果表明，在硫酸氨飽和度為70%時對蓖麻籽中粗蛋白的提取效率最高；利用優(yōu)化后的磷酸鹽法對7個不同發(fā)育時期的蓖麻籽中的蛋白質進行粗提取，并利用紫外分析法對所提取的不同生長階段的蓖麻籽中的粗蛋白進行比較分析，結果發(fā)現自植株授粉后到獲取蓖麻籽的時間間隔越長蓖麻籽中總蛋白積累量就越高。

關鍵詞：蓖麻籽；蛋白質；提取

中圖分類號：S565.601文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2013）02-0110-03

蛋白質的提取方法有很多，目前文獻已報道過的蛋白質提取方法主要有水溶液提取法、有機溶劑提取法以及酶法和超聲波萃取法等[1～5]。蓖麻（Ricinus communis）在國內種植廣泛，資源豐富。為進一步加深對蓖麻籽中酶的研究和利用，本實驗利用磷酸緩沖液（PB）法提取蓖麻籽蛋白質，并對鹽析濃度進行優(yōu)化，同時利用優(yōu)化后的提取方法對在不同發(fā)育時期的蓖麻籽粗蛋白進行提取并比較分析。

1材料與方法

1.1材料

成熟通蓖五號種子，通遼巨大種業(yè)公司提供。

種植在實驗田的哲蓖四號經人工授粉后采集分期蓖麻種子，授粉當天為0 DAP（Days after pollination），授粉第二天為1 DAP；分別采集哲蓖四號同一植株上16、23、30、37、44、51、69 DAP共7個不同時期的種子，采集后立即去殼并放入超低溫冰箱中。

1.2主要儀器

高速冷凍離心機，珠海黑馬醫(yī)學儀器有限公司；DYY-6C型電泳儀，北京市六一儀器廠；精密pH計，上海精密科學儀器有限公司；電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；……