牛病毒性腹瀉病毒山東株的分離與鑒定

摘要：牛病毒性腹瀉病毒是牛病毒性腹瀉-黏膜病的重要病原體，該病毒病是極為復(fù)雜、呈多臨床類型表現(xiàn)的傳染病，給世界養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究從疑似牛病毒性腹瀉-黏膜病的糞便中分離得到一株病毒能使MDBK細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞病變，經(jīng)RT-PCR檢測(cè)及擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序進(jìn)一步證實(shí)，該病毒為牛病毒性腹瀉-黏膜病病毒，TCID50測(cè)定該病毒的滴度為107.15TCID50/ml。該病毒株的分離鑒定為牛病毒性腹瀉病毒疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：牛病毒性腹瀉-粘膜病病毒；分離；鑒定

中圖分類號(hào)：S852.65+3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2013）02-0041-04

牛病毒性腹瀉-黏膜病 （Bovine Viral Diarrhea-Mucosal Disease，BVD-MD） 是由牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhea virus，BVDV）感染而引起的一種重要傳染病，臨床上以發(fā)熱、腹瀉、黏膜糜爛、潰瘍、白細(xì)胞減少、持續(xù)感染與免疫耐受、免疫抑制、懷孕母牛流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和畸型胎以及致死性黏膜病為主要特征[1，2]。該病呈世界性分布，廣泛存在于美國、澳大利亞、英國、新西蘭、匈牙利、加拿大、阿根廷、日本、印度等國家[3]。BVDV不僅可感染牛，也能感染綿羊、山羊、豬、鹿和其它反芻動(dòng)物。1946年美國人Olafson等首次發(fā)現(xiàn)并分離出BVDV，1983年我國李佑民等首次從流產(chǎn)胎兒的脾臟中分離到BVDV。BVDV屬于黃病毒科（Flaviviridae），瘟病毒屬（Pestivirus），與豬瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）和綿羊邊界病毒（Border Disease Virus，BDV） 同屬，存在抗原相關(guān)性，在血清學(xué)上存在著交叉反應(yīng)，而且能夠突破宿主特異性發(fā)生交叉感染[4]。根據(jù)BVDV病毒基因組5′端非翻譯區(qū)（5′NTR）序列比較，把BVDV分為牛病毒性腹瀉病毒Ⅰ型（BVDV-Ⅰ）和牛病毒性腹瀉病毒Ⅱ型（BVDV-Ⅱ）[5，6]。根據(jù)BVDV可否使體外培養(yǎng)的傳代上皮細(xì)胞發(fā)生病變效應(yīng)，可分為兩個(gè)生物型（biotype）：致細(xì)胞病變型（cytopathic，CP）和非致細(xì)胞病變型（noncytopathic，NCP）[7]。……