轉人乳鐵蛋白羊奶生物安全試驗

摘要：為了解轉人乳鐵蛋白羊奶與普通羊奶之間的差異，將兩種羊奶的主要成分及其物理性狀進行了比較；同時，參考中華人民共和國農業行業標準《轉基因植物及其產品食用安全檢測——大鼠 90 天喂養實驗》（NY/T 1102-2006）進行轉基因羊奶食用安全評價。實驗結果表明，90天灌喂轉人乳鐵蛋白羊奶的大鼠與普通羊奶灌喂組血常規值差異不顯著（P>0.05）；灌喂轉人乳鐵蛋白的羊奶中、高劑量組與自由采食對照組及普通羊奶中、高劑量灌喂組大鼠血清鐵含量及鐵蛋白含量差異顯著（P<0.05）。轉人乳鐵蛋白羊奶與普通羊奶具有實質等同性，轉基因成分沒有干擾機體對其它營養物質的吸收，從營養學角度來評價，轉人乳鐵蛋白羊奶是安全的。

關鍵詞：轉人乳鐵蛋白羊奶；安全性評價；血清鐵；鐵蛋白

中圖分類號：S879.1；X954文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2013）02-0023-05

轉基因植物以及轉基因植物為原料的提取物近年來逐漸進入人類的食物鏈。自2010年美國生物科技公司AquaBounty研發出的生長快、個頭大的轉基因“超級三文魚”，并獲得美國食品藥品監督管理局（FDA）安全證書[1]，相信在不遠的將來動物轉基因食品也會進入人們的餐桌，與此同時，轉基因食品的安全性備受爭議。目前，國內還沒有對轉基因食品進行安全評價的標準，國際上有63個國家遵循1993年國際經濟合作組織（OEDC）提出的實質性等同原則對轉基因食品的安全性進行評價。

乳鐵蛋白（Lactoferrin， LF）是一種相對分子量約為80ku的鐵結合性糖蛋白，主要存在于乳汁、唾液、精液、鼻腔分泌物等外分泌液或血漿中[2]，乳鐵蛋白分子生物學結構決定其具有結合鐵的能力，由此帶來了其它一些重要的生物學功能，如具有抑菌[3]、殺菌[4]、 抗病毒[5]、抗感染[6]和調節機體免疫功能[7]，直接或間接激活轉錄、誘導基因表達作用，對消化道腫瘤具有化學預防作用。泌乳初期人乳中的乳鐵蛋白含量明顯高于牛乳與羊乳，因此，動物乳人源化，將提高動物乳鐵蛋白含量，目前已經獲得轉人乳鐵蛋白的動物種類很多，本實驗即涉及到轉人乳鐵蛋白基因羊奶。

筆者從兩個主要方面對轉基因羊奶與普通羊奶進行分析，利用統計學方法對轉基因羊奶與普通羊奶的主要生產性能指標進行比較，參考中華人民共和國農業行業標準《轉基因植物及其產品食用安全檢測——大鼠 90 天喂養實驗》（NY/T 1102 — 2006）進行飼喂大鼠實驗。

1材料與方法

1.1供試材料

含有轉人乳鐵蛋白的鮮羊奶由上海杰隆生物制品有限公司贈送，普通羊奶取自山東省農業科學院奶羊場，SD大鼠、基礎日糧購自山東大學新藥評價中心。大鼠血清鐵試劑盒、大鼠鐵蛋白試劑盒購自上海麥莎生物科技有限公司。

Integrated Milk Testing Fossomatic 5000全自動體細胞測定儀，Integrated Milk Testing Milkoscan FT 6000 FOSS ELECTRIC 乳成分聯合測定儀（丹麥 FOSS公司）；7020 型全自動生化分析儀（日本日立公司）；TaKaRa PCR Thermal Cycler （日本TaKaRa公司）。

1.2實驗方法

1.2.1奶樣分析上海杰隆生物制品公司提供轉人乳鐵蛋白奶山羊羊只泌乳2個月的樣品共計24份〔含量為（4.2±0.3） mg/ml〕，取普通泌乳2月的山羊羊奶，分別測定其乳脂率、乳蛋白率、乳糖、冰點、均質度和總干物質，重復測定3次。

1.2.2實驗動物與分組選取SD大鼠210只，體重約為120～160 g，將實驗動物隨機分為7組，每組30只，雌雄各半分籠飼養。同種性別的每籠3只，自由進食、飲水，環境溫度21～25℃，空氣相對濕度40%～60%。

空白對照組（C組）：飼喂基礎日糧，自由進食、飲水。

普通羊奶灌喂組：根據灌喂的奶量分為 NL組（飼喂基礎日糧，自由進食、飲水，灌喂普通羊奶0.5 ml）；NM組（飼喂基礎日糧，自由進食、飲水，灌喂普通羊奶1 ml）；NH組（飼喂基礎日糧，自由進食、飲水，灌喂普通羊奶3 ml）。

轉乳鐵蛋白羊奶灌喂組：根據灌喂的奶量分為TL組（飼喂基礎日糧，自由進食、飲水，灌喂轉乳鐵蛋白羊奶0.5 ml）；TM組（飼喂基礎日糧，自由進食、飲水，灌喂 轉乳鐵蛋白羊奶1 ml）；TH組（飼喂基礎日糧，自由進食、飲水，灌喂轉乳鐵蛋白羊奶3 ml）。

1.2.3體重對各組大鼠進行90天灌喂，分別測定各組大鼠的體重增加量，重復3次，記錄數據。

1.2.4大鼠血清鐵含量與鐵蛋白含量測定飼喂90天后，空腹禁水禁食12 h后，將大鼠固定在采血固定套中，用大鼠尾預熱器對尾部進行預熱后進行大鼠尾靜脈采血，然后用大鼠血清鐵試劑盒、大鼠鐵蛋白試劑盒進行檢測，方法參考試劑盒說明書進行，重復3次。

1.2.5大鼠血常規測定飼喂90天后，空腹禁水禁食12 h后，肌肉注射復方氯胺酮（1.2 ml/kg）麻醉，采用BD一次性真空采血器（肝素），心臟采血2 ml送檢。委托濟南舜天醫院進行血常規檢測，用Coulter-JT 全自動檢測儀（美國庫爾特儀器公司生產），庫爾特公司原配試劑，阻抗法檢測，重復3次。

1.2.6統計分析實驗數據應用SPSS統計軟件進行t檢驗