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陸地棉GhBI—1基因在擬南芥中的異位表達及耐鹽性研究

2013-01-01 00:00:00高陽等
山東農業科學 2013年4期

摘要:前期工作中,我們從陸地棉基因組中分離了GhBI-1基因全長cDNA,構建了GhBI-1過量表達載體并轉化擬南芥。本研究在此基礎上,利用卡那初步篩選獲得轉基因擬南芥,通過PCR進一步驗證,得到具有卡那抗性并且遺傳穩定的T3代純合株系。利用不同濃度NaCl處理野生型和轉GhBI-1基因擬南芥,結果表明,轉基因擬南芥在200 mmol/L NaCl脅迫后,萌發率和生長情況要好于野生型擬南芥,過量表達GhBI-1基因能夠提高擬南芥耐受鹽脅迫的能力。

關鍵詞:陸地棉;GhBI-1基因;異位表達;耐鹽性

中圖分類號:Q786文獻標識號:A文章編號:1001-4942(2013)04-0001-04

我國棉花種植區多為鹽堿和干旱地區,鹽害是影響棉花生長的主要因素。活性氧(ROS)的產生是高濃度鹽對植物細胞造成傷害的主要原因。活性氧幾乎可以與所有生物大分子反應,造成脂類和蛋白質代謝異常。在高鹽脅迫下,植物細胞進行一系列復雜的分子反應,包括合成脅迫應答蛋白和滲透保護物質,這些表達產物通過清除ROS或防止ROS破壞細胞結構起到解毒作用[1]。

目前,已有多篇報道闡述了BI-1基因的功能[2~4] 。BI-1基因能夠抑制由生物或非生物脅迫引起的程序性細胞死亡[5]。BI-1蛋白位于內質網膜,與內質網應激有密切關系。BI-1蛋白包含6~7個跨膜螺旋結構,可能形成離子通道,調節ROS產生后的細胞死亡信號[6]。前期研究中,本實驗室利用陸地棉幼苗根部cDNA文庫中部分BI-1基因序列(500 bp),自陸地棉基因組中克隆了GhBI-1基因的全長cDNA[7]。熒光定量結果表明,250 mmol/L NaCl處理72 h后,棉花幼苗根中GhBI-1的表達水平分別在處理2 h和24 h時出現高峰,GhBI-1基因受鹽誘導表達上調[8],暗示GhBI-1基因可能與耐鹽性相關。……

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