胃轉(zhuǎn)流術(shù)對(duì)糖尿病大鼠二肽基肽酶—4及胰升糖素樣肽—1的影響

[摘要] 目的 探討胃轉(zhuǎn)流術(shù)（GBO）對(duì)糖尿病大鼠二肽基肽酶-4（DPP-4）及胰升糖素樣肽-1（GLP-1）的影響。 方法隨機(jī)分成糖尿病GBO組、糖尿病對(duì)照組、假手術(shù)組和正常對(duì)照組。比較各組不同時(shí)點(diǎn)血糖、DPP-4和GLP-1的差別。 結(jié)果 ①糖尿病GBO組術(shù)后1周、術(shù)后4周及術(shù)后8周血糖均較前一時(shí)點(diǎn)顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；②糖尿病GBO組和假手術(shù)組術(shù)后1周、術(shù)后4周及術(shù)后8周GLP-1均較前一時(shí)點(diǎn)顯著升高，但以糖尿病GBO組升高幅度較大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；③糖尿病GBO組和假手術(shù)組術(shù)后1周、術(shù)后4周及術(shù)后8周DPP-4均較前一時(shí)點(diǎn)顯著降低，但以糖尿病GBO組降低幅度較大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 GBO可通過(guò)降低DPP-4、升高GLP-1降低糖尿病大鼠血糖。

[關(guān)鍵詞] 胃轉(zhuǎn)流術(shù)；糖尿病；二肽基肽酶-4；胰升糖素樣肽-1；大鼠

[中圖分類號(hào)] R656.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2013）01-0017-03

研究[1]表明胃轉(zhuǎn)流術(shù)（gastric bypass operation，GBO）可有效降低肥胖大鼠術(shù)后血糖，為糖尿病（diabetes mellitus，DM）的治療打開(kāi)了新的篇章。GBO改變了腸道正常的生理結(jié)構(gòu)[2]，推測(cè)這種改變導(dǎo)致腸促激素分泌的改變。胰升糖素樣肽-1（glucagon like peptide-1，GLP-1）和二肽基肽酶-4（dipeptidyl peptidase-4，DPP-4）為最常見(jiàn)的腸促激素[3]。本研究探討GBO對(duì)糖尿病大鼠術(shù)后血糖及GLP-1和DPP-4的影響，尋找GBO降糖的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器

鏈脲佐菌素（美國(guó)，Sigma）；DPP-4酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（美國(guó)，ADL）；GLP-1酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（美國(guó)，ADL）；全自動(dòng)生化儀（美國(guó)，羅氏7600）；全自動(dòng)酶標(biāo)測(cè)定儀（意大利，Radim）；低溫離心機(jī)（德國(guó)，Hermle）。

1.2 動(dòng)物分組與造模

清潔級(jí)雄性大鼠（第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）45只，體質(zhì)量280～290 g，平均（283.15±25.67）g。飼養(yǎng)溫度（23±2）℃，濕度60%，每12小時(shí)交替照明，標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，自由進(jìn)食水。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)選取25只進(jìn)行糖尿病造模。造模方法：以35 mg/kg標(biāo)準(zhǔn)腹腔注射1%的STZ溶液，1周后采大鼠空腹尾靜脈血約1 mL，檢測(cè)其血糖，兩次均≥13.6 mmol/L穩(wěn)定5 d者為成功模型，共有21只造模成功。將造模成功大鼠中隨機(jī)選取20只納入研究，并隨機(jī)分成糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組和糖尿病對(duì)照組。將未造模的20只大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組和正常對(duì)照組。胃轉(zhuǎn)流術(shù)手術(shù)方法參照李蔚等[4]研究。

1.3 標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測(cè)

分別于術(shù)前、術(shù)后1周、術(shù)后4周及術(shù)后8周采空腹尾靜脈血，采用全自動(dòng)分析儀檢測(cè)血糖，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)GLP-1、DPP-4，具體做法參照說(shuō)明書(shū)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，服從正態(tài)分布且方差齊，兩樣本組內(nèi)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組間比較采用方差分析，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組不同時(shí)點(diǎn)血糖的比較

糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組術(shù)后1周、術(shù)后4周及術(shù)后8周血糖均較前一時(shí)點(diǎn)顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；糖尿病對(duì)照組、假手術(shù)組和正常對(duì)照組各時(shí)點(diǎn)血糖比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 各組不同時(shí)點(diǎn)GLP-1的比較

糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組和假手術(shù)組術(shù)后1周、術(shù)后4周及術(shù)后8周GLP-1均較前一時(shí)點(diǎn)顯著升高，但以糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組升高幅度較大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；糖尿病對(duì)照組和正常對(duì)照組各時(shí)點(diǎn)GLP-1比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 各組不同時(shí)點(diǎn)DPP-4的比較

糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組和假手術(shù)組術(shù)后1周、術(shù)后4周及術(shù)后8周DPP-4均較前一時(shí)點(diǎn)顯著降低，但以糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組降低幅度較大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；糖尿病對(duì)照組和正常對(duì)照組各時(shí)點(diǎn)DPP-4比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表3。

3 討論

GBO是通過(guò)胃阻斷、胃腸吻合、腸腸吻合等步驟而改變食物生理流向的手術(shù)方法[5]。最早是用在減肥手術(shù)中，后發(fā)現(xiàn)經(jīng)手術(shù)后的肥胖并伴有2型糖尿病的患者糖尿病癥狀有所好轉(zhuǎn)，經(jīng)過(guò)幾年的臨床實(shí)踐中，意外發(fā)現(xiàn)這種手術(shù)能有效地治療糖尿病，從而胃轉(zhuǎn)流手術(shù)為糖尿病患者帶來(lái)了新的福音。正如美國(guó)臨床內(nèi)分泌學(xué)家協(xié)會(huì)主席理查德·海爾曼所說(shuō)，GBO治療DM雖然初有成效，尚缺乏足夠的理論依據(jù)。因此，探討GBO治療DM的理論基礎(chǔ)為近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

目前GBO治療DM機(jī)制的探討多傾向于“腸-胰島軸”分泌的改變。GLP-1和DPP-4是最常見(jiàn)的腸促激素。GLP-1是由遠(yuǎn)端回腸、直腸和結(jié)腸的L細(xì)胞分泌的腸肽激素，它能夠通過(guò)調(diào)節(jié)胰島素及胰高血糖素的分泌和食物攝入量而調(diào)解血糖[6]。但天然GLP-1可被DPP-4迅速降解。本研究發(fā)現(xiàn)，GBO術(shù)后糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組血糖可迅速下降，至術(shù)后4周基本可達(dá)正常血糖，同時(shí)GLP-1顯著升高，DPP-4顯著降低。表明GBO對(duì)GLP-1和DPP-4的影響可能為其治療糖尿病的重要機(jī)制。值得一提的是，對(duì)于非糖尿病的假手術(shù)組，GLP-1也較術(shù)前升高，DPP-4也較術(shù)前降低，只是升降幅度小于糖尿病胃轉(zhuǎn)流術(shù)組，可見(jiàn)，GBO手術(shù)的確可以改變“腸-胰島軸”分泌。然而，本研究無(wú)法證實(shí)是GBO導(dǎo)致DPP-4降低進(jìn)而引起GLP-1降解減少，還是直接導(dǎo)致GLP-1升高。Alam等[7]對(duì)16例肥胖的2型糖尿病患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，GBO可降低DPP-4的活性。Hansen等[8]研究認(rèn)為GBO可以通過(guò)GLP-1來(lái)調(diào)解胰島素敏感性而達(dá)降糖作用。目前尚未見(jiàn)GBO對(duì)GLP-1和DPP-4相互作用關(guān)系的研究，本研究初步發(fā)現(xiàn)，GBO對(duì)GLP-1和DPP-4作用是其治療糖尿病的重要機(jī)制，但具體作用機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究。