BC—3000血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板及其參數(shù)與XT—2000i血細(xì)胞分析儀差異分析

[摘要] 目的 探討邁瑞B(yǎng)C-3000三分類血細(xì)胞分析儀與Sysmex XT-2000i五分類血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板及其參數(shù)MPV、PDW、PCT差異性。 方法 收集血小板計(jì)數(shù)正常、增高和減低的患者標(biāo)本共433例，分別用邁瑞B(yǎng)C-3000和Sysmex XT-2000i兩部血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定PLT及MPV、PDW、PCT。 結(jié)果 邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)正常組PLT及MPV、PDW、PCT與Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀無顯著差異（P > 0.05）；計(jì)數(shù)血小板增多組的PLT、MPV、PDW、PCT四項(xiàng)指標(biāo)有顯著差異（P < 0.05）；計(jì)數(shù)血小板減少組的PLT、MPV和PDW有顯著差異（PLT，P < 0.05；MPV和PDW，P < 0.01），計(jì)數(shù)PCT兩儀器無顯著差異（P > 0.05）。 結(jié)論 邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板異常者，應(yīng)用Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀對(duì)其結(jié)果進(jìn)行復(fù)核及校正。

[關(guān)鍵詞] 血細(xì)胞分析儀；血小板計(jì)數(shù)；差異

[中圖分類號(hào)] R446.11；R197.39 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2013）01-0072-02

三分類和五分類血細(xì)胞分析儀在臨床實(shí)驗(yàn)室的普遍使用，大大提高了臨床血液學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量和效率。但是隨著臨床標(biāo)本量的日益增多，許多基層醫(yī)院由于經(jīng)濟(jì)條件所限，三分類和五分類血細(xì)胞分析儀在一家臨床實(shí)驗(yàn)室同時(shí)使用的現(xiàn)象普遍存在。本文就深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的BC-3000和日本希森美康醫(yī)用有限公司生產(chǎn)的Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板及其參數(shù)MPV、PDW、PCT差異進(jìn)行探討，以期為臨床診斷及治療提供更加可靠的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

血小板計(jì)數(shù)正常組300例，均為2012年4～5月門診健康體檢者。其中男154例，女146例，年齡22～60歲。血小板計(jì)數(shù)異常組133例，其中增高組28例，男12例，女16例（真性紅細(xì)胞增多癥1例，慢性粒細(xì)胞白血病3例，急性肺內(nèi)感染4例，急性失血3例，大面積燒傷患者4例，脾亢切除術(shù)后2例，血栓性疾病5例，惡性腫瘤3例，外科手術(shù)3例），年齡5～73歲，均為我院2011年1月～2012年5月門診及住院患者；血小板計(jì)數(shù)減低組105例，男52例，女53例（再障9例，白血病化療者29例，原發(fā)性血小板減少性紫癜6例，肝硬化27例，DIC 2例，淋巴細(xì)胞白血病11例，MDS 5例，脾亢4例，服用阿司匹林引起血小板減少6例，流行性出血熱3例，不明原因血小板減低者3例），年齡6～81歲，均為我院2011年5月～2012年7月門診及住院患者。

1.2 儀器與試劑

日本希森美康醫(yī)用有限公司生產(chǎn)的Sysmex XT-2000i型五分類血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（簡稱XT-2000i），配套試劑及質(zhì)控品由Sysmex公司提供。深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的BC-3000三分類血細(xì)胞分析儀（簡稱BC-3000），配套試劑及質(zhì)控品由邁瑞公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

測定前對(duì)Sysmex XT-2000i及邁瑞B(yǎng)C-3000兩種血細(xì)胞分析儀進(jìn)行日常保養(yǎng)及維護(hù)，使儀器空白值及各項(xiàng)參數(shù)達(dá)到規(guī)定要求。血小板正常及異常組標(biāo)本均為EDTA-K2抗凝血2 mL，質(zhì)控品恢復(fù)室溫。將標(biāo)本和質(zhì)控品充分混勻，但要避免因劇烈震蕩或混勻時(shí)間過長造成溶血或產(chǎn)生氣泡，使血小板及其參數(shù)計(jì)數(shù)產(chǎn)生誤差。室內(nèi)質(zhì)控要求血小板計(jì)數(shù)每次均在控。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 11.5軟件包對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，各項(xiàng)參數(shù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀進(jìn)行測定的四組結(jié)果和采用Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀進(jìn)行測定的四組結(jié)果相比，血小板正常組PLT及MPV、PDW、PCT四項(xiàng)指標(biāo)均無顯著差異（P > 0.05），見表1。血小板增多組的PLT、MPV、PDW、PCT四項(xiàng)指標(biāo)有顯著差異（P < 0.05），見表2。血小板減少組的PLT、MPV和PDW有顯著差異（PLT，P < 0.05；MPV和PDW，P < 0.01），PCT無顯著差異（P > 0.05），見表3。

3 討論

血小板計(jì)數(shù)是臨床反映患者止血與血栓疾病的一種常用指標(biāo)，也是MPV、PDW、PCT等可靠性的基礎(chǔ)。對(duì)于同一份標(biāo)本，不同儀器對(duì)血小板計(jì)數(shù)存在差異，常影響臨床對(duì)疾病的診斷和治療效果的評(píng)估。

對(duì)正常組的研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)血小板的形態(tài)和數(shù)量基本正常時(shí)，血小板和紅細(xì)胞共同通過計(jì)數(shù)閾，血小板的大小分布能清楚地與紅細(xì)胞區(qū)分開來。邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀采用電阻抗原理。當(dāng)浮在導(dǎo)電溶液中的粒子通過計(jì)數(shù)孔時(shí)，可引起瞬間電流強(qiáng)度發(fā)生變化，相應(yīng)脈沖隨即發(fā)生改變進(jìn)行計(jì)數(shù)。它把2～30 fL范圍的細(xì)胞規(guī)定為血小板，而將25～250 fL范圍的細(xì)胞規(guī)定為紅細(xì)胞。Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀采用電阻抗結(jié)合流式細(xì)胞激光技術(shù)法進(jìn)行血小板測定。因此邁瑞B(yǎng)C-3000和Sysmex XT-2000i兩種血細(xì)胞分析儀測定正常體積范圍內(nèi)血小板，結(jié)果無差異（P > 0.05）。

對(duì)異常組的研究發(fā)現(xiàn)，由于疾病引起血小板數(shù)量增多或減少，邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)PLT、MPV、PDW、PCT與Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀存在差異。有文獻(xiàn)報(bào)道，影響儀器法計(jì)數(shù)血小板的主要因素不是血小板數(shù)量本身，而是其體積的異常改變，作為血小板體積參數(shù)PDW和MPV用于提示血小板的改變更為合理和可信[1]。在病理情況下，異常體積血小板增多。當(dāng)骨髓造血功能不良甚至衰竭、血小板生成障礙時(shí)，血液中多為小型血小板，故不僅血小板數(shù)量持續(xù)下降，其MPV也減低；當(dāng)外因引起血小板破壞增多、骨髓造血旺盛或成熟障礙時(shí)，大血小板相對(duì)增多，MPV增大，一些疾病如MDS和ITP，血小板甚至有巨型變。血小板數(shù)量和體積的改變是PCT改變的前提。再生障礙性貧血，某些抗體作用巨核細(xì)胞，導(dǎo)致巨核細(xì)胞發(fā)育受損，血小板成熟障礙，血小板體積分布不均。除了這些病理性血小板的改變，疾病本身引起的紅細(xì)胞體積變小、溶血、血小板聚集、白細(xì)胞碎片等也影響血小板檢測，表現(xiàn)為PDW的增大。

邁瑞B(yǎng)C-3000血細(xì)胞分析儀采用電阻抗原理，電阻抗法計(jì)數(shù)血小板最主要的局限性是不能除外標(biāo)本中體積和血小板相類似顆粒的干擾，這些顆粒主要包括白細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、脂類與蛋白的聚集體等。由于檢測血小板與紅細(xì)胞在一個(gè)檢測系統(tǒng)，當(dāng)紅細(xì)胞體積偏小時(shí)，即被誤認(rèn)為是血小板，從而使血小板計(jì)數(shù)假性升高[2，3]。也就是說，當(dāng)血小板與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)域有重疊時(shí)，會(huì)影響血小板計(jì)數(shù)[4]。隨著標(biāo)本放置時(shí)間延長或標(biāo)本溶血，紅白細(xì)胞破壞形成碎片，也影響血小板計(jì)數(shù)。由于紅細(xì)胞破壞后形成2.0 fL左右碎片，容易被誤認(rèn)為血小板，使血小板及其參數(shù)計(jì)數(shù)假性升高，這種情況在新生兒較多見[5]。此外，在三分類血小板體積分布圖上，2～3 fL粒子過高時(shí)，除血小板體積偏小及紅細(xì)胞碎片外，還常有灰塵、冷凝球蛋白、乳糜顆粒等雜物引起。血小板體積異常增大、血小板聚集時(shí)，三分類血細(xì)胞分析儀常將這些大顆粒作為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，使血小板計(jì)數(shù)假性減低。Sysmex XT-2000i血細(xì)胞分析儀鞘流系統(tǒng)使被檢測的細(xì)胞單個(gè)、中間、正面通過檢測部位，避免細(xì)胞重疊、偏位。熒光染料對(duì)PLT內(nèi)部核酸物質(zhì)進(jìn)行染色。染色血小板通過激光流式通道時(shí)，被激光照射，產(chǎn)生前向散射光，側(cè)向散射光，側(cè)向熒光[6]。利用散射光和側(cè)向熒光進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，使特異性和重復(fù)性得到提高。檢測到血小板體積分布異常或血小板計(jì)數(shù)非常低時(shí)，儀器便自動(dòng)采用光學(xué)血小板計(jì)數(shù)，可以排除大血小板，小紅細(xì)胞，白細(xì)胞碎片及血小板聚集時(shí)對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響[7]。特別是在決定嚴(yán)重血小板減少癥（PLT<20×109/L）患者是否需要預(yù)防性血小板輸血時(shí)，由于超過了三分類電阻抗計(jì)數(shù)血小板的范圍，Sysmex XT-2000血細(xì)胞分析儀卻能提供準(zhǔn)確結(jié)果。所以邁瑞B(yǎng)C-3000和Sysmex XT-2000這兩種血細(xì)胞分析儀對(duì)血小板計(jì)數(shù)的差異，在血小板數(shù)量和質(zhì)量異常時(shí)引起的差異尤其明顯。

綜上所述，我們認(rèn)為對(duì)于大批量的門診健康體檢者樣本的檢測，可以選用試劑成本相對(duì)低廉的BC-3000血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定。對(duì)于BC-3000血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定血小板結(jié)果異常的樣本，需用XT-2000血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行復(fù)核，以保證同一實(shí)驗(yàn)室的測定結(jié)果具有一致性，避免給臨床診斷及治療造成困惑，更好地為臨床服務(wù)。

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（收稿日期：2012-11-07）