【摘要】 眾所周知,血液細(xì)胞分析儀已經(jīng)成為當(dāng)前臨床醫(yī)學(xué)中進(jìn)行血液檢查的最重要的手段之一,在很大程度上影響著臨床醫(yī)學(xué)的進(jìn)步和發(fā)展。校準(zhǔn)工作是使用血液細(xì)胞分析儀的過程中必不可少的一個步驟。本文中,筆者首先分析了血液細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)的必要性,繼而分析了校準(zhǔn)工作的主要步驟和方法,較為全面地分析了血液細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)工作。
【關(guān)鍵詞】 血液;血液細(xì)胞分析儀;校準(zhǔn)
血液細(xì)胞分析儀是目前臨床醫(yī)療中最為普遍和有效的儀器之一,也被稱為血液分析儀、血球儀等。在血液細(xì)胞分析儀在臨床中得到廣泛應(yīng)用之前,血液的常規(guī)檢測通常是利用顯微鏡進(jìn)行人工鏡檢來完成的,隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和發(fā)展,血液細(xì)胞分析儀漸漸取代人工鏡檢,成為進(jìn)行血液分析和檢測的最重要的手段之一。而在使用血液細(xì)胞分析儀的過程中,對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)是十分必要的,接下來,筆者將圍繞血液細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)這一問題展開,簡要分析血液細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)的必要性和主要方法,希望相關(guān)工作人員能從中有所收獲。
1 血液細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)的必要性
所謂校準(zhǔn),主要是指在一定的條件下,為保證測量儀器或測量系統(tǒng)所指示量值的準(zhǔn)確性,或者實物量具和參考物質(zhì)的量值,及與之對應(yīng)的由標(biāo)準(zhǔn)所復(fù)現(xiàn)的量值之間的關(guān)系的一系列操作。在使用血液細(xì)胞分析儀的過程中,儀器的校準(zhǔn)扮演著不可或缺的重要角色,每一次安裝新儀器或是儀器維修之后都需要對儀器進(jìn)行校準(zhǔn),以保證相關(guān)工作的有效性。為此,《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理辦法》特別對醫(yī)療儀器的校準(zhǔn)做出了明確規(guī)定,要求醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)保證儀器檢測工作的完整性和有效性,對相關(guān)的檢測儀器、項目以及可能影響臨床檢驗結(jié)果的輔助設(shè)備進(jìn)行定期的校準(zhǔn),在一定程度上為儀器的校準(zhǔn)工作提供了政策上的支持和保障。
儀器校正液是通過權(quán)威部門檢測的標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)物質(zhì),但在具體的應(yīng)用過程中只能用來校準(zhǔn)相同類型的儀器,若用于其他類型的儀器則很可能達(dá)不到預(yù)期的效果,無法保障校準(zhǔn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。研究和實踐表明,最有效的校準(zhǔn)物是根據(jù)ICSH推薦參考方法定值的新鮮人體血液。所有器材都要經(jīng)過嚴(yán)格校正該校正液能適合于各種型號的儀器校準(zhǔn)之用。然而,鑒于血細(xì)胞分析檢測系統(tǒng)的配套校準(zhǔn)物往往具有價格較高、有效期短且很難迅速獲取等特點,嚴(yán)重阻礙了校準(zhǔn)物的有效推廣和普及。同時,在實際應(yīng)用過程中,還有一些血細(xì)胞分析檢測系統(tǒng)沒有配套的校準(zhǔn)物,難以進(jìn)行進(jìn)一步的校準(zhǔn)工作。在充分考慮上述因素的情況下,很多醫(yī)院選擇使用新鮮全血、穩(wěn)定血液樣品、非生物代用品等代替新鮮人體血液。
2 血液細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)的主要方法和步驟
2.1 準(zhǔn)備工作 血液細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)的準(zhǔn)備工作主要包括儀器的準(zhǔn)備和校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備。
2.1.1 儀器的準(zhǔn)備 首先,使用清潔劑清理儀器內(nèi)部各通道和測試室先用清潔劑對儀器內(nèi)部各通道及測試室30分鐘。接下來進(jìn)一步確認(rèn)儀器的背景計數(shù)、精密度及說明書規(guī)定的可攜帶污染的范圍,如無問題方能進(jìn)行校準(zhǔn),否則則要查明原因,并進(jìn)行維修。
2.1.2 校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備 校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備分為以下兩種情況:
2.1.2.1 系統(tǒng)配套校準(zhǔn)物 首先,從冰箱(2-8℃)內(nèi)將校準(zhǔn)物取出,將其在18-25℃的溫度條件下放置15分鐘的時間,待其恢復(fù)至正常室溫時再進(jìn)行接下來的操作。
其次,仔細(xì)觀察取出的校準(zhǔn)物,看其是否過期、變質(zhì)或受到了其他物質(zhì)的感染。
再次,將校準(zhǔn)物輕輕地放在手掌之中,反復(fù)地顛倒搖晃,并來回搓動,使之充分混合至勻稱的狀態(tài)。然后打開瓶塞,注意此時應(yīng)在手上墊上紗布或軟紙,避免血液濺到其他位置。最后,把兩瓶校準(zhǔn)物混合在一起,之后再分別裝到2個瓶子里面。
2.1.2.2 校準(zhǔn)物為新鮮血液 這種情況下,我們首先要做的是使用以EDTA·K2為抗凝劑的真空采血管取出約10ml的健康人新鮮血液,其中每ml血液需要的抗凝劑濃度為1.5-2.2mg。同時,要保證所取出的新鮮血液的Hb、WBC、RBC、Hct和Plt檢測結(jié)果未超出提供的參考范圍。之后再將新鮮血液混勻,分別裝在3個管內(nèi),其中,每管約為3ml。
其次,取出其中1管血液,使用二級標(biāo)準(zhǔn)檢測系統(tǒng)或其他規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)對其進(jìn)行11次連續(xù)檢測,在這個過程中第1次的檢測結(jié)果可忽略不計,將第2到第11次的檢測結(jié)果記錄下來,求出均值,將其作為新鮮血液的定值。
再次,將剩下的其他2管新鮮血來作為定值的校準(zhǔn)物,用來進(jìn)行儀器的校準(zhǔn)工作。
2.2 檢測校準(zhǔn)物 取出1瓶校準(zhǔn)物,對其進(jìn)行11次連續(xù)檢測,為防止污染,將第1次的檢測結(jié)果忽略不計,將第2至第11次的各項檢測結(jié)果仔細(xì)記錄下來,并計算出它們的均值,保證均值的小數(shù)點后數(shù)字的保留位數(shù)比日常報告結(jié)果多出一位。若儀器有自動校準(zhǔn)功能則可直接得出均值。值得注意的是,我們計算出的均值會不可避免地存在一些偏差,計算偏差的百分?jǐn)?shù)公式如下所示:
偏差(%)=均值-定值定值×100%
另外,對于沒有自動校準(zhǔn)功能的儀器,則可以用定值除以所測出的均值,將得出的結(jié)果定為校準(zhǔn)系數(shù),再用儀器原來的系數(shù)乘以校準(zhǔn)系數(shù),得到的結(jié)果即為校準(zhǔn)后的系數(shù),最后將校準(zhǔn)后的系數(shù)輸入到儀器中以替換原來的系數(shù),也就是說,新校準(zhǔn)系數(shù)=舊校準(zhǔn)系數(shù)×定值/均值。
2.3 驗證校準(zhǔn)結(jié)果 充分混合第2管未使用的校準(zhǔn)物直至完全勻稱,像上述步驟一樣重復(fù)檢測11次,并計算出均值,再將其與下列表中的數(shù)值對照。若各個數(shù)值的差異等于或小于第一列數(shù)值,則證明校準(zhǔn)是合格的。否則,則要請維修人員對儀器進(jìn)行檢修后再重新校準(zhǔn)。
3 結(jié) 語
綜上所述,我們可以看出,由于具備計數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確、精確程度較高、操作方便快捷等特點,近些年來,血液細(xì)胞分析儀得到了迅速的發(fā)展,逐漸取代了傳統(tǒng)的血液檢測方式,成了臨床醫(yī)療的主要血液檢測手段,發(fā)展前景十分廣闊。同時,也應(yīng)看到,由于血液細(xì)胞分析儀的制造較多,而相關(guān)的測定原理和方法難以得到統(tǒng)一不盡相同,致使很多儀器的測定結(jié)果及參考范圍存在著一定的差異。由此看來,為保證血液檢測工作的順利與有效進(jìn)行,血液細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)工作依然任重而道遠(yuǎn)。
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