免疫印跡法在臨床TORCH項目檢測應用價值評價

【摘要】 目的 探討醫學檢驗中免疫印跡法指標分析在TORCH項目檢測中的檢測價值。方法 將我院2010年8月至2011年3月收治的100例需要免疫印跡法進行檢測患者為研究對象，用酶標IgE和生物素/抗生物素酶標IgE三種檢測支原體方法及酶標IgG檢測軍團桿菌Ⅰ型方法，進行了血清抗體測定。結果 篩選出的50例患者（皮膚點刺在+++以上）檢測陽性率為100%，眼結膜激發試驗檢測的敏感性為91.5%，特異性為92.3%，有效性為91.4%。其引發的癥狀一般較輕微，僅限于眼部和鼻部。結論 免疫印跡法指標可作為TORCH的檢測診斷指標，在一定程度可反應病情的嚴重程度，且操作簡便，值得臨床推廣。

【關鍵詞】 免疫印跡法；臨床TORCH項目；檢測；價值

變態反應疾病之一就是我們常見的過敏性疾病，這種過敏性疾病的最大發病人群就是兒童，這種疾病是一種慢性疾病，但是對于發病者的健康很不利，在國外的臨床研究中，通常就是利用點刺實驗來作為檢測方法。這種方法對于成年患者來說當然沒有問題，但是對于兒童來說就不太方便，可操作性也是大大的降低，因為點刺檢測有很大的痛感，會引起兒童的恐懼，所以臨床上難以實現，所以現在臨床上大多使用CPT無痛實驗，是一項可以替代或優于皮膚點刺試驗適用于兒童的檢查的方法但得探討。眼結膜激發試驗（provocation tests）是模擬自然發病的條件，以少量致敏原誘發一次較輕的變態反應病發作，用以確定測試物是否為患者的致敏物[1]。經相關研究證明，眼結膜激發試驗試驗較簡便、安全且易于觀察[2]。先將我院經過血清特異性IgE檢測（sIgE）篩選出90例陽性患者為研究對象，評價此試驗方法在診斷呼吸道變態反應病因中的價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇我院從2009年12月到2011年12月收治的患兒60例，所有患兒中韓有女性患兒30例，男性患兒30例，所有患者的年齡在4到12歲不等，平均年齡為8.56歲。其中50例患兒的皮膚點刺和血清特異性IgE均顯示對屋塵螨和粉塵螨陽性（皮膚點刺在+++以上，屋塵螨和粉塵螨的特異性IgE均大于3.5kU/L）。50例患兒接受安脫達屋塵螨進行脫敏治療4-14個月。

1.2 實驗方法 點刺試驗方法與結果判定：點刺部位為前臂掌側，在受試部位編號，每種變應原間隔2-3㎝，并加上陰性和陽性對照。用標準點刺針垂直刺入真皮層，輕柔、壓力均勻地維持1s后垂直拔出點刺針，深度以刺破表皮而不出血為標準，每刺一下即換針。然后用柔紙吸除多余的溶液，主要不要混合相鄰液滴，于測試后20min判斷結果。如果呈現淡黃色皮丘，其周圍有紅斑，為陽性。皮膚反應強度與陽性對照相似時為+++；皮膚反應強于陽性對照相似時為++++，皮膚反應弱于陽性對照時標以+或++；皮膚反應與生理鹽水相同為陰性[3]。

1.3 評定標準 按照陜西科學技術出版社出版的《臨床醫學研究原理與方法》第六章“篩檢與診斷試驗的評價”中的理論和方法來確定眼結膜激發試驗的有效性、特異性和敏感性實驗的根據。

實驗的評價標準為：

①敏感性=S+病例中的CPT（+）數即TPS+病例數 ；②特異性=S-病例中的CPT（-）數即TNS-病例數 ；③有效性=TP+TNS+病例數-S-病例數 。S+病例為蠶絲誘發呼吸道變態反應的評分≥3分者，S-病例為蠶絲誘發呼吸道變態反應的評分<3分者，TP代表病例中的CPT陽性、TN代表病例中的CPT陰。

1.4 統計學處理 所有數據放入統計軟件SPSS13.0中進行計算，所有的資料都采用均數±標準差來進行表示，采用T來檢驗組間計量，統計學有意義，用P<0.05表示。

2 結 果

該組篩選出的螨變應原陽性50例患兒，sIgE陽性，但水平各不相同，IgG4水平較低，全部完成了眼結膜激發試驗進行檢查，治療前其中眼結膜激發試驗中顯示陽性者為49例，除1例有眼部過敏史，本組患者皮試≥（+++）者，眼結膜激發試驗的陽性率為100%（88/88）。另選的20例皮試陰性的健康對照者，眼結膜激發實驗的結果檢測呈陰性。特異性治療后，50例患者中經全程治療有效45例，其中sIgE的治療前為55±45KU/ml，治療后為60±43KU/ml，無顯著性差異（t=1.5，P>0.05）；IgG4水平治療前為2500±1500KU/ml，治療后23500±14500KU/ml，呈顯著性差異，（t=32.8；P<0.05）；治療后45例皮膚點刺試驗成陰性，眼結膜激發試驗的檢測結果呈陰性。在治療4個月時，有14例患者的皮膚點刺試驗成陰性，眼結膜激發試驗的檢測結果呈陰性。

3 討 論

免疫印跡法（Western blotting）是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。在多種項目檢測中都有著顯著的應用價值。本文結果中篩選出的50例患者（皮膚點刺在+++以上）檢測陽性率為100%，眼結膜激發試驗檢測的敏感性為91.5%，特異性為92.3%，有效性為91.4%。其引發的癥狀一般較輕微，僅限于眼部和鼻部。提示免疫印跡法指標可作為TORCH的檢測診斷指標，在一定程度可反應病情的嚴重程度，且操作簡便，值得臨床推廣。

參考文獻

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[3] 江玲，謝柏梅，王永興.眼結膜激發試驗在診斷呼吸道過敏疾病中的應用研究[J].西北國防醫學雜志，2004，25（6）：415-417.

[4] 李春蘭，馮明禮.變應原眼結膜激發試驗檢查同側鼻分泌物嗜酸粒細胞在呼吸變態反應中的意義[J].中國醫藥導報，2009，6（27）：18-20.