烏魯木齊市259例肺結(jié)核藥敏結(jié)果地區(qū)分布分析

【摘要】 目的 了解烏魯木齊市耐藥肺結(jié)核患者地區(qū)分布。方法 將2011年5月1日至2012年9月30日間，烏魯木齊市七區(qū)一縣疾控中心結(jié)核病防治科收治的肺結(jié)核患者標(biāo)本用羅氏管進行分枝桿菌分離培養(yǎng)鑒定，培養(yǎng)陽性菌株采用比例法對8種抗結(jié)核藥物：異煙肼、鏈霉素、乙胺丁醇、利福平、氧氟沙星、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素進行藥物敏感性試驗。并對其耐藥情況進行統(tǒng)計分析。結(jié)果 259例肺結(jié)核患者做藥敏試驗，其中本地患者182例，外地患者77例，總耐藥率分別為29.7%和22.1%，一線抗結(jié)核藥物的耐藥率分別為25.8%和15.6%。市轄七區(qū)一縣耐藥率在20%-40%之間，耐多藥率在0-10%之間。結(jié)論 本地外地及所轄區(qū)縣的耐藥率耐多藥率差別均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。異煙肼耐藥率低于全國耐藥水平。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)核分枝桿菌；痰涂片；痰培養(yǎng)；藥敏試驗

我國是全球27個耐多藥結(jié)核病高負擔(dān)國家之一，耐多藥肺結(jié)核患者數(shù)局全球第二位。《2010年全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查》[1]（以下簡稱全國流調(diào)）顯示，結(jié)核分枝桿菌分離菌株的總耐藥率為36.8%。新疆是西部欠發(fā)達地區(qū)，結(jié)核病疫情高于全國水平。為了解烏魯木齊地區(qū)耐藥結(jié)核病分布情況，遏制耐藥結(jié)核病的流行。烏魯木齊市疾控中心在將2011年5月1日至2012年9月30日間，對所轄七區(qū)一縣疾控中心結(jié)核病防治科收治的肺結(jié)核患者進行分枝桿菌耐藥調(diào)查，結(jié)果如下：

1 標(biāo)本來源和方法

1.1 標(biāo)本來源 2011年5月1日至2012年9月30日間，烏魯木齊市七區(qū)一縣疾控中心結(jié)核病防治科收治的肺結(jié)核病人。結(jié)核病實驗室同時做痰涂片檢查和分支桿菌培養(yǎng)，對培養(yǎng)陽性的菌株做藥物敏感性試驗和菌型初步鑒別。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基制備 ①基礎(chǔ)培養(yǎng)基：為無淀粉改良羅氏培養(yǎng)基，配方及制備方法按照《結(jié)核病診斷實驗室檢驗規(guī)程》[2]（以下簡稱《規(guī)程》）進行。②含藥培養(yǎng)基：購買BASO公司分支桿菌藥敏羅氏培養(yǎng)管，4℃避光保存，1個月內(nèi)使用。

1.2.2 分支桿菌培養(yǎng)（簡單法） 按照《規(guī)程》3涂2培選取標(biāo)本的要求，3份痰標(biāo)本選取陽性級別高的或標(biāo)本性狀好的2份痰標(biāo)本進行培養(yǎng)；用4%NaOH消化痰液，20分鐘內(nèi)接種于改良羅氏培養(yǎng)基37℃恒溫培養(yǎng)，2-8周出現(xiàn)陽性菌落后涂片，經(jīng)抗酸染色確認為分支桿菌后進行藥物敏感試驗和菌型初步鑒定。

1.2.3 藥物敏感性試驗（比例法） 檢測培養(yǎng)陽性菌株對8種藥物的耐藥性，最終藥物濃度為：異煙肼（INH）0.2μg/ml、鏈霉素（SM）4μg/ml、乙胺丁醇（EMB）2μg/ml、利福平（RFP）40μg/ml、氧氟沙星（OFX）2μg/ml）、卡那霉素（K）30μg/ml、阿米卡星（AK）30μg/ml、卷曲霉素（CPM）40μg/ml；①菌懸液制備：刮取菌齡2-3周的結(jié)核分枝桿菌菌落，以0.5%吐溫-80生理鹽水稀釋，與標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)媳葷峁鼙葷幔涑?mg/ml菌懸液。②比例法：試驗方法同《規(guī)程》。最終接種菌量為10-4mg和10-6mg。37℃培養(yǎng)4周后觀察結(jié)果并計算耐藥百分比：耐藥百分比=（含藥培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)）/（對照培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)）×100%。若耐藥百分比>1%，則認為受試菌對該藥耐藥（R），<1%判斷為敏感（S）。

1.2.4 菌型初步鑒定 用對硝基苯甲酸（PNB）鑒別培養(yǎng)基初步鑒別為結(jié)核分枝桿菌。

1.3 質(zhì)量控制 每批試驗用結(jié)核分枝桿菌參考菌株（H37Rv敏感株）10-2mg檢測含藥培養(yǎng)基質(zhì)量；本實驗室每年均接受兩次國參比實驗室的分枝桿菌藥敏試驗室間質(zhì)控。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)經(jīng)過專人校對后輸入計算機，采用spssl8.0對資料做卡方檢驗，以P

1.5 相關(guān)定義

1.5.1 單耐藥（mono-resistance） 結(jié)核桿菌對一種一線抗結(jié)核藥物耐藥。

1.5.2 耐多藥（Multidrug Resistance，MDR） 結(jié)核桿菌至少對異煙肼、利福平耐藥。

1.5.3 廣泛耐藥（Extensive Drug Resistant，XDR）是指結(jié)核病人不但對異煙肼、利福平耐藥，同時還對氟喹諾酮類以及氨基糖甙類注射液耐藥。

2 結(jié) 果

2.1 2011年5月1日至2012年9月30日間，烏魯木齊市疾控中心對收治肺結(jié)核患者做藥物敏感試驗者259例。其中本地戶籍182例，耐藥54例，一線抗結(jié)核藥物耐藥40例；外地戶籍77例，耐藥17例，一線抗結(jié)核藥物耐藥10例；本地戶籍與外地戶籍相比，總耐藥、一線抗結(jié)核藥物耐藥情況經(jīng)統(tǒng)計分析（P=0.21，p=0.07），差別無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

2.2 259例進行藥敏試驗患者中有71例耐藥，包括4例非結(jié)核分枝桿菌（NTM）耐藥。耐藥率為27.4%，耐多藥率為7.72%。各區(qū)縣總耐藥率經(jīng)統(tǒng)計分析（P=0.917）。各區(qū)縣H、R、S、E耐藥情況經(jīng)統(tǒng)計分析（P=0.96，P=0.77，P=0.32，P=0.77）。各區(qū)縣總耐藥、一線抗結(jié)核藥物各藥耐藥情況差別無統(tǒng)計學(xué)意義。四種一線抗結(jié)核藥物耐藥率比較差別顯著（p=0.001），見表2。

3 討 論

從調(diào)查結(jié)果我們看到，烏魯木齊市本地、外地肺結(jié)核患者的總耐藥率水平差別無統(tǒng)計學(xué)意義。由于全國流調(diào)和《新疆2011年結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查報告》[3]（以下簡稱新疆流調(diào)）所做的藥物敏感實驗的藥物只有一線抗結(jié)核藥相同，二線抗結(jié)核藥物多少不一，因此我們只對一線藥物的耐藥率做比較。本地患者四種一線抗結(jié)核藥物的耐藥率25.8%與全國流調(diào)的耐藥率36.8%比較（p=0.23）；與新疆流調(diào)的耐藥率34.9%比較（p=0.56），差別均無統(tǒng)計學(xué)意義。說明烏魯木齊市本地居民的肺結(jié)核耐藥水平并不低于全國和全疆的耐藥水平，耐藥形勢依然嚴峻。

烏魯木齊市各區(qū)縣之間總耐藥率經(jīng)分析差別無統(tǒng)計學(xué)意義。一線抗結(jié)核藥物任何藥物耐藥率比較差別也無統(tǒng)計學(xué)意義。與新疆流調(diào)一線藥物H、R、S、E耐藥率的結(jié)果15.1%、7.0%、16.3%、7.0%比較。經(jīng)統(tǒng)計分析差別也無統(tǒng)計學(xué)意義。與全國流調(diào)一線藥物H、R、S、E耐藥率的結(jié)果28.6%、8.9%、19.6%、6.8%經(jīng)統(tǒng)計比較分析，烏魯木齊地區(qū)異煙肼耐藥率低于全國該藥的耐藥水平。但是，烏魯木齊地區(qū)4種一線抗結(jié)核藥物中異煙肼的耐藥率最高.異煙肼耐藥的主要原因是治療過程中不合理的用藥、間斷用藥、用藥劑量不足等。

因此，在今后的結(jié)核病防治工作中，肺結(jié)核病人堅持早期、聯(lián)合、適量、規(guī)律、全程的治療原則，切實做好病人的督導(dǎo)管理，確保按時服藥，防止耐藥的發(fā)生，有條件的實驗室要盡可能做藥物敏感試驗，依據(jù)實驗結(jié)果，由定點醫(yī)院或?qū)？漆t(yī)院做個體化的治療。

參考文獻

[1] 王黎霞，成詩明，陳明亭，等.2010年第五次全國結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查資料匯編.中國防癆雜志，2012年8月第32卷第8期：485-508.

[2] 王甦民主編.結(jié)核病診斷實驗室檢驗規(guī)程[M].中國教育文化出版社，2006：46-51.

[3] 《新疆2011年結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報告》新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生廳內(nèi)部資料，2012.