周曉娜, 李靜平, 楊麗娟, 牛紅萍
(云南中醫學院, 云南 昆明 650500)
本實驗成功地建立了家兔盆腔粘連模型動物模型。通過肉眼觀察、病理學、血液檢查等觀察盆腔粘連模型的復制,發現盆腔粘連病變組織造模方法、感染方式、病變特點與盆腔粘連相似,值得進一步借鑒使用。現報道如下:
1.1 實驗動物 家兔,體重2.5~3 kg,雌性,未孕。10只,由云南省中醫學院動物房提供。
1.2 主要器材 醫用脫脂棉:徐州利爾康衛生材料有限公司出品;醫用逢合針:,批號P-1010509,上海醫用逢合針廠有限公司;醫用非吸收性外科縫合線:批號100412,揚州市金環醫療器械廠;持針鉗、眼科鑷等手術器械均為上海醫療器械(集團)有限公司手術器械廠;手術刀片,上海第二醫科大學杜行醫用器械廠;0號砂紙。
1.3 藥品 戊巴比妥鈉鹽:DS179,北京鼑國昌盛生物技術有限責任公司;75%乙醇消毒液:批號100810,昆明南天化工藥業有限公司出品;0.9%氯化鈉注射液:批號D101123N1,昆明南疆制藥有限公司;碘酊:批號100401,昆明利健消毒制品有限公司;2%強化戊二醛消毒劑,批號20100519,上海利康消毒高科技有限公司。
健康成熟的家兔10只,用3%戊巴比妥鈉鹽溶液麻醉家兔,去毛備皮,在無菌條件下于下腹正中切開2 cm,暴露兩側宮角及輸卵管,以0號細砂紙摩擦子宮及輸卵管的漿膜層,致漿膜層明顯擦傷出血。于60瓦日光燈下(距宮角及輸卵管20 cm)干燥20 min,還納于腹腔,逐層縫合。術后第14天剖腹,肉眼觀察盆腔是否有粘連帶形成,病理檢查是否有炎癥病變和血液檢查盆腔微循環情況。再向輸卵管-卵巢方向注射5%鎂藍溶液,同時捏緊子宮兩側,觀察輸卵管通暢程度(輸卵管通暢的判斷:通暢—注入鎂藍液無壓力,見傘端有鎂藍液溢出,輸卵管無局部膨大;不暢—注入鎂藍液有壓力,輸卵管先膨大,再見有鎂藍液溢出;阻塞—注入鎂藍液壓力大,輸卵管不脹,無鎂藍液自傘端溢出,有時見宮角部有藍染。如壺腹部膨大而傘端無鎂藍液溢出則為輸卵管遠端阻塞)[1~2]。
3.1 肉眼觀察盆腔粘連情況 術后第14天剖腹,肉眼發現子宮、輸卵管、大網膜全部粘連在一起,大量纖維結締組織合成,部分輸卵管增粗,整個盆腔損傷、充血,有膿性分泌物覆蓋。
3.2 病理改變 取增粗的輸卵管及盆腔結締組織作病理檢查,光鏡下見大量纖維結締組織明顯增生,血管擴張充血,見大量炎性細胞,有淋巴細胞、漿細胞和嗜酸性粒細胞;輸卵管管腔擴大,黏膜皺襞和肌層充血、水腫。電鏡下細胞核核膜不清,染色質內線粒體腫脹,線粒體固縮。無纖毛細胞胞膜破壞,線粒體固縮,胞核密度模糊不清。
3.3 觀察血液流變學 測家兔的血液黏度、血漿黏度及血沉和正常家兔比有統計學意義(P<0.05),說明盆腔內血液微循環障礙、組織缺氧。
3.4 觀察輸卵管通暢程度 雙側輸卵管通暢1只;雙側通而不暢1只,雙側阻塞2只,一側通暢、一側阻塞2只;一側通暢,一側通而不暢2只。一側通而不暢,一側阻塞2只。
4.1 技術要求 此模型制作過程中,在摩擦漿膜層時,因家兔盆腔組織脆弱,故要求用力輕,不能損傷子宮和輸卵管肌肉層,盡量不影響輸卵管管腔和子宮腔的組織結構,以達到只是盆腔粘連而無宮腔粘連的目的;摩擦面要覆蓋整個子宮及輸卵管的漿膜層,使整個盆腔全部粘連。如果需要的粘連面積小,則可以減少摩擦面積。
4.2 造模機制 盆腔粘連形成主要是由于損傷引起漿膜表面的炎性反應伴間質喪失,產生炎性細胞和血液滲出。滲出物在3天以上不溶解,其中發生纖維細胞增生,引起粘連形成[1]。
4.3 意義 異物刺激的機械損傷是引起盆腔粘連的原因之一。盆腔粘連發生在2/3開腹術患者中。目前多認為是由手術創傷、感染、異物反應、組織缺血等引起的炎癥反應[3]。該方法可造成明確的盆腔粘連模型,或并伴有輸卵管的異常。該復制方法簡便易行,成功率高,可復制性強,筆者曾用此方法復制模型來觀察多途徑中藥外治法治療盆腔粘連的作用,效果滿意。進一步證實了模型的可重復性和實用性。盆腔粘連目前是臨床常見疾病,復制該模型為臨床深入開展盆腔粘連的治療提供借鑒方法。
[1]尤昭玲.婦產科實驗動物學[M].北京:中國中醫藥出版社,2007:93~94.
[2]黃河玲 兔慢性輸卵管炎動物模型的建立[J].現代中西醫結合雜志,2000,20(9):1982~1983.
[3]張巧利,呂淑蘭,余姍姍.腹腔粘連、慢性盆腔痛與粘連松解術.中國婦幼健康研究[J],2006,17(3):224~226.