肺癌生物治療的研究現狀及進展

汪治宇 劉榮鳳 李 幸

1 河北醫科大學第四醫院生物治療科；2 河北醫科大學第四醫院腫瘤內科 河北省腫瘤內科診療中心

肺癌的發病率高居惡性腫瘤之首，是惡性腫瘤病死率中增長最快，危害最大的之一。盡管近年來的化療藥物層出不窮，但療效方面仍然處于難以突破的平臺期[1,2]。近年來腫瘤生物療法作為輔助療法，可消除患者體內殘存的腫瘤細胞，針對肺癌發病機制的基因治療，有望改善患者的生存質量和預后，為肺癌的臨床治療開辟了新途徑。

1 過繼免疫治療

腫瘤過繼免疫治療(adoptivecelluarimmunotherapy，ACI) 是指通過向腫瘤患者輸注具有抗腫瘤活性的免疫細胞，直接殺傷或激發機體免疫反應殺傷腫瘤細胞，達到治療腫瘤的目的[3]。

它包括非特異性激活和特異性激活的效應細胞，前者是采用非特異性刺激因子(IL-2、干擾素)刺激前體效應細胞，使其活化為具有抗腫瘤活性的效應細胞，如淋巴因子激活殺傷細胞(LAK細胞)、腫瘤浸潤性淋巴細胞(TIL)、細胞因子誘導的殺傷細胞(Cytokine-induced kill cells，CIK)；特異性激活的效應細胞是指采用腫瘤抗原作刺激物所誘導的抗腫瘤效應細胞，如樹突狀細胞(DC)，細胞毒T淋巴細胞(CD8細胞)等。其中CIK是應用最廣的一種，它是非MHC限制細胞毒性淋巴細胞，主要效應細胞是高度增生的CD3+和CD56+雙陽性表型T細胞，兼具有T淋巴細胞強大的抗腫瘤活性和NK細胞的非限制性殺瘤優點。CIK細胞是由多種細胞因子(IL-1、IL-2、IFN-γ和CD3單抗)與非貼壁外周血單個核細胞孵育產生，與LAK細胞等免疫效應細胞相比，CIK細胞具有以下特點：①增殖速度快，可在體外大量培養；②殺瘤活性高，體內外實驗證實，CIK細胞有更強大的殺瘤活性；③抑瘤譜廣；④對多重耐藥腫瘤細胞同樣敏感；⑤對正常骨髓造血前體細胞毒性很小。目前關于CIK細胞的殺傷原理尚未完全闡明，CIK對靶細胞的殺傷原理可能有兩條途徑：第一條，CIK細胞被淋巴細胞功能抗原-1有關識別結構激活導致胞質毒性顆粒依賴性的溶細胞作用，這條途徑與胞質內環磷酸腺苷(cAMP)濃度無關；第二條，CIK細胞表面的CD3樣受體被結合而激活CIK細胞產生胞質毒性顆粒介導的溶細胞反應。CIK細胞對腫瘤細胞的直接殺傷是依靠受敏感靶細胞刺激時釋放細胞毒性胞質顆粒，其中CD3+、CD56+細胞的殺傷作用最強。活化的CIK細胞可產生大量細胞因子，不僅對腫瘤細胞直接殺傷，還可通過機體調節免疫系統間接殺傷腫瘤細胞。李文峰[4]觀察到肺癌化療組聯合CIK細胞治療組與單純化療組相比，完全緩解率和生活質量有了很大提高，免疫情況得到改善，差異有統計學意義。盛春華[5]等的研究也有類似的結果，并且隨訪發現，聯合CIK組的3年生存率為 25.0% ，對照組為15.2%，差異有統計學意義。

2 肺癌疫苗

腫瘤疫苗是腫瘤生物治療的重要組成部分，近年來發展十分迅速，為腫瘤的預防和治療開避了新的途徑[6]。腫瘤疫苗可通過主動免疫方式誘導全身性的特異抗瘤效應，與手術治療，放射治療相比，作用范圍更廣泛，特別適用于多發病灶性腫瘤，廣泛轉移性腫瘤。目前應用的肺癌疫苗有腫瘤細胞疫苗，病毒疫苗，癌基因產物疫苗，人工合成多肽疫苗，抗獨特型疫苗和樹突狀細胞疫苗等，其中尤以樹突狀細胞疫苗的進展最為矚目。

2.1 樹突狀細胞(dendritic cell，DC)疫苗

DCs是細胞膜表面高表達MHCⅠ類和Ⅱ類分子，能移行至淋巴器官并刺激初始型T細胞增殖活化，具有一些相對特異性表面標志的一類細胞。它有效的遞呈腫瘤抗原，誘導機體產生殺傷細胞，抑制腫瘤生長并殺傷腫瘤細胞，消滅術后殘存的腫瘤細胞，減少復發可能性。DCs在組織中含量極微，因此，必須進行DCs的體外人工誘導以滿足對DCs基礎和臨床研究的需要。通過將DC細胞與腫瘤細胞裂解物或腫瘤抗原蛋白或多肽孵育沖擊致敏DC細胞，或采用細胞融合技術或基因轉染轉導方法導入腫瘤相關抗原(TAA)或多肽基因或細胞因子基因，使DC同時持久表達免疫原及其協同因子，使腫瘤抗原能直接提呈給T細胞，進而激發有效的抗腫瘤免疫。DC一旦進入腫瘤組織，便在趨化因子及敏感的化學因子的濃度下定向遷徙，浸入腫瘤組織中發揮作用。DC疫苗在肺癌治療方面有許多令人興奮的發現，Edward等[7]采用不同抗原負載的自體DC疫苗，用于16例(ⅠA-ⅢB期)經臨床手術或放化療后的患者后發現5例患者出現腫瘤特異性免疫應答的增強，全部患者均未出現疫苗相關性不良反應。晚期肺癌患者中同樣可出現較強的腫瘤特異性免疫應答的現象，應答強度與其接受的治療方式無關。Aki[8]應用經過半乳糖基神經酞胺負載的DC治療晚期及復發性肺癌時發現患者體內自然殺傷細胞的活性得到了明顯提高。Uede等[9]采用HLA-A24限制性的癌胚抗原(CEA652)免疫負載的自體DC疫苗，治療表達CEA的轉移性肺腺癌患者取得了令人滿意的前期效果。

2.2 肺癌細胞疫苗

肺癌的抗原性弱，如果將MHC分子共刺激信號B7分子細胞因子導入腫瘤細胞，這種基因修飾的腫瘤細胞疫苗則可增強腫瘤細胞的免疫原性及其與效應細胞的相互作用。將TAP-1基因轉入小細胞癌，可恢復肺癌細胞HLA-I類分子的表達，使其在小鼠體內的生長減慢，轉移率顯著降低；將B7-1導入肺癌細胞系中，結果自體淋巴細胞增殖能力提高，且轉染了B7-1的腫瘤細胞可引出特異性CTL克隆。轉染B7-2同樣也能有效誘發抗腫瘤免疫反應。將細胞因子IL-2等因子轉入腫瘤細胞，也取得了一定的治療效果。喻憬瑞等[10]應用腺病毒為載體構建DC-Ad-KiRas肺癌疫苗，能明顯刺激T細胞增殖及提示CTL的殺傷作用。

2.3 抗體疫苗

用針對CD3的單克隆抗體R24免疫同系小鼠而獲得的抗獨特型單克隆抗體BEG-2，能在人體中誘導產生抗CD3的抗體。Grant等報告15例接受了標準治療的SCLC患者聯合應用BEC-2和BCG皮內注射，極大地提高了中位無復發生存期(廣泛期11個月，局限期47個月)。副作用僅包括發熱及不適等輕度毒性。

3 基因治療

目前主要的研究熱點為應用新的目的基因修飾DC，構建靶向性轉染DC的新型載體，基因修飾結合其他方法以提高DC疫苗激活的效率，增強機體的抗腫瘤免疫反應。將腫瘤相關抗原基因TAA導入DC內，使DC持續表達TAA并將TAA與MHC分子結合表達于細胞表面，從而有效激活T細胞，提高DC的抗腫瘤能力。另外將細胞因子導入DC，如將IL-12，IL-7，IFN-γ等細胞因子導入DC，結果表明經修飾后的DC增殖能力明顯增強，并可產生更強烈免疫反應[11]。

以p53為靶點的腫瘤基因治療臨床前研究表明，腺病毒轉染p53基因，能抑制小鼠腫瘤生長，誘導腫瘤細胞凋亡，與化療藥物順鉑合用能增加療效，而且不影響成纖維細胞的生長。在肺癌和頭頸部腫瘤有抗瘤活性。Weill[12]對12例氣道堵塞而無法手術的肺癌患者，進行支氣管鏡下瘤內注射rAd-p53，每次劑量為1×106～1×109pfu，28天注射1次，6例患者氣道堵塞的癥狀緩解，3例患者的腫瘤達到部分緩解。但rAd-p53，也存在一些療效欠佳的報道，臨床實驗結果難以令人滿意[13]，究其原因可能與p53基因不能在靶細胞內足量表達有關[14]。在癌細胞內選擇性復制的溶瘤病毒可能是解決上述問題的途徑之一。H101是重組人類-5型腺病毒，2006年獲SFDA批準在我國上市，其選擇性地在p53功能缺失的細胞內復制，從而發揮溶瘤作用。

4 結語

腫瘤的生物治療雖然才經過短短30 年的發展，但是已經取得了矚目的成就，由于其具有傳統的治療方式如手術和放化療所無法比擬的優越性，隨著分子生物學、生物工程、免疫學等基礎理論的發展，生物治療終將成為腫瘤治療的主要手段，為肺癌乃至其他所有腫瘤患者帶來福音。

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