HPLC法測定蒙藥麻黃-4湯散劑中鹽酸麻黃堿的含量

章金鳳

（內蒙古烏蘭察布市第二醫院，內蒙古 集寧 012000）

麻黃-4湯由麻黃、山奈、川椒、甘草4味藥組成[1]。具祛風散寒，燥“協日烏素”等功效。用于風寒腰腿痛、風濕病等病癥。為了保證藥品的安全有效，參照文獻方法[2]，對處方中麻黃進行了含量測定研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：島津LC-20A SPD-M20A型檢測器，LCsolution色譜工作站。島津LC-2550型紫外分光光度計。

1.2 試劑與試藥：鹽酸麻黃堿對照品(CE),中國藥品生物制品檢定所提供；甲醇為色譜純，水為高純水，其它試劑均為分析純。

2 實驗方法與結果

2.1 色譜條件：色譜柱：Diamonsil C18柱（250×4.6mm 5μm）；流動相：乙腈-0.1%磷酸（5：95）；柱溫：30℃；檢測波長：207nm；理論板數：麻黃堿峰計不得低于6000。

2.2 對照品溶液的制備：精密稱取CE2 mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇使溶解，再加磷酸5滴，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。（每1mL中含CE40μg）

2.3 供試品溶液的制備：精密量取本品2g，置中性氧化鋁柱（100～200目，8g，內徑1cm）上，用50%甲醇洗脫，收集洗脫液約45mL，置50mL量瓶中，加磷酸5滴，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得 。

2.4 陰性對照試驗:取按處方比例并以相同工藝制備的缺麻黃的陰性對照，按2.3供試品溶液制備法制得陰性對照溶液。在上述色譜條件下，分別精密吸取陰性對照溶液、2.3對照品溶液、2.3供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，測得結果為：陰性對照色譜圖中在與麻黃對照品以及供試品色譜相對應的保留時間處無色譜峰出現，說明處方中其它藥材對麻黃的測定不產生干擾。

2.5 線性關系考察：精密稱取CE5.004mg，置50mL量瓶中，加50%甲醇使溶解，滴加磷酸5滴并用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻（0.100 mg·mL-1），精密吸取 1、2、4、6、8 、10（mL）分別置 10mL 量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，各取10μL進樣，按上述色譜條件測定,以峰面積對進樣量進行回歸分析，結果：CE在0.10008μg～1.0008μg范圍內呈的線性關系。回歸方程：Y=1546361X+17818，r=0.9997

2.6 穩定性試驗：精密吸取同一份供試品溶液10μL，分別于0、2、4、8、24(h)進樣測定，結果CE面積積分值在24h內的基本穩定不變。

2.7 重復性試驗：取同一批號（批號20060401）供試品6份，各精密量取2g，分別按2.3方法制備供試品溶液,并按確定的色譜條件操作，測得每份供試品含量，求得平均含量1.010mg·mL-1(25.25mg·g-1)，RSD 為 1.58%，表明重現性良好。

2.8 加樣回收試驗：取供試品(批號20060401，含量1.010mg·mL-19份，精密量取1mL，其中三份各精密加入CE對照品50%甲醇溶液（濃度為0.4779 mg·mL-1）1mL、其次三份各精密加入CE 50%甲醇溶液（濃度為0.4779 mg·mL-1）2mL、最后三份各精密加入CE50%甲醇溶液（濃度為1.4763 mg·mL-1）1mL，分別按含量測定項下方法操作，測定每份含量，計算回收率，結果見表1。

2.9 樣品含量測定：取 5 批(批號：051101、051002、051203、060401、060402)供試品,按2.3方法制備供試品溶液,并按確定的色譜條件測定含量，5批樣品的測定結果：21.75、20.25、26.25、25.25、28.25（mg·g-1）,平均含量為24.35（mg·g-1）。

3 討 論

本文對處方中麻黃所含有效成分CE進行含量測定研究，經方法學考察和5批樣品的測定結果表明，陰性對照試驗無干擾，具較強的專屬性。供試品中，CE與其它成分均達到較好的分離作為麻黃-4湯散劑的含量控制標準。

表1 CE加樣回收試驗結果

根據樣品中CE的性質，參照文獻[2]方法，直接將樣品置中性氧化鋁柱上，用50%甲醇45mL洗脫，加少量磷酸，用50%甲醇定容，制備供試品溶液。為保證被測成分洗脫完全，考察了同一批號供試品，用50%甲醇洗脫，收集洗脫液45ml后，再繼續收集洗脫液10mL進行測定，結果在與對照品相同的保留時間處基本無吸收，表明45mL洗脫液可以將麻黃堿洗脫干凈。

[1]遼寧省阜新衛生局.蒙醫藥方劑匯編[M].遼寧人民出版社,1976.

[2]國家藥典委員會.中國藥典一部·2005版[S].化學工業出版社,224.峰型較好，并具較適合的保留時間。該方法準確、靈敏、簡便，可