不同類型幽門螺桿菌致病力和耐藥性差異的研究

白 玉，金 涌

（通化市人民醫院 檢驗科，吉林 通化134001）

大量的流行病學調查證實，自然人群中幽門螺桿菌（HP）感染率相當高，HP在全球人群的感染率超過50%，而且隨著年齡的增加有遞增趨勢［1］，而且感染情況與致病性因地域不同有很大差異，不同國家和地區分離的HP菌株基因結構呈現人群或地區性差異，因此HP致病差異性已引起人們重視，較多的研究表明HP的致病性主要與菌型差異、感染的年齡及機體的反應性、地域性、飲食習慣等有關［2］。Ⅱ型為不產細胞毒素的HP（CagA和VacA均不表達），其毒性較弱，感染后一般無臨床癥狀［3］。本課題對不同HP菌型分組實施根治療法，比較不同類型HP用不同的治療方案治療效果和耐藥性差異，篩選出對不同類型HP更合理的根治方法。

1 資料與方法

1.1 對象 內鏡活檢胃黏膜組織切片病理診斷為HP感染的胃病患者516例，年齡15－76歲，平均40.2歲，其中慢性胃炎（CG）246例；消化性潰瘍（PU）184例，胃癌（GC）86例。

1.2 試劑 幽門螺桿菌抗體分型檢測試劑盒（免疫印跡法）購自深圳市伯勞特生物制品有限公司

1.3 方法 抽取待檢者靜脈血2ml，分離血清，按照試劑盒說明書操作，其檢測原理：將提取的HP全菌體抗原（含有CagA、VacA和尿素酶A、B亞單位等）用聚丙烯酰胺凝膠電泳按分子量大小不同依次分開，電轉印至印跡膜上，與待檢者血清反應，如果被檢血清中含有HP抗體，會與印跡膜上相應HP

抗原結合，加入酶聯第二抗體和顯色劑，HP抗原位置即出現顯色帶，與HP抗體標準區帶比較，即可判斷出何種HP感染：CagA和（或）VacA抗體陽性為Ⅰ型HP，僅出現尿素酶抗體為Ⅱ型HP，CagA、VacA和尿素酶抗體均不出現為HP陰性。對HP抗體陽性者隨機分兩組進行治療，第一組方案（三聯療法）：奧美拉唑20mg，克拉霉素500mg，呋喃唑酮100mg口服，均為2次／天，連續七天，一個療程。第二組方案（四聯療法）：奧美拉唑20mg，克拉霉素500mg，阿莫西林750mg，果膠鉍200mg口服，均為2次／天，連續七天。5－6個月后進行HP抗體復檢，觀察兩組治療效果。

1.4 統計學處理 用SPSS13.0軟件包，以病理診斷結果為金標準，計算免疫印跡檢測HP的陽性符合率。不同類型胃病HP陽性率差異采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同胃病患者兩型HP陽性率差異 在516例確診為HP感染者中，免疫印跡檢測Ⅰ型HP陽性408例，Ⅱ型HP陽性102例，HP抗體總陽性數為510例，陽性符合率為98.84%（510／516），其中Ⅰ型 HP陽性率為79.06%，Ⅱ型 HP陽性率為19.76%，Ⅰ型 HP陽性率明顯高于Ⅱ型（P＜0.01），其在CG，PU和GC中陽性率分別為63.41%、93.47%和93.02%。CG組與PU、GC組均有顯著異差（P＜0.01），PU和GC組無明顯差異（P＞0.05），見表1。

表1 516例HP感染者免疫印跡分型結果

2.2 不同類型 HP對三聯療法耐藥性差異：本文對156例感染Ⅰ型HP和84例感染Ⅱ型HP患者分別實施三聯療法，5個月后有101個Ⅰ型HP患者抗體轉為陰性，HP根除率為64.74%；71個Ⅱ型HP患者抗體轉為陰性，HP根除率為84.82%。Ⅱ型HP根除率明顯高于Ⅰ型HP（P＜0.05），說明Ⅰ型HP對三聯療法比Ⅱ型HP耐藥性高，見表2。

2.3 不同類型 HP對四聯療法耐藥性差異：本文對252例感染Ⅰ型HP和18例感染Ⅱ型HP患者分別實施四聯療法，5個月后有206個Ⅰ型HP患者抗體轉為陰性，HP根除率為81.74%；16個Ⅱ型HP患者抗體轉為陰性，HP根除率為88.88%。Ⅱ型HP根除率與Ⅰ型HP無明顯差異（P＞0.05），說明Ⅰ型HP和Ⅱ型HP對四聯療法均有較高的敏感性，見表3。

表2 不同類型HP對三聯療法耐藥性差異比較

表3 不同類型HP對四聯療法耐藥性差異比較

3 討論

因為不同的HP菌株其生物學特性、致病性和耐藥性有明顯的差異，各國學者不斷尋找HP分型的方法，目前通常采用免疫分型，細胞毒性試驗或RT－PCR等方法。免疫分型是指采用免疫學方法檢測HP感染者血中針對HP特異抗原的抗體，利用抗體的差異區分HP菌株的類型常用有血清凝集反應、酶聯免疫吸附反應和免疫印跡法［3］。本文采用免疫印跡法檢測能較全面反映人體對所感染HP菌株的體液免疫反應狀況，對研究不同HP菌型在不同疾病發生發展中的作用和HP分型診斷均有重要的意義。Xiang Z等對43個HP臨床株分析發現表達CagA和VacA的Ⅰ型HP占56%［4］。李鑫檢測1462例腹痛患兒HP抗體，其中Ⅰ型HP占57.96%，Ⅱ型 HP占42.03%［5］。張永頂等報道在115例HP抗體陽性的胃病患者中，Ⅰ型HP占81.03%，Ⅱ型HP占18.10%，Ⅰ型 HP在慢性胃炎，消化性潰瘍和胃癌的陽性率分別為58.69%、95.45%和96.15%，表明Ⅰ型HP感染更易致嚴重的消化道疾病［6］。本文用免疫印跡檢測516例確診為HP感染的胃病患者，Ⅰ型HP陽性率為79.06%，Ⅱ型HP陽性率為19.76%，Ⅰ型 HP陽性率明顯高于Ⅱ型（P＜0.01），其在CG，PU和GC中陽性率分別為63.41%、93.47%和93.02%。可見Ⅰ型HP比Ⅱ型HP具有更強的致病力，易引起較嚴重的胃病。所以臨床上不能僅限于檢出HP，還要進一步對HP分型，這對胃十二指腸疾病的病因學診斷和針對性治療有著重要的意義。

明確HP在消化性潰瘍發病上的重要作用后，人們對HP感染的治療進行過許多研究和嘗試，并從不斷的研究和嘗試中尋找到了一些治療HP感染的有效方案，有人認為隨著HP根除治療進展，胃潰瘍和十二指腸潰瘍很快將成為一個歷史性疾病。但目前要徹底根除HP仍然是比較困難的。因為還沒有一個單一的抗生素對HP感染的治療是有效的，必須采用多種抗生素聯合治療才能有效。二聯療法HP的根除率很低，三聯或四聯療法才能達到比較理想的治療效果，但聯合的抗生素越多，副作用發生的頻率越高，經費開支也更大，且隨著HP耐藥菌株的不斷增加，使藥物根除HP的難度越來越大。HP的耐藥率在不同國家或地區不盡相同，國外報道的Hp對甲硝唑耐藥率為20%－80%（平均30%－40%），對克拉霉素耐藥率為1%－20%，Hp對甲硝唑和克拉霉素的耐藥率正呈世界范圍上升趨勢［7－9］。治療方案的不規范、病人依從性差、濫用抗生素，導致Hp的耐藥現象比較嚴重。史彤等報道，我國上海地區自1995年至1999年Hp菌株對甲硝唑的耐藥率已從42%上升至70%，對克拉霉素的耐藥率從0%升至10%。成虹等對北京地區幽門螺桿菌耐藥的發生率研究發現，甲硝唑耐藥率最高達到37%，克拉霉素的耐藥率也達到13%，并已經出現阿莫西林的耐藥菌株［10］。目前常用的Hp根除方案為質子泵抑制劑（PPI）或鉍劑加2種抗生素，后者在世界范圍內較常用的包括克拉霉素、甲硝唑、呋喃唑酮、阿莫西林等。本文對HP抗體陽性者分兩組進行治療，第一組方案（三聯療法）：奧美拉唑20mg克拉霉素500mg，呋喃唑酮100mg口服，均為2次／天，連續七天，一個療程。第二組方案（四聯療法）：奧美拉唑20mg，果膠鉍200mg，克拉霉素500 mg，阿莫西林750mg口服，均為2次／天，連續七天。三聯療法對Ⅰ型HP根除率為64.74%；Ⅱ型HP根除率為84.82%。Ⅱ型HP根除率明顯高于Ⅰ型HP（P＜0.05），說明Ⅰ型HP對三聯療法比Ⅱ型HP耐藥性高。四聯療法對Ⅰ型和Ⅱ型HP根除率分別為81.74%和88.88%。兩者無明顯差異（P＞0.05），說明Ⅰ型HP和Ⅱ型HP對四聯療法均有較高的敏感性。可見Ⅰ型HP比Ⅱ型HP更易產生耐藥性，而四聯療法比三聯療法更有效的減少HP耐藥株。

本文研究結果提示：①不同類型HP致病力和耐藥性有明顯差異，Ⅰ型HP比Ⅱ型HP有更強的致病力和耐藥性，更易致消化性潰瘍和胃癌等嚴重的消化道疾病，臨床上不能僅限于檢出HP，還要進一步對HP分型，針對致病性強的Ⅰ型HP根除治療，減少抗生素的濫用。②對HP根除建議聯合用藥，本文采用的四聯療法比三聯療法更有效的減少HP耐藥株，提高HP根除率。

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