何菊芳,佟愛華,董 梅,蔣 瀅,匡鐵吉,丁修冬,孟祥紅,雷 紅
(解放軍309醫院 檢驗科,北京100091)
1.1 對象
健康對照組51例,男27例,女24例,平均年齡35歲,心、肺、肝、腎功能無異常的體檢健康者。肺結核組為初治肺結核住院63例患者,男31例,女32例,平均年齡為38歲,原發型肺結核46例,血行播散型肺結核17例。初治肺結核診斷標準符合中國結核病分類法的標準[1]。上呼吸道感染組為住院的上呼吸道感染患者,臨床癥狀有發熱、畏寒、咳嗽等,經血液分析、胸透檢查證實,符合上呼吸道感染診斷標準[2],共54例,男26例,女28例,平均年齡45歲。肝硬化組為初治肝炎后肝硬化住院患者,代償期63例,男34例,女29例,平均年齡49歲;失代償期14例,肝性腦病3例,腹水12例,消化道出血10例,男性8例,女性6例,平均年齡51歲。肝硬化診斷標準為2000年西安全國病毒性肝炎學術會議制定的病毒性肝炎防治方案[3]。
1.2 材料與方法
1.2.1 試劑與儀器 血清TP、ALB的測定在日立7600全自動生化分析儀上進行,血清蛋白電泳在法國SEBIA CAPILLRYS全自動高效毛細管電泳儀上進行,用200nm波長檢測各種蛋白質的百分比濃度;TP、ALB試劑為北京萊邦公司產品,室內質控品、定標品均為九強公司產品。電泳試劑以及室內質控為法國SEBIA公司CAPILLRYS全自動毛細管電泳配套產品。
1.3 方法 采空腹靜脈分離血清,TP、ALB檢測方法分別為雙縮脲法、溴甲酚綠法。血清蛋白電泳測定方法為高效毛細管法,嚴格按照操作規程操作。
1.4 統計學處理 應用SAS統計軟件進行數據處理,數據呈正態分布的兩組均數比較采用t檢驗,非正態分布的兩組均數比較采用秩和檢驗,結果用(±s)表示,P<0.05差異有統計學意義。
與對照組相比,三組患者中的血清蛋白組分均有改變,肝硬化組的TP、ALB水平為最低,GLOB為最高(均P<0.01),肺結核組次之(P<0.05);肝硬化組的ALB區帶百分比明顯低于對照組,γ區帶百分比明顯高于對照組(P<0.01),肺結核組次之(P<0.05),且相互間有顯著性差異(P<0.05)。上感組ALB水平、ALB區帶百分比略低(P<0.05),肺結核組、上感組的α1、α2區帶均高于對照組。
表1 各組血清蛋白組份以及血清蛋白電泳結果比較(±s)

表1 各組血清蛋白組份以及血清蛋白電泳結果比較(±s)
備注:參考范圍 TP:60-80g/L;ALB:35-55g/L;GLOB:17-33g/L;ALB:52%-62.8%,α1:3.1%-4.6%,α2:7.0%-11.1%,β1:5.3%-7.8%,β2:3.3%-6.4%,γ:13.1%-23.3%。結果與對照組相比*表示P<0.05,**表示P<0.01。
肺結核組(n=63) 上感組(n=54) 肝硬化組(n=77) 對照組(n=51)17.6±2.45 70.55±4.87 ALB(g/L) 39.26±5.77* 41.57±6.54* 27.54±6.04** 45.75±4.72 GLOB(g/L) 28.65±6.78* 26.21±5.98 34.32±6.76** 26.06±3.30 ALB(%) 51.03±6.74* 53.9±6.37* 41.51±7.45** 59.5±2.86 α1(%) 5.93±1.70* 5.99±1.49* 4.24±0.53 3.87±0.4 α2(%) 14.61±18.82** 11.79±2.41* 8.96±0.63 7.83±1.12 β1(%) 5.38±0.85 5.72±.63 5.27±0.66 5.85±0.58 β2(%) 5.72±1.13 5.95±1.55 7.59±0.89* 4.75±0.83 γ(%) 21.99±4.78* 16.65±3.8 37.54±6.06**TP(g/L) 68.9±8.41* 69.07±7.78 62.53±8.21**

圖1 各組血清蛋白電泳圖譜
血清蛋白電泳是臨床實驗室分析血清蛋白常用技術之一。通過電泳可對其蛋白全貌得以更加直接、詳盡的分析。
由表1中數據可見,與對照組相比,患者組血清蛋白水平、區帶百分率均有改變,肝硬化組的TP、ALB水平為最低,GLOB顯著升高(均P<0.01),肺結核組次之(P<0.05);肝硬化組患者血清蛋白電泳ALB區帶百分率顯著降低而γ區帶的顯著升高(均P<0.01),肺結核組次之(P<0.05)。上感組ALB水平、ALB區帶百分比略低,肺結核組、上感組的α1、α2區帶均高于對照組。
ALB主要由肝臟合成,肝損傷時其合成降低。肝硬化是指各種原因所引起的肝臟慢性、進行性的彌漫性改變,肝細胞長期受損變性和壞死后肝內結締組織再生,出現為彌漫性纖維化[4]。肝硬化組ALB水平、ALB區帶百分率的低下與其肝功能的受損密切相關。γ區帶的主要成分是免疫球蛋白,免疫球蛋白是由單核-吞噬系統合成[5]。肝細胞內質網受損的同時,肝臟對內毒素的解毒能力降低,內毒素刺激B淋巴細胞有絲分裂,此時T淋巴細胞功能缺陷,B淋巴細胞功能反而增強,使其產生的抗體增多[6]。肝細胞發生片狀壞死可造成枯否氏細胞(Kupffercell)功能失調,無法有效地發揮吞噬濾過作用,失去對抗原的處理能力,使門靜脈血中的抗原不能被清除,抗體增多而出現高抗原血癥。另外,受損的肝細胞也可作為自身抗原刺激淋巴細胞制造大量的球蛋白[7.8]。電泳圖譜中的改變更為直觀:該組患者β2和γ區帶無明顯界線,形成 “β-γ”橋,此橋的出現預示患者肝功能嚴重受損和體液免疫的應急性亢進。
肺結核是結核分枝桿菌感染導致機體細胞免疫功能下降的呼吸道傳染病,是一種與營養不良有關的疾病[9]。發熱使機體能量、蛋白質代謝消耗增加,分解代謝加速;另一方面因結核菌毒素的影響,人體蛋白合成代謝障礙[10],如營養攝入及吸收正常,仍可維持蛋白質代謝平衡,但如果蛋白質等營養物質補充不足或因消化系統功能吸收差時會導致蛋白質代謝負平衡[11]引起不同程度的血清白蛋白低下,不排除患者肝細胞受損的可能性。表中結核組γ區帶的百分率升高(P<0.05),可能與炎性反應刺激機體的免疫系統使得免疫球蛋白和C-反應蛋白含量增高有關[12]。從圖1中可以看到結核患者血清中γ區帶有所增加,雖不及肝硬化組“β-γ”橋明顯,但與正常對照組有明顯差異。該組患者血清中ALB的降低與患者蛋白質的消耗有關,也不排除有肝功受損的可能性。α1區帶主要由α1抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白組成,兩者為主要的急性時相反應蛋白,在急性炎癥時增高。α2區帶主要包括結合珠蛋白、α2-巨球蛋白、α2-脂蛋白、銅藍蛋白等成份,急性時相反應中血漿結合珠蛋白增加,在低白蛋白血癥時α2-巨球蛋白含量可增高,可能系一種代償機制以保持血漿膠體滲透壓。肺結核是結核分枝桿菌感染引起的呼吸道傳染病,感染后即可發生炎癥反應,α1、α2區帶可有增高。急性炎性反應為上呼吸道感染組患者的主要癥狀,電泳改變也以α1、α2區帶的增加為主,患者的持續高熱、飲食不良可導致ALB的降低。與此相反,肝硬化組患者為慢性感染或感染后期,α1、α2區帶可有輕度改變,但并不明顯。
綜上所述,此三種疾病患者血清蛋白電泳可有不同改變,通過對電泳圖譜的觀察比較可對患者的肝損傷、炎性反應、體液免疫狀況得到更直接的分析判斷,聯合檢測可能價值更大。
[1]中華醫學會結核病學分會.中國結核病分類法[J].中華結核和呼吸雜志,1998,21(12):716.
[2]貝政平.內科疾病診斷標準[M].北京:科技大學出版社,2001:381.
[3]中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志,2001,19(1):56.
[4]張秀明,李健齋,魏明竟,等主編.現代臨床生化檢驗學[J].第1版.北京:人民軍醫出版社,2001:1219.
[5]王鴻利,主編.實驗診斷學[M].第1版.北京:人民衛生出版社,2001:134.
[6]張紹剛.568例各型肝炎及肝硬化患者血清蛋白電泳結果分析[J].河北醫藥,1996,18(4):204.
[7]陳灝珠,主編.實用內科學[M].北京:人民衛生出版社,1998:1681.
[8]巫協寧,主編.臨床肝膽系病學[M].上海:上海科學技術文獻出版社,2002:87.
[9]謝惠安,等.現代結核病學[M].北京:人民衛生出版社,2000:161.
[10]史文霞.肺結核伴糖尿病患者臨床營養狀況觀察與分析[J].職業與健康,2002,18(4):129.
[11]陳灝珠.實用內科學[M].北京:人民衛生出版社,2001.
[12]沈 霞,主編.現代生化檢驗與臨床實踐[M].上海:上海科學技術文獻出版社,1999:100-110.