215株血培養病原菌種類及耐藥性分析

饒榮 劉志軍

隨著現代醫學的發展，侵入性診療手段增多，免疫制劑、廣譜抗菌藥物的廣泛使用，耐藥菌、條件致病菌和非條件致病菌的發病率顯著增多，由血液感染引起的敗血癥和膿毒血癥的病死率逐年增加，了解血液病原菌的分布及藥敏情況，是監測醫院感染、指導臨床合理用藥、控制細菌耐藥性產生的重要手段。近年來血標本中革蘭陽性菌已成為主要病原菌，尤其是免疫力低下者。現對我院2007～2010年門診及住院病人215例血液細菌培養陽性標本的菌株分布及藥敏結果進行回顧性分析報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 以無菌操作采取病人靜脈血液5 ml注入血培養瓶中，立即送檢。2007年1月至2010年12月期間門診及住院病人血液細菌培養標本共688份，年齡10天～90歲，其中男125例，女90例。

1.2 儀器及試劑 BD BACTECTM9120/9240全自動血培養系統及配套的血培養瓶，HX-21細菌鑒定儀及配套試劑，藥敏試驗采用K-B法(藥敏紙片購自英國Oxoid)，結果依據2006年和2007年美國臨床實驗室標準化研究所(CLSI)推薦的紙片擴散法判讀結果。

1.3 ESBLs檢測 按2004年NCLLS推薦的K-B法，用頭孢噻肟(30μg)、頭孢噻肟/克拉維酸(30μg/10μg)、頭孢他啶(30μg)、頭孢他啶/克拉維酸(30 μg/10μg)，藥敏抑菌環直徑相差≥5mm時，判定ESBLs陽性。

1.4 質控菌株 湖北省臨床檢驗中心提供的金黃色葡萄球菌 ATCC25923、大腸埃希菌 ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853。

1.5 數據分析 應用WHONET-5軟件進行分析。

2 結果

2.1 病原菌的分布情況見表1。

2.2 革蘭陽性菌對常用抗菌藥物敏感性見表2。

表1 215株病原菌的分布情況

表2 革蘭陽性菌對常用抗菌藥物敏感性(%)

2.3 革蘭陰性菌的藥物藥敏結果61.29%的大腸埃希菌和41.67%的肺炎克雷白菌產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)。大腸埃希菌、銅綠假單胞菌和肺炎克雷白菌對亞胺培南、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦的敏感性較高。結果見表3。

3 討論

我院血培養4年陽性標本數215份，陽性率為12.7%，與國內其他文獻報道相似[1-2]。我院血培養病原菌以革蘭陽性菌為主，革蘭陽性菌以凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌分離率較高，革蘭陰性菌以大腸埃希菌和銅綠假單胞菌分離率較高，這與李凡金等[3]報道的相一致。肺炎克雷白菌對亞胺培南和美羅培南的敏感性為100%，對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦的敏感性也較高。大腸埃希菌和銅綠假單胞菌對亞胺培南、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦的敏感性較高，此外大腸埃希菌對阿米卡星和妥布霉素的敏感性為＞70%。銅綠假單胞菌檢出率較高，對阿米卡星和氨曲南的敏感性為＞70%，其他的耐藥率均較高。銅綠假單胞不僅是血培養中重要的致病菌，也是醫院感染常見病原菌，由該菌引起的院內感染較為普遍，且治療困難，常形成多種耐藥，特別是對于介入治療、ICU及老年免疫力低下者的多重型耐藥性較高，應引起臨床高度重視，耐藥機制為:產生抗菌藥物滅活酶或修飾酶、改變抗菌藥物作用靶位、膜屏障與外排泵高表達[4]，高突變株的產生等。本研究中共檢出產ESBLs菌株24株，其中大腸埃希菌19株，肺炎克雷白菌5株，產ESBLs的菌株耐藥性高于非產ESBLs的菌株，耐藥機制為:藥物誘導的靶位點基因突變、qnr基因通過質粒介導而耐藥。產ESBLs菌和非產ESBLs的菌引起的感染治療不同，臨床醫生應根據藥敏結果選擇用藥，以減輕抗生素的選擇性壓力。

本研究中，凝固酶陰性葡萄球菌占分離菌的首位，凝固酶陰性葡萄球菌為條件致病菌，以前認為是共棲于皮膚、黏膜的非致病菌，但近來研究表明其具有細胞黏質等致病因子，有一定的致病能力，近年來報道由此菌引起的感染逐年增多[5]。因產凝固酶陰性葡萄球菌產生黏質，它不但有抗吞噬作用，還有助于粘附定植，并阻止抗菌藥物向細菌內滲透，故凝固酶陰性葡萄球菌檢出率高，但此菌同時也是血培養中最常見的污染菌，是否被污染，要根據病人血管內移植物、血管內導管和其他人工裝置等危險因素，患者是否具有血液感染典型的臨床癥狀、血培養的報警時間、血培養陽性≥2次、分離菌的耐藥譜等判斷，本組分離中也可能存在污染，臨床在標本采集過程中應注意防止污染，在參考試驗結果時應結合患者具體情況進行分析。 從表2可見，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌對復方新諾明、紅霉素、四環素的耐藥率＞70%，對利福平的敏感性較高，凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌對萬古霉素和替考拉寧無耐藥株，但國外已有耐萬古霉素的報道[6]，臨床應注意監測。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌耐藥率高于甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌、甲氧西林敏感凝固酶陰性的葡萄球菌，這與抗生素的使用負荷和它們的多重耐藥機制有很大關系。腸球菌除對萬古霉素和替考拉寧無耐藥株，對高濃度慶大霉素、氨芐西林、呋喃妥因的敏感性也較高。由于廣譜抗生素及免疫抑制劑的使用，血培養真菌感染亦呈上升趨勢。

表3 革蘭陰性菌對常用抗菌藥物敏感性(%)

綜上所述，我院血培養病原菌以凝固酶陰性葡萄球菌為主，其次為大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和肺炎克雷白菌。病原菌對抗菌藥物耐藥性較高。在以后工作中，應作好血液感染病原菌的監測，根據藥敏結果合理選用抗生素，更有效控制感染，減少耐藥菌株的產生。

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[3]李凡金，汪平都.550份血培養陽性標本細菌分布及耐藥性分析[J].檢驗醫學與臨床，2011，8(5):530-532.

[4]劉永芳，呂曉菊，宗志勇，等.銅綠假單胞菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥表型與外排泵表達水平的關系[J].中華檢驗醫學雜志，2008，31(9):979-983.

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[6]Zhang XC，Xu JZ.Introduction to THz wave photonics[M].Berlin:Springer，2010:175-235.