粗毛褐孔菌化學成分研究

楊修鎮

(山東省獸藥質量檢驗所，濟南 250022)

粗毛褐孔菌(Xanthochrous hispidus(Bull.exfr.)Pat.)是多孔菌科褐孔菌屬藥用真菌，具有增強機體免疫力的作用。為了綜合開發利用該藥材，本實驗對粗毛褐孔菌的乙醇提取物進行了化學成分的系統分離。經硅膠柱層析、大孔樹脂柱層析，Sephadex LH-20純化，得到5個化合物，經理化性質測定、光譜分析分別鑒定為羊毛甾二烯二醇(Ⅰ)、麥角甾醇(Ⅱ)、齒孔酸(Ⅲ)、D-阿拉伯糖醇(Ⅳ)、十八烷酸(Ⅴ)。各化合物均系首次從該藥材中獲得，它們的結構見表1。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Nicolet 750傅立葉紅外光譜儀;UV3010紫外分光光度計;AVANCE 400型核磁共振波譜儀。

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1.2 材料 薄層層析用硅膠為青島海洋化工有限公司產品，柱層析用硅膠(100～200目)為青島化學試劑廠產品，大孔樹脂為D101型，為天津海光化工有限公司產品。粗毛褐孔菌由山東省沂南縣真菌研究所提供，經鑒定為多孔菌科褐孔菌屬粗毛褐孔菌Xanthochrous hispidus(Bull.exfr.)Pat.。

2 提取與分離

取粉碎后的粗毛褐孔菌藥材，加入5倍量95%乙醇回流提取三次，每次3 h，濾過，合并濾液，濃縮為浸膏。浸膏中拌入適量硅膠(100～200目)，干燥，粉碎，分別用石油醚、乙酸乙酯、甲醇索氏提取，得到不同的提取部位。石油醚提取部位經硅膠柱層析分離，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得到1個白色片狀結晶Ⅴ。乙酸乙酯提取部位經硅膠柱層析分離，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫得到1個白色針晶Ⅱ和2個白色粉末Ⅰ與Ⅲ。甲醇提取部位經大孔樹脂層析分離，Sephadex LH-20純化得到白色針晶Ⅳ。

3 結構鑒定

化合物Ⅰ:白色粉末，mp 182～183℃，L-B反應呈陽性，表示此化合物可能為三萜或甾體類成分。1HNMR(CDCl3)譜在高場區可見 δ 0.72、0.81、0.87、0.98和1.00 ppm處五個角甲基尖峰，這是四環三萜類的典型特征。0.95ppm處為20-CH31.65和1.74 ppm處分別為26-CH3和27-CH3兩個烯丙位的甲基。另外，可見3.24 ppm處C3-H，3.65 ppm 處 C22-H，5.17 ppm 處 C-24H。13CNMR(CDCl3)譜δ 79.00和73.42 ppm為C-3和 C-22信號。121.39、134.24、134.63和135.08 ppm存在四個烯碳信號。其13CNMR(CDCl3)譜與文獻報道的羊毛甾二烯二醇比較基本一致[1](表2)。綜上所述，可證實化合物Ⅰ為羊毛甾二烯二醇。

化合物Ⅱ:白色針晶，mp 165～169℃，L-B反應呈陽性，表示此化合物可能為三萜或甾體類成分。紫外光譜有特征的三吸收峰分別為271、282和294 nm，屬于三烯特征紫外吸收或環上共軛雙鍵，并且在263 nm左右還有一個肩峰，與文獻中報道的麥角甾醇紫外特征吸收一致[2]。1HNMR(CDCl3)譜在最高場0.5～1 ppm處有六個甲基峰，1～2.45 ppm處為甾體上CH2、CH質子的堆積峰，分子中三個雙鍵共四個烯烴質子的δ信號處于較低場，5.37和5.56 ppm分別為環內雙鍵C6-H和C7-H，它們之間相互耦合分別呈單峰，5.17 ppm處為C22-H和C23-H，它們之間相互耦合后又分別與鄰位氫耦合，均呈四重峰。3.62 ppm處的多重峰為連有OH的C3-H的特征。13CNMR(CDCl3)譜 δ 139.796、119.609、116.309、141.372、135.585、131.997 ppm存在6個烯碳信號，其13CNMR(CDCl3)譜化學位移與文獻麥角甾醇比較基本一致[3](表3)。綜上所述，可證實化合物Ⅱ為麥角甾醇。

表3 化合物Ⅱ與麥角甾醇13CNMR數據比較(CDCl3，δppm)

續表

化合物Ⅲ:白色粉末，mp 290～294℃，L-B反應呈陽性，表示此化合物可能為三萜或甾體類成分。1HNMR(CDCl3)譜可見 δ 0.76、0.81、0.89、0.97、1.00、1.06、1.25、3.22、4.68、4.76 ppm 處有吸收，其中0.76～1.25 ppm為7個甲基吸收，4.68和4.76處分別為C31上α、β不飽和H的吸收，與文獻報道的齒孔酸基本一致[5]，13CNMR(CDCl3)譜 δ 134.48、134.07 ppm為環上C-8和C-9的不飽和吸收信號，δ 155.21、106.82 ppm 為 C-24 和C-31的不飽和吸收，δ 180.26處為 -COOH上的 C吸收，其13CNMR(CDCl3)譜與文獻報道的齒孔酸基本一致[4](表4)。綜上所述，可證實化合物Ⅲ為齒孔酸。

表4 化合物Ⅲ與齒孔酸13CNMR譜數據比較(CDCl3，δppm)

續表

化合物Ⅳ:白色針晶，mp 100～104℃，1HNMR(MD3OD)譜表明化學位移為3.5～3.9 ppm，為與-OH相連的CH吸收，13CNMR(MD3OD)譜有五個信號峰分別為 71.70、71.07、70.60、63.61、63.64，與文獻報道的D-阿拉伯糖醇數據基本一致[5](由于與文獻選取的溶劑不同，故數據存在整體的漂移)，見表5所示。綜上所述，可證實化合物Ⅳ為D-阿拉伯糖醇。

表5 化合物Ⅳ13CNMR(MeOD，δppm)與D-阿拉伯糖醇13CNMR數據(D2O，δppm)比較

化合物Ⅴ:白色片狀結晶，mp 66～67℃，易溶解于石油醚、氯仿，難溶于乙醇、水。紫外光譜無吸收，示無共軛結構。IR νKmBaxrcm-1:3414(O-H伸縮振動)，2918，2848(C-H 伸縮振動)，1701(C=O伸縮振動)，719顯示有(CH2)n，且 n≥4。質譜m/z:284(M+)，256，241，185，129，73 顯示該化合物為長鏈脂肪酸，推定化合物Ⅴ為十八烷酸。

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