上海市奉賢地區奶牛結核病的調查

瞿 慧 俞財榮 顧 曉 楊 濤

（上海市奉賢區動物疫病預防控制中心，上海 201499）

結核病是由結核分枝桿菌引起的一種嚴重的人畜共患的慢性傳染病。結核病除了能夠感染人外，還能引起多種哺乳動物和禽類發病，其中感染力較強的為人型、牛型和禽型結核分枝桿菌，分別引起人結核病、牛結核病和禽結核病。牛結核病是由牛結核分支桿菌和結核分枝桿菌引起的一種嚴重的人畜共患的慢性消耗性傳染病[1]。世界衛生組織（OIE）將其列為B類動物疫病，我國將其列為二類動物疫病[2]。在西方畜牧業發達的國家，牛結核病疫情曾一度相當嚴重，但是通過實施嚴格的檢疫和撲殺措施后，疫情有所控制。美國于1917年首次出現牛結核病，并及時提出根除計劃，結核菌素陽性的牛一律屠宰，經過實施“檢疫→撲殺”等措施，到1957年牛結核病基本控制。目前北歐的丹麥、比利時、德國等國家已經基本上消滅了牛結核病，英國和法國處于控制狀態。

我國的結核病流行一直十分嚴重，其嚴重程度僅次于印度，居世界第2位[3]。牛結核病在我國依然是最常見的多發性疾病，20世紀50年代我國出現過牛結核病的大流行，1955年檢出陽性率達36.4%，以后由于采取多種有效措施，陽性率大大降低。但2000年以后，隨著養牛熱在全國掀起，結核病的陽性率也逐年上升。上海市奉賢區是上海市政府確定的適度養殖區，目前轄區內有規模化奶（種）牛場19家，總存欄量達11 000多頭，是上海的奶牛養殖大區。為正確評估和掌握我區奶牛結核病總體情況，本研究對從2007～2011年（2009年未統計）全區19家規模化奶牛場近萬頭奶牛每年2次的奶牛結核病檢測數據進行分析，旨為奉賢地區奶牛結核病防控提出合理的建議，以期掌握其流行特點，同時也為上級部門防控奶牛結核病提供一手資料，現將檢測結果分析如下，供同行參考。

1 材料與方法

1.1 牛只來源

奉賢轄區內19家規模化奶（種）牛場，飼養1月齡以上奶（種）牛。

1.2 前期準備

每次奶牛結核病普檢前一個月下發檢疫通知和檢疫日程表，并要求各場做好牛只分群、驅蟲、消毒、耳標補號等工作，根據日程表等待檢疫。

1.3 材料準備

牛型提純結核菌素（哈藥集團生物疫苗有限公司生產）、剃須刀、游標卡尺、70%酒精棉、結核菌素連續金屬注射器、記錄表、一次性防護用品。

1.4 檢測方法

根據GB/T18645-2002方法（國家標準動物結核病診斷技術規范）進行操作。

1.5 判定標準和陽性處理

陽性反應：局部有明顯紅腫等炎性反應，皮厚差≥4 mm，判定為“+”。

可疑反應：炎性反應不明顯，4 mm＞皮厚差≥2 mm，判定為“±”。

陰性反應：無炎性反應，皮厚差＜2 mm，判定為“—”。

凡判定為疑似反應牛只，于第一次檢疫后2個月進行復檢，其結果仍為可疑的，再經2個月復檢，如仍為可疑的，判為陽性。凡判定為陽性的牛只上報上海市動物疫病預防控制中心，移送動物衛生監督管理部門作無害化處理。

2 結果與分析

2.1 奶牛結核病檢測總體情況

我們對2007～2011年（2009年未統計）奉賢區奶牛結核病檢測結果進行分析，詳見表1。

表1 2007～2011年奉賢區奶牛結核病檢測結果匯總表 （單位：頭次、頭、%）

圖1 結核病監測陽性率趨勢圖

根據表1看出，奉賢區奶牛存欄（檢測數）近幾年呈明顯的上升趨勢。2007年共檢測奶牛結核病17 446頭次，陽性率為0.09%；2008年共檢測奶牛結核病17 884頭次，陽性率為0.15%；2010年共檢測奶牛結核病18 268頭次，陽性率為0.04%；2011年共檢測奶牛結核病19 420頭次，陽性率為0.10%。

奶牛結核病陽性檢出率呈波浪狀，表明我區奶牛結核病疫情仍不穩定，詳見圖1。

2.2 2007～2011年各牛場結核病檢測結果

我們對2007～2011年各個牛場結核病檢測結果進行分析，發現我區奶牛結核病陽性牛分布較廣，其中有12家牛場曾經檢測到結核病陽性牛，占總牛場數的63.2%，詳見表2。

表2 2007～2011年奉賢區各牛場檢測結果 （單位：頭次、頭、%）

從表2中可以看出，奶牛結核病陽性率超過0.1%（2009～2015年結核病防治規劃中要求穩定控制區陽性率應小于0.1%）的場數有6家，占總場數的31.6%；這6家牛場共檢出陽性牛63頭，占總陽性數的83.6%，說明大部分陽性牛在這幾個老疫點中反復出現，應對以上幾個牛場重點關注。

2.3 不同年齡奶牛結核病陽性牛檢測結果

在檢測過程中，我們發現育成牛結核病陽性檢出率最高為63%，其次為犢牛，成乳牛最低，詳見表3。

表3 不同年齡奶牛結核病陽性牛檢測結果 （單位：頭、%）

2.4 2007～2011年可疑牛復檢情況統計

在檢測過程中，我們發現結核病可疑牛經過2次復檢后，其轉陰率非常高，達97.9%，詳見表4。

表4 2007～2011年可疑牛復檢情況統計 （單位：頭、%）

3 討論

（1）從表1中可知，近年奉賢區奶牛結核病陽性檢測率和可疑牛檢測陽性率呈波浪狀，陽性率在0.04%～0.15%間浮動，說明我區結核病疫情還存有不安定因素。按照農業部2009～2015年奶牛結核病防治規劃標準，連續2年結核病無疫情且陽性率＜0.10%為穩定控制區，無疫情且連續2年無結核病陽性牛檢出為凈化區。但從我區幾年來的檢測結果來看，我們離“2009～2015年防治規劃”的目標還有一定距離，仍需進一步強化檢測、消毒等技術工作，堅持自繁自養，嚴格控制奶（種）牛異地引進，確保在2015年前達到穩定控制區目標，力爭達到凈化區。

（2）筆者在這幾年的一線奶牛檢測工作中發現，其陽性牛多在幾個牛場的某幾個牛舍中被反復檢出，估算占總陽性牛的60%以上。進一步觀察其牛舍多為環境差、陰暗潮濕不通風、牛群飼養密度過大的散放牛舍，而且多數呈同舍感染。表明牛結核病容易在飼養密度大、潮濕、環境臟差的情況下呈舍內傳播，且存活時間長，不易消除。在今后的工作中應重點對這類牛群加大檢疫、加強消毒和飼養管理。

（3）從表3中得出，育成牛陽性檢測率最高，犢牛其次，成乳牛最低，因此我區奶牛檢測重點在后備牛群。但其具體原因有待進一步研究。

（4）筆者發現，在日常工作中，往往可疑反應牛經隔離消毒后復檢，其轉陰率非常高，1 212頭可疑牛經2次復檢后有1 186頭轉陰，轉陰率高達97.9%，這與有關報道稱重復檢疫時陽性率下降相符。目前PPD皮試診斷技術作為世界衛生組織（OIE）的法定的檢疫方法有著其操作簡便、容易推廣等優越性，但多年來研究表明：其結果容易受藥物、病毒、寄生蟲、PPD批號、牛只個體差異、妊娠情況、疾病、人為誤差等多種因素的影響，導致出現假陽性或假陰性。因此，我們在實踐工作中的具體做法是：檢疫前加強飼養管理，做好分群、驅蟲、消毒等工作；檢疫時嚴格按照操作規程進行；操作中誰檢疫誰判定，減少人為誤差；對個別有疑問的牛只結合同群牛6個月來的檢疫情況、牛只自身體況并根據以往實踐經驗作出綜合判定；若實在難以作出判定的，可作為可疑牛只進行隔離后復檢觀察，以提高檢測準確性。

（5）目前沒有一種檢測方法可以做到100%準確，為了減少不必要的損失，有條件的地區可采用PPD+ELISA或PPD+γ-干擾素試驗同時運用，相互彌補不足之處，盡可能提高檢測的特異性和敏感性。同時也呼吁能有特異性和敏感性高且操作方便、適合推廣的牛結核病診斷新技術能夠盡快的研發出來。

[1]Ahmed N，Mohanty A K，Mukhopadhyay U，et al.PCR-based rapid detection of Mycobacterium tuberculosis in blood from immunocompetent patients with pulmonary tuberculosis[J].Journal of Clinical Microbiology，1998，36（10）：3094-3095

[2]王忠仁.牛結核病與人結核病的相互關系[J].中國防癆雜志，2005，27（2）：123-125

[3]金鑫等.人獸共患病的現狀與防治（三）動物結核病[J].動物保健，2004，（16）：18-19