鼻炎靈丸質量標準的研究

康 建，張曉堅

(鄭州大學第一附屬醫院，河南 鄭州450052)

鼻炎靈丸由蒼耳子、辛夷、白芷、細辛、黃芩、薄荷、川貝母、淡豆豉等藥物組成，具有祛風清熱、消腫通竅的功效，用于鼻淵、鼻塞、鼻流濁涕等急、慢性鼻炎等的治療。鼻炎靈丸收載于中華人民共和國衛生部藥品標準《中藥成方制劑》第十冊［1］中，原標準較簡單，只有性狀及檢查項，無法對藥品進行有效的質量控制。辛夷、白芷、川貝母等為方中重要藥物。據文獻資料報道，辛夷主要含有木蘭脂素、辛夷脂素、松脂素二甲醚等木質素類成分［2－3］，具有抗炎、抗過敏等作用［4］;白芷中含有歐前胡素和異歐前胡素等香豆素類成分，具有抗炎、抗腫瘤等多種藥理作用［5］;川貝母主要含有川貝堿、西貝素等多種生物堿［6］，具有松弛平滑肌、鎮咳祛痰等作用［7］。根據以上主要化學成分的理化性質及鼻炎靈丸的劑型特點，本研究采用薄層色譜(TLC)法進行了白芷、川貝母的定性鑒別實驗，采用高效液相色譜(HPLC)法進行了辛夷中木蘭脂素的含量測定研究，以便更好地控制藥品質量。

1 藥品、試劑與儀器

鼻炎靈丸，安陽路德藥業有限責任公司產品，批號101201，100301，100401。白芷(批號121013－200607)、川貝母對照藥材(批號120941－200506)、木蘭脂素對照品(批號110882－200605，供含量測定用)及歐前胡素對照品(批號110857－200608)，均由中國藥品生物制品檢定所提供;甲醇、乙腈為色譜純;水為樂百氏純凈水;其他試劑均為分析純。Waters 2690 高效液相色譜儀、Waters 996 二極管陣列檢測器，均為美國Waters 公司產品;硅膠G 預制薄層板，青島海洋化工廠產品，批號030507;KQ－300 型超聲波清洗機，功率250W，頻率40 kHz，昆山市超聲儀器有限公司產品。

2 方法與結果

2．1 薄層色譜鑒別

2．1．1 白 芷

取本品2 g，研碎，加乙醚60 mL，超聲提取20 min，濾過，濾液揮發至1 mL，作為供試品溶液。取處方中除白芷外的其他藥物，按鼻炎靈丸制備工藝制備，同法制成缺白芷陰性對照溶液。另取白芷對照藥材0．5 g，同法制成對照藥材溶液。再取歐前胡素對照品，加乙酸乙酯制成每mL 含1 mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述四種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以石油醚(30～60 ℃)—乙醚(3 ∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點;缺白芷陰性對照品色譜中，在相對應的位置無干擾。白芷的TLC 圖譜見圖1。

圖1 白芷鑒別的TLC 圖譜

2．1．2 川貝母

取本品4 g，研碎，加三氯甲烷－乙醇(7∶3)混合溶液30 mL，搖勻，溫浸20 min，時時振搖，濾過，藥渣揮干溶劑，加三氯甲烷30 mL、濃氨溶液5 mL，加熱回流30 min，取出，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0．5 mL 使溶解，作為供試品溶液。取處方中除川貝母外其他藥物，按鼻炎靈丸制備工藝制備，同法制成缺川貝母陰性對照溶液。另取川貝母對照藥材2 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述3 種溶液各10～20 μL，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以正己烷—乙酸乙酯—二乙胺(12∶10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，依次噴以稀碘化鉍鉀試液和亞硝酸鈉試液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，缺川貝母陰性對照色譜中，在相對應的位置無干擾。川貝母的TLC 圖譜見圖2。

圖2 川貝母鑒別的TLC 圖

2．2 含量測定

2．2．1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱為Phenomenex Luna C18柱(4．6 mm ×250 mm，5 μm)，柱溫為35 ℃，檢測波長為278 nm，流動相為乙腈－水(35∶65)［8］，體積流量為1 mL/min，進樣體積為10 μL。理論塔板數按木蘭脂素峰計算應不低于6000。色譜見圖3。

2．2．2 對照品溶液的制備

取木蘭脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇溶液制成每mL 含50 μg 的溶液，即得。

2．2．3 供試品溶液的制備

取本品6 g，研細，取約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中;精密加人甲醇25 mL，稱定質量;超聲處理(功率250 W，頻率33 kHz)45 min，放冷，再稱定質量;用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過;精密量取續濾液5 mL;加在中性氧化鋁柱(100～200 目，2 g，內徑為1cm)上，用甲醇20 mL 洗脫，收集洗脫液，置25 mL 量瓶中;加甲醇至刻度，搖勻，濾過取續濾液，即得。

圖3 鼻炎靈丸HPLC 圖

2．2．4 陰性溶液的制備

按鼻炎靈丸處方中比例稱取除辛夷外的其他藥物，按鼻炎靈丸制備工藝制備缺辛夷陰性對照藥，按

2．2．3 項下方法制得缺辛夷陰性對照品溶液。

2．2．5 線性關系考察

精密吸取木蘭脂素對照品溶液(50．12 mg/L)2，5，7，10，15，25 μL，按上述色譜條件測定。以進樣量(X，μg)為橫坐標，峰面積積分值(Y)為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程為Y=550 013X+2 586(r=0．999 9)。結果表明:木蘭脂素在0．100 24～1．253 00 μg 線性良好。

2．2．6 精密度試驗

精密吸取同一供試品溶液，進樣10 μL，重復進樣6 次。結果木蘭脂素峰面積的RSD 為0．48%，表明精密度良好。

2．2．7 重復性試驗

取同一批樣品(批號為100401)，平行制備6 份供試品溶液，測定木蘭脂素的含量。結果RSD 為2．7%，表明重復性良好。

2．2．8 穩定性試驗

取同一供試品溶液，按上述色譜條件分別于0，2，4，6，8，10 h 測定木蘭脂素峰面積積分值。結果峰面積的RSD 為0．54%，表明供試品溶液在10 h 內基本穩定。

2．2．9 加樣回收率試驗

精密稱取已知含量的本品(批號為100401，木蘭脂素含量5．423 8 mg/g)約0．5 g，精密加入質量濃度為0．501 2 g/L 的木蘭脂素對照品甲醇溶液5 mL，再精密加入甲醇溶液20 mL，按2．2．3 項下方法制備加樣供試品溶液。精密吸取對照品溶液與供試品溶液，分別注入液相色譜儀，測定木蘭脂素含量，計算加樣回收率。結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

2．2．10 樣品含量測定

按2．2．3 項下方法制備供試品溶液，測定3 批鼻炎靈丸中木蘭脂素的含量，平行測定2 次，結果見表2。

表2 3 批樣品含量測定結果

3 討 論

鼻炎靈丸原標準較簡單，只有性狀及檢查項，不能對藥品進行有效的質量控制。本文采用薄層色譜法增加了藥品中白芷、川貝母的定性鑒別，采用HPLC 法進行了辛夷中木蘭脂素的含量測定，豐富了藥品的定性定量指標，與原標準相比，可更好的控制藥品質量，確保藥品的安全有效性。

在鼻炎靈含量測定研究過程中，曾比較了超聲提取及加熱回流等不同的方法制備供試品溶液，結果超聲提取較簡便且提取雜質較少，因此選用超聲提取的方法制備供試品溶液。另外，在實驗中還考察了超聲提取后上氧化鋁柱除雜后進樣及超聲提取后直接進樣的方法，結果超聲提取后直接進樣的供試品溶液色譜雜質峰較多，且木蘭脂素峰與相鄰的雜質峰較難達到基線分離，而經氧化鋁柱處理過的供試品色譜圖中雜質峰明顯減少，木蘭脂素峰與雜質峰分離度較好，因此選用超聲提取后上氧化鋁柱后進樣的方法制備供試品溶液。

［1］中華人民共和國衛生部．衛生部藥品標準新藥轉正標準:第十冊［S］．1997:32．

［2］蔡海敏，范偉，王旭東．木蘭屬植物化學成分及其藥理作用研究進展［J］．中國藥房，2011，22(39):3735．

［3］馬玉良，韓桂秋．辛夷中木脂素成分的研究［J］．中國中藥雜志，1995，20(2):102．

［4］李小莉，張永忠．木蘭脂素抗炎、抗過敏作用的實驗研究［J］．中草藥，2002，33(11):1014．

［5］王洪志，李惠芬，周靜，等．HPLC 法測定元胡止痛片中歐前胡素和異歐前胡素［J］．中草藥，2007，38(7):1018．

［6］童志遠，顏曉燕．貝母化學成分及質量控制方法研究進展［J］．西南軍醫，2009，11(2):260．

［7］朱丹妮，蔣瑩，陳婷，等．組織培養川貝母化學成分和藥理作用的研究［J］．中國藥科大學學報，1992，23(2):118．

［8］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典:一部［M］．北京:化學工業出版社，2005:405．