麥門冬多糖對高同型半胱氨酸血癥大鼠心肌缺血再灌注血管緊張素和內(nèi)皮素-1的影響

楊 鑫 馬越嬌 王 實 劉曉舒 宋光熠 姜雅秋

(遼寧省基礎醫(yī)學研究所藥理研究室，遼寧 沈陽 110101)

高同型半胱氨酸血癥(Hhcy)是引發(fā)動脈粥樣硬化及心腦血管疾病的病因之一，實驗表明Hhcy可引發(fā)血管內(nèi)皮損傷并加重心肌缺血再灌注的心肌損傷作用，麥門冬多糖等藥物對Hhcy及其引發(fā)動脈粥樣硬化及心腦血管疾病具有一定的防治作用〔1～3〕。為尋找有效的防治藥物，同時探討相關(guān)藥物的防治機制，我們應用腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg復制Hhcy大鼠模型，在此基礎上觀察麥門冬多糖對Hhcy大鼠心肌缺血再灌注的防治作用。

1 材料與方法

1.1 材料 8周齡(體重190～210 g)SD大鼠(沈陽醫(yī)學院實驗動物中心)。實驗動物許可證為遼寧省科學技術(shù)廳簽發(fā)，許可證號：SCXK(遼)2003-0016。飼料為繁育鼠全價固體顆粒飼料(沈陽市于洪區(qū)前民動物飼料廠)。L-半胱氨酸(美國Sigma公司)。肌酸肌酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、血管緊張素(Ang)Ⅰ、AngⅡ、內(nèi)皮素(ET)-1、同型半胱氨酸測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。麥門冬多糖(北京普惠天悅生物科技有限公司)。RM6240多道生理信號采集系統(tǒng)(成都儀器廠)。UV-265FW紫外分光光度計(日本光電工業(yè)株式會社)。JW-I型微型人工呼吸機(第二軍醫(yī)大學)。A5082酶標儀(泰燦奧地利有限責任公司)。

1.2 方法 取SD大鼠30只，隨機分為3組，每組10只，雌雄各半。正常對照組，每天腹腔注射生理鹽水5 ml/Kg;HHcy模型組，每天腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg;麥門冬多糖干預組，每天腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg，灌胃給予麥門冬多糖。所有大鼠均飼以常規(guī)動物飼料和水。連續(xù)給藥10 w于末次給藥30 min后腹腔注射戊巴比妥鈉(30 mg/kg)，麻醉后氣管插管安裝呼吸機，開胸結(jié)扎冠狀動脈左室降支60 min后松開結(jié)扎線再灌注60 min。各組標Ⅱ?qū)?lián)全程記錄心電圖，并于再灌注60 min后取血、心臟。分離血清，生理鹽水10%心肌組織勻漿，3 000 r/min離心15 min，取上清液。血清及心肌組織勻漿上清液按照測定試劑盒操作說明書測定 CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1、同型半胱氨酸。

2 結(jié)果

2.1 血清同型半胱氨酸的變化 SD大鼠腹腔注射2%L-半胱氨酸5 ml/kg 10 w后，Hhcy模型組和麥門冬多糖干預組大鼠血清同型半胱氨酸明顯增高(P＜0.01)，見表1。

表1 麥門冬多糖對Hhcy大鼠心肌缺血再灌注血清CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1的影響( s，n=10)

表1 麥門冬多糖對Hhcy大鼠心肌缺血再灌注血清CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1的影響( s，n=10)

與Hhcy模型組比較：1)P＜0.01

組別 同型半胱氨酸(μmol/L)CK(U/ml)LDH(U/ml)AngⅠ(μg/L)AngⅡ(μg/L)ET-1(ng/L)1 1 773.7±148.2 145.0±46.3正常對照組 3.40±1.281) 2.29±0.961) 6.80±0.781) 309.6±98.71) 1 338.6±230.91) 48.8±8.61)麥門冬多糖組 18.82±6.05 1.49±0.411) 8.27±1.211) 415.0±101.71) 1 648.8±166.91) 57.6±17.71)Hhcy模型組 27.33±5.66 3.77±0.78 10.16±1.13 681.7±173.

2.2 心肌缺血再灌注心電圖的變化 各組大鼠結(jié)扎冠狀動脈左室降支60 min后及松開結(jié)扎線再灌注60 min后均表現(xiàn)為R波下降，ST段抬高并與T波融合為單項曲線，其中Hhcy模型組、麥門冬多糖干預組PP間期延長;正常對照組PP間期無明顯變化。R波下降、PP間期延長各組間存在明顯差異。Hhcy模型組出現(xiàn)4例心律失常，主要表現(xiàn)為心律不齊及PQ、QRS、QT間期延長的廣泛傳導阻滯。

2.3 心肌缺血再灌注CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1的變化Hhcy模型組大鼠血清 CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1明顯高于正常對照組(P＜0.01)。麥門冬多糖干預組大鼠血清 CK、LDH、AngⅠ、AngⅡ、ET-1 明顯低于 Hhcy模型組(P ＜0.01)，見表1。

3 討論

麥門冬又名麥冬，是百合科植物麥冬的干燥塊根，其味甘、微苦、性微寒，歸心、肺、胃經(jīng)。含有甾體皂苷、高異黃酮、β-谷甾醇、糖類。具有多種藥理作用，在心血管系統(tǒng)有抗心律失常和抗心肌缺血的作用〔4～6〕。Hhcy作為心腦血管疾病發(fā)病的獨立危險因素已被大量的動物實驗及臨床試驗證實，Hhcy加重缺血再灌注損傷的機制尚未完全明確，可能與血管損傷、促進氧化應激作用、增加鈣的細胞毒性作用、引起線粒體功能障礙、加重興奮性氨基酸毒性及促進DNA的損傷等多種因素有關(guān)〔7〕。本實驗表明Hhcy大鼠心肌缺血再灌注后的損傷明顯較正常大鼠加重。腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)是體內(nèi)一組重要的血管活性物質(zhì)，AngⅡ是其主要的有效成分。它是一系列蛋白水解反應的產(chǎn)物，開始于由腎素介導的血管緊張素Ⅰ的轉(zhuǎn)變。AngⅠ對生物體內(nèi)多數(shù)組織和細胞沒有活性作用;而AngⅡ和AngⅢ卻有較強的作用，尤以前者為甚。AngⅡ通過血管平滑肌、腎、腎上腺皮質(zhì)等靶器官的相應受體而發(fā)揮生理效應。AngⅡ的受體主要有AT1和AT2兩種亞型。AT1受體分布于人體的血管、心臟、肝、腦、肺、腎和腎上腺皮質(zhì)、胃腸、子宮、胎盤、附睪和輸精管。AT1受體又可分為AT1A受體、AT1B受體和AT1C受體。AngⅡ主要通過AT1受體發(fā)揮其心血管作用。本研究表明Hhcy大鼠心肌缺血再灌注與正常大鼠心肌缺血再灌注比較血清MPO、CRP含量明顯升高，麥門冬多糖干預后明顯降低。進一步證實Hhcy及在此情況下的心血管事件與炎癥反應關(guān)系極其密切，麥門冬多糖通過抑制炎癥反應對Hhcy大鼠心肌缺血再灌注損傷具有保護作用。

1 宋光熠，黃 波，董 瑤，等.硫酸軟骨素對高同型半胱氨酸血癥過氧化影響〔J〕.中國公共衛(wèi)生，2008;24(5)：603.

2 姜雅秋，宋光熠，譚 巖，等.高同型半胱氨酸血癥致動脈粥樣硬化的實驗研究〔J〕.中國老年學雜志，2007;27(22)：2169-70.

3 蘇 丹，王 實，夏大梅，等.麥門冬多糖對Hhcy大鼠心肌缺血再灌注保護作用〔J〕.中國公共衛(wèi)生，2011;27(4)：470-1.

4 徐德生，馮 怡，周躍華，等.麥冬多糖中抗急性心肌缺血活性部位研究〔J〕. 中成藥，2004;26(10)：832-7.

5 周躍華，徐德生，馮 怡，等.麥冬提取物對小鼠營養(yǎng)血流量的影響〔J〕. 中國實驗方劑學雜志，2003;9(1)：22-4.

6 程金波，衛(wèi)洪昌，章 忱，等.麥冬提取物抗犬心肌缺血的藥效學實驗研究〔J〕. 中國病理生理雜志，2001;17(8)：810.

7 王 靜.高同型半胱氨酸血癥與腦缺血再灌注損傷關(guān)系的研究進展〔J〕. 中華臨床醫(yī)學實踐雜志，2007;6(6)：409-11.