系數倍率法測定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量

張 青，婁月芬，唐躍年（上海交通大學醫學院附屬新華醫院藥劑科，上海 2 0 0 0 9 2）

系數倍率法測定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量

張 青＊，婁月芬，唐躍年（上海交通大學醫學院附屬新華醫院藥劑科，上海 2 0 0 0 9 2）

目的：測定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量。方法：采用系數倍率法，樣品不經分離直接測定免洗手消毒液中醋酸氯己定的含量，測定波長為2 6 0、2 8 0nm。結果：醋酸氯己定檢測濃度線性范圍為8～1 2μg·mL－1（r＝0.9 9 99），平均回收率為1 0 0.6 6%（RSD＝0.2 1%）。結論：本方法操作簡便快速、結果準確，可用于該制劑的質量控制。

免洗手消毒液；醋酸氯己定；含量測定；系數倍率法

免洗手消毒液作為外用消毒劑，用于快速手清潔和消毒，是我院常用制劑，其主要由醋酸氯己定、卡波姆9 4 0、甘油、乙醇等制成。鑒于卡波姆9 4 0在紫外區有吸收，會干擾主藥醋酸氯己定的測定，筆者根據系數倍率法的原理，不經分離直接測定醋酸氯己定的含量。結果表明本方法操作簡便快速、結果準確，可用于該制劑的質量控制。

1 儀器與試藥

HP-8 4 5 3紫外分光光度儀（美國惠普公司）。

免洗手消毒液（自制，批號：0 9 0 4 1 6、0 9 0 5 1 4、0 9 0 9 2 3，規格：5 0 0 mL∶0.2 5 g）；醋酸氯己定標準品（中國食品藥品檢定研究院，批號：0 1 8 3-9 4 0 1，純度：≥9 9%）；醋酸氯己定原料藥（錦州九泰藥業有限責任公司，批號：0 7 0 3 0 2，純度：≥9 7.5%）；卡波姆9 4 0（青島美生源生物科技有限公司，批號：2 0 0 8 1 2 0 4）；水為重蒸餾水。

2 方法與結果

2.1 波長對的選擇

精密稱取1 0 5℃干燥至恒重的醋酸氯己定標準品約5 0 mg，置于1 0 0 mL量瓶中，加9 5%乙醇溶解并稀釋至刻度，得溶液Ⅰ，搖勻。按處方比例，精密稱取1 0 5℃干燥至恒重的卡波姆9 4 0約0.3 g，置于1 0 0 mL量瓶中，加入適量水，溶脹過夜，加甘油1.5 g、9 5%乙醇6 8 mL，用適量三乙醇胺調節后，加水至刻度，搖勻，得溶液Ⅱ。精密量取溶液Ⅰ、Ⅱ各1.0mL，分別加6 0%乙醇稀釋至5 0 mL。以6 0%乙醇作參比，在2 0 0～3 5 0 nm波長范圍內掃描，紫外吸收光譜見圖1。

圖1 紫外吸收光譜圖1.醋酸氯己定；2.輔料Fig 1 UV spectrogram 1.chlorhexidine acetate；2.excipients

從圖1可見，溶液Ⅰ的最大吸收波長為2 6 0 nm（即醋酸氯己定的最大吸收波長），溶液Ⅱ無最大吸收峰，但在2 6 0 nm波長也有吸收，可干擾醋酸氯己定的測定，故采用系數倍率法以消除干擾。根據系數倍率法的要求[1]：吸光度之差ΔA要盡可能大、吸收光譜盡可能在曲線平坦處和倍率系數（K值）接近1。因此選擇2 6 0、2 8 0 nm為測定和參比波長。

2.2 K值的測定

精密量取溶液Ⅱ0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2mL分別置于5 0 mL量瓶中，各加冰醋酸1 mL，加6 0%乙醇稀釋至刻度，搖勻。以6 0%乙醇作參比，每種溶液均在2 6 0、2 8 0 nm波長處測定吸光度A260、A280，按倍率系數K＝A260/A280計算平均值K＝

1.1 2 9 8，RSD＝0.5 0%（n＝7）。

2.3 標準曲線的制備

精密量取溶液Ⅰ0.8、0.9、1.0、1.1、1.2 mL分別置于5 0 mL量瓶中，加6 0%乙醇稀釋至刻度，搖勻。以6 0%乙醇作參比，每種溶液均在2 6 0、2 8 0 nm波長處測定A260、A280，并計算吸光度差值ΔA＝A260－KA280，可得ΔA與濃度（c）的回歸方程：ΔA＝0.0 2 9 8 2 c+0.0 0 2 4 3（r＝0.9 9 9 9，n＝5）。結果顯示，醋酸氯己定檢測濃度線性范圍為8～1 2μg·mL－1。

2.4 精密度試驗

取同一樣品溶液適量，共5份，平行測定。結果顯示，醋酸氯己定含量的RSD＝0.3 8%（n＝5），表明該方法精密度良好，能滿足含量測定的要求。

2.5 穩定性試驗

取同一樣品溶液適量，分別于0、2、4、8、2 4h依次測定。結果顯示，醋酸氯己定含量的RSD＝0.5 5%（n＝5），表明在室溫下樣品溶液在2 4 h內穩定，能滿足含量測定的要求。

2.6 回收率試驗

精密稱取1 0 5℃干燥至恒重的醋酸氯己定標準品適量，按處方比例制備模擬溶液，精密量取0.8、1.0、1.2mL分別置于5 0 mL量瓶中，各加冰醋酸1 mL，加6 0%乙醇稀釋至刻度，搖勻。以6 0%乙醇作參比，在2 6 0、2 8 0 nm波長處測定A260、A280，計算ΔA，并代入回歸方程計算濃度及回收率，結果見表1。

表1 回收率試驗結果（n＝9）Tab 1Results of recovery test（n＝9）

2.7 樣品含量測定

取3批樣品，精密量取1.0 mL分別置于5 0 mL量瓶中，各加冰醋酸1 mL，加6 0%乙醇稀釋至刻度，搖勻。以6 0%乙醇作參比，在2 6 0、2 8 0 nm波長處測定A260、A280并計算ΔA，代入回歸方程計算醋酸氯己定含量，結果3批樣品中醋酸氯己定含量分別為標示量的1 0 2.6 6%、1 0 1.2 8%、1 0 2.0 3%。

3 討論

應用等吸收雙波長消去法時，干擾組分的吸收光譜中至少需要有1個吸收峰/谷，這樣才有2個波長處存在等吸光度值。如干擾組分的吸收光譜中找不出等吸收波長，就不能用此法，而系數倍率法可克服這一困難[2]。在應用系數倍率法時，應注意對K值的選擇，防止因K值過大而使信噪比減小，影響ΔA的穩定性。同時選擇2個波長時，應避免在光譜曲線的“陡坡”上測定，并使2個波長保持合理的距離[1]。

卡波姆為丙烯酸鍵合丙基蔗糖或季戊四醇烯丙醚的高分子聚合物，分子中有大量的羧酸基，為引濕性很強的白色疏松狀粉末。在試驗初期的樣品處理過程中筆者發現，按處方比例，將各組分逐一用6 0%乙醇溶解、稀釋、紫外掃描，各組分在2 6 0 nm波長下的吸光度之和不等于樣品在2 6 0 nm波長下的吸光度，且有較大的誤差，這是與吸光光度法的基本定律“朗伯-比爾定律”相背離的。在排除操作上可能存在的問題后，發現溶液中的溶質卡波姆可因濃度改變而有離解、締合、與溶劑間發生作用等原因而發生偏離定律的現象[2]；且卡波姆所形成的膠體亦可引起入射光的散射，對透射光的強度有直接影響，進而使吸光度產生偏差。

于是將樣品稀釋液進行超聲處理后，但仍未見明顯效果。考慮到可能是因為處方中的三乙醇胺已使卡波姆的結構發生改變，即羧酸基已被反應，超聲未能增加其解離或溶解。于是采用化學降解的方法[3]，加入適量酸類降解試劑冰醋酸，發現能有效解決上述現象。需要注意的是，不能加入鹽酸作為酸類降解試劑，因為二者會反應生成鹽酸氯己定，而后者是極微溶于水和乙醇的，會更大地影響樣品的紫外吸收。而且主藥本身就是氯己定的醋酸鹽，加入冰醋酸不會對主藥產生任何物理和化學上的改變。

卡波姆在水中溶脹的過程中，可適當攪拌以促進溶脹，但是由于其較大的黏度以及疏水性，會產生大量的氣泡。制劑制備時可采用“酸堿法”[4]，即先將其調節為pH 2.5以下，膠體黏度降低成液體，氣泡則自動消失，再調節為pH 6～1 1時成凝膠，可提高制劑質量，使凝膠更加細膩。該制劑處方中添加的甘油可促進卡波姆浸潤溶脹，且具有保濕作用[5]。

本方法將除醋酸氯己定以外的其他組分均作為一個整體去確定K值，直接消除吸收干擾，無需進行分離，有一定的創新意義；且操作簡便快速、結果準確，可用于該制劑的質量控制。

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[2] 李發美.分析化學[M].第5版.北京：人民衛生出版社，2 0 0 3：1 9 8-2 1 3.

[3] 高素蓮，周寧國.現代分離純化與分析技術——在高分子材料研究中的應用[M].合肥：中國科學技術大學出版社，2 0 0 7：2 4 2-2 4 3.

[4] 梅清華，勵石寒，高 玲.卡波姆凝膠制備的新方法[J].中國醫院藥學雜志，2 0 0 6，2 6（1）：8 2.

[5] 鄧 平，時 濤，邵 峰，等.氯麻滴鼻凝膠的制備及質量控制[J].中國藥房，2 0 0 8，1 9（1 9）：1 4 8 8.

Content Determination of Chlorhexidine Acetate in Wash-free Antiseptic Lotion by Coefficient Multiplying Ratio Spectrophotometry

ZHANG Qing，LOU Yue-fen，TANG Yue-nian
（Dept.of Pharmacy，Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University School of Medicine，Shanghai 2 0 0 0 9 2，China）

OBJECTIVE：To determine the content of chlorhexidine acetate in Wash-free antiseptic lotion.METHODS：The content of chlorhexidine acetate was directly determined at 2 6 0nm and 2 8 0nm by coefficient multiplying ratio spectrophotometry without preliminary separation.RESULTS：The linear range of chlorhexidine acetate was 8～1 2μg·mL－1（r＝0.9 9 99）with an recovery of 1 0 0.6 6%（RSD＝0.2 1%）.CONCLUSION：The method is proved to be simple，rapid，accurate and applicable for the quality control of wash-free antiseptic lotion.

Wash-free antiseptic lotion；Chlorhexidine acetate；Content determination；Coefficient multiplying ratio spectrophotometry

R9 2 7.2；R9 7 9.7

A

1 0 0 1-0 4 0 8（2 0 1 2）3 3-3 1 2 9-0 2

DOI1 0.6 0 3 9/j.issn.1 0 0 1-0 4 0 8.2 0 1 2.3 3.2 2

2 0 1 1-0 9-1 0

2 0 1 2-0 2-1 0）