手足病病原體流行特征分析及臨床意義

曲 榮

（長春市綠園區疾病預防控制中心，吉林 長春 130062）

手足口病（hand，foot and mouth disease，HFMD），是由多種腸道病毒引起的常見急性傳染病，以嬰幼兒發病為主，少年兒童和成人感染后多不發病，但是具有一定的傳染性[1]。臨床癥狀主要以發熱以及手、足、口腔等部位的皰疹為主，少數患兒可發生肺水腫、心肌炎、急性遲緩性癱瘓、無菌性腦膜腦炎等嚴重的并發癥甚至導致死亡。近年來，馬來西亞、中國臺灣、澳大利亞、新加坡等地不斷有HFMD 暴發流行。引起HFMD的病原體主要為腸道病毒屬的病毒、小RNA病毒科，包括腸道病毒71型（EV71），埃可病毒（ECHO），柯薩奇病毒A組和柯薩奇病毒B組。CA16 和 EV71 是近年 HFMD 流行的主要病原體，在中國大陸及臺灣、日本、新加坡等地區多次爆發流行，引起多例病例死亡。這兩種病毒的遺傳背景相近，但EV71感染引起臨床重癥病例的比例較大。本文收集2010年1月至2012年1月的具有典型臨床表現的HFMD患者便標本進行病毒核酸RT-PCR檢測，探討熒光定量PCR法對手足口病病原學診斷價值，并與臨床診斷相結合進行分析，旨在探索手足病病原體流行特征及其臨床意義[2]，為感染者的發現隔離以及對手足口病的監測及防控提供重要依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標本來源

2011年1月至2012年1月收集我區院就診的手足口病患兒97例，其中重癥12例，男59例，女38例，年齡3個月～6歲，所有病例符合“手足口病預防控制指南（2009版）”的手足口病診斷標準；同時收集同期的皰疹性咽炎患兒50例作對照，男29例，女21例，年齡3個月～5歲6個月。

1.1.2 標本采集

采集 HFMD 患兒發病5d內的咽拭子、肛拭子或皰疹液，于4℃條件下送至研究中心。

1.2 方法

1.2.1 RNA的提取

將經前處理的樣本，用 Roche 公司的病毒RNA純化試劑盒提取標本 RNA，保證均在有效期內進行使用。

1.2.2 統計學分析

應用SPSS 13.0 統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05具有統計學意義。

2 結 果

2.1 手足口病與皰疹性咽炎流行性比較

2011年1月至2012年1月到我區院就診的手足口病患者的97份便標本中，共檢測出腸道病毒核酸陽性89份，陽性檢出率為91.8%，EV71核酸陽性率為66.3%（59/89），CA16核酸陽性率為15.7%（14/89），腸道病毒核酸陽性且CA16和EV71核酸均陰性16份；皰疹性咽炎患兒50例中，陽性率為68.0%（34/50），其中EV71為0例，CA16為0例。手足口病與皰疹性咽炎流行性比較，滿足P＜0.05為差異，具有統計學意義。

2.2 手足口病重癥病例EV71與普通手足口病患兒腸道病毒病原體分析

以手足口病患者的12例重癥病例為研究對象，其中EV71為11例，陽性率為91.7%（11/12），1例為其他腸道病毒。患者年齡3個月～6歲；普通手足口病患兒的97份便標本中，陽性檢出率為91.8%。手足口病重癥病例EV71與普通手足口病患兒相比，滿足P＜0.01，具有顯著差異。見表1。

表1 手足口病重癥病例EV71與普通手足口病病例腸道病毒病原體分析

2.3 手足口病重癥病例EV71與普通手足口病患兒相關因素比較

以EV71陽性的HFMD患者22例為研究對象，其中重癥病例為11例（男7例，女6例），普通病例亦為11例（男6例，女7例），對兩組進行性別、年齡、糞便病毒載量等進行統計分析：發現重癥病例與普通病例在性別上沒有差異；病毒載量差異沒有統計學意義；然而，在年齡上，其中重癥組患兒平均年齡為1.30歲，普通手足口病患兒平均年齡為3.42歲，小于兩歲的占90.9%（10/11），重癥病例與普通病例滿足P＜0.01，具有顯著性差異。重癥病例糞便病毒載量為6.24±1.42，普通病例糞便病毒載量為6.15±1.48。

2.4 HFMD 病原的時間分布情況

全年均有發病，其中5～7個月是我區手足口病的發病高發期，其中6月份發病人數是最多，占全年病例數的56.8%。

3 討 論

手足口病（hand-foot-mouth disease，HFMD）是一種較溫和的以手足皮膚和口腔黏膜皰疹為主要癥狀的小兒急性傳染病[3]。多發于學齡前兒童，尤其以3歲以下年齡組發病率最高。自從1959年由人類腸道病毒（EV）感染導致手足口病報道以來，HFMD已經在全球多次暴發或流行。已知的引起HFMD的病原體多達20余種，均屬于微小核糖核酸病毒科、人腸道病毒屬。其中以CA16和EV71最為常見。

我國于1980年由上海首次報道此病。以后全國各地尤其是南方地區每年都有手足口病的流行。1974年美國學者從腦炎病人的標本中分離出EV71腸道病毒，此后手足口病與EV71病毒感染的關系得到了廣泛的重視。2008年4月，我國安徽阜陽地區發生較大規模的EV71感染暴發疫情，造成22例患者死亡，引起了各級衛生行政和業務部門的高度重視。2008年5月2日，我國衛生部將HFMD列入《中華人民共和國傳染病防治法》規定的丙類傳染病。目前HFMD的病原學檢測技術主要有血清學檢測、病毒培養和分子生物學檢測等三種方法，由于時間緊迫，標本數量較大，病毒培養無法滿足要求，而且現階段也缺乏可靠的血清抗體檢測試劑，因此特異性強、敏感性高的分子生物學方法成為最佳選擇。我們先用熒光定量PCR對本院的HFMD癥狀病例的97份標本進行總腸道病毒的篩選，對其陽性標本再進行EV71和CA16的分型檢測。結果有89份標本呈現總腸道病毒陽性，陽性率91.8%，其中EV71陽性59份，陽性率為66.3%；CA16陽性14份，陽性率為15.7%，其他腸道病毒陽16份，陽性率為18.0%。從性別分布以及病毒載量上來看，差異都并不顯著；從年齡分布來看，腸道病毒陽性病例集中在1～4歲幼童，且2歲以下幼童易出現重癥病例。目前手足口病尚無特效的臨床治療方法，也沒有安全有效的疫苗來預防。因此，采集相關標本、開展實驗室檢測、盡早明確引起手足口病疫情的病原體型別及分布特征十分關鍵。HFMD的普通癥狀不會致死，但重癥HFMD可引起嚴重中樞神經系統并發癥，如腦膜炎、急性遲緩性癱瘓等，甚至導致死亡。因而又對重癥病例的實驗室檢測結果進行了分析。重癥病例主要由EV71引起，重癥病例在2歲以下幼兒的分布更為集中。早發現、早隔離是預防和控制該病傳播的關鍵[4]。而應用分子生物學方法可以對HFMD的病原體進行快速準確的檢測，可以及時有效地發現受感染的接觸者，因此分子生物學方法對于HFMD的防制和監測具有非常重要的作用。HFMD不是一種陌生的疾病，但是不同時期、不同地區發生的HFMD具有不同的流行性特征[5]，臨床特征也存在差異，因此對病原體的研究具有十分重要的意義。

[1]吳旭耀,沈彩燕,李成,等.手足口病患兒EV71的檢測與其臨床分析[J].中華醫院感染學雜志,2010,20(24):3894-3896.

[2]李開春,程志剛,王明麗,等.六安市手足口病腸道病毒核酸檢測及流行病學分析[J].中華疾病控制雜志,2011,16(15):582-585.

[3]陸一涵,姜慶五.人腸道病毒71型與手足口病[J].疾病控制雜志,2008,12(3):183-188.

[4]李彥敏.手足口病流行與防治[J].臨床薈萃,2008,23(16):1144-1145.

[5]王琦,王子軍.2008年中國手足口病流行特征分析[J].疾病監測,2010,25(3):181-184.