兩種肺炎衣原體抗體檢測方法的比較及臨床應(yīng)用分析

李 航 李政國 馬春燕

(河南開封市第一人民醫(yī)院檢驗科，河南 開封 475000）

肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae)是急性呼吸系統(tǒng)感染性疾病 的常見病原體之一，易引起肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病緩慢，臨床癥狀與肺炎支原體相似，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等，一般癥狀較輕。CP不但可以導致呼吸系統(tǒng)疾病，還可引起神經(jīng)系統(tǒng)，循環(huán)系統(tǒng)等肺外其它系統(tǒng)的嚴重并發(fā)癥。因肺炎衣原體病原菌缺乏細胞壁，對臨床上常規(guī)治療肺炎的藥物不敏感，僅對大環(huán)內(nèi)酯類，四環(huán)素，氯霉素，強力霉素等抗菌素治療有效，為指導臨床正確合理應(yīng)用抗菌素，對是否為肺炎衣原體感染的血清進行早期快速診斷顯得尤其重要。我們對2011年10月至2012年3月收治入院的226例疑似CP感染的呼吸道感染患者，同時進行間接熒光法和間ELISA法的檢測，并分析對肺炎衣原體感染早期診斷的臨床應(yīng)用價值。

1 儀器與材料

1.1 一般資料

2011年10月至2012年3月收治入我院呼吸科的疑似CP感染的226例(男132，女94)呼吸道感染患者，男：女=1.4?1；年齡23～94歲。

1.2 儀器安圖生物全自動酶標儀2010型；安圖生物全自動洗板機，德國萊卡熒光顯微鏡。

1.3 試劑歐蒙肺炎衣原體抗體診斷試劑盒(間接熒光法)(德國歐蒙生產(chǎn))；肺炎衣原體(CP)診斷試劑盒(ELISA間接法)深圳博卡生物技術(shù)研究所生產(chǎn))。

1.4 樣本采集患者入院第二天采靜脈血3mL，分離血清于-20℃冰凍保存，用于CP IgM抗體檢測。

2 方法和結(jié)果

2.1 間接免疫熒光試驗(indirect immunofluorescent assay，IIF)采用德國歐蒙間接熒光試劑盒測定CP IgM抗體滴度，結(jié)果判定：IgM≥1∶10為陽性。

2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)按試劑盒說明書測定，S/CO值≥2.1為陽性。結(jié)果見表1。

表1 兩種不同方法檢測血清中CPIgM抗體的比較

χ2=1.841(P＞0.05)經(jīng)過 χ2檢驗，兩種方法差異無顯著性(P＞0.05)

2.3 根據(jù)臨床病情嚴重程度將CP感染分為3級：①輕度：僅存在呼吸道癥狀、體征，肺部X線改變輕微；②中度：以呼吸道癥狀、體征為主，肺部X線改變明顯；③重度：除②臨床表現(xiàn)以外，同時合并有神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)等嚴重肺外并發(fā)癥。收集70例確診CP感染患者血清進行間接免疫熒光試驗，用Spearman等級相關(guān)統(tǒng)計方法，分析血清CPIgM抗體滴度與患者病情嚴重程度之間相關(guān)性，結(jié)果見表2。

表2 70例患者病情嚴重程度與CPIgM抗體滴度的統(tǒng)計

70例CP感染患者中，輕度CP感染38例(54.3%)，中度感染17例(24.3%)，重度感染15例(21.4%)；CP抗體滴度1∶10有24例(34.3%)，滴度1∶32有15例(21.4%)，滴度1∶100有3例(4.3%)，滴度1∶320有9例(12.9%)。滴度1∶1000有19例(27.1%)，經(jīng)SPSS17.0統(tǒng)計分析，血清CP抗體滴度與CP感染患者的病情分級呈正相關(guān)r=0.894，P＜0.05)。

3 討 論

肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae Cp)是一類嚴格真核細胞內(nèi)寄生，具有獨特發(fā)育周期，并能通過細菌濾器的原核細胞型微生物，具高度傳染性。肺炎衣原體屬嚴格的人類病原體，無動物儲存宿主。主要傳播途徑是通過人與人之間的呼吸道飛沫進行傳播，感染后潛伏期平均為30d左右，期間該病原體可以刺激體內(nèi)能產(chǎn)生特異性的體液免疫和細胞免疫，但這種免疫保護性很弱，容易造成呼吸道反復和持續(xù)感染。有研究表明肺炎衣原體在機體內(nèi)持續(xù)感染可長達9年，甚至在應(yīng)用抗生素治療期間仍存在持續(xù)感染[1]。CP感染在普通人群中很常見，是成人和兒童呼吸道感染及非典型性肺炎的重要病原體之一，可以引起的疾病包括肺炎、咽炎、喉炎、支氣管炎，以及百日咳樣疾病與反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎[2，3]等。研究表明，隨著患者年齡增長CP的感染率也會隨之升高，成年人感染率大于50%，老年人可達到75%[4]。CP感染分布呈雙峰型，臨床上小兒患者感染后癥狀，體征較輕，而合并有心腦腎等基礎(chǔ)疾病患者或者老年人感染后病情較重。有研究表明.肺炎衣原體感染還與肺氣腫[5]，慢性阻塞性肺疾病(COPD)[6]以及動脈粥樣硬化相關(guān)[7，8]。

近年來，肺炎衣原體感染的發(fā)病率逐漸增高，其感染初期癥狀不典型，臨床上常規(guī)用藥治療效果欠佳，因此，早期快速診斷對于臨床選擇恰當?shù)闹委煼桨甘种匾Ｄ壳皩Ψ窝滓略w的檢測方法主要有兩種，一種是病原學檢查：直接涂片，鏡下觀察包涵體，或以熒光或酶標記的種特異性單克隆抗體直接檢測標本中肺炎衣原體抗原；另外就是血清學方法，主要包括ELISA法和微量免疫熒光試驗（microimmunofluorescence test，MIF），其中被MIF公認為“金標準”。通過我們的試驗研究和分析表明，間接ELISA法適用于檢測CP感染患者血清中特異性抗體的變化，其敏感度好，特異性強，方法成熟，操作簡便，價格低廉與間接熒光免疫法檢測結(jié)果比較，陽性率無顯著差異(P＞0.05)，適合臨床大批量篩查，以及流行病學調(diào)查。間接熒光法能準確測定出CP感染患者血清中抗體滴度的高低，有助于指導臨床醫(yī)師判斷患者的病情發(fā)展程度，為臨床制定有效的診療方案提供科學依據(jù)。

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