LC-MS/MS檢測血漿中黃連吳茱萸藥對生物堿的研究*

★ 孫冬梅 羅文匯 李素梅 畢曉黎 李養(yǎng)學 (廣東省中醫(yī)研究所 廣州510095)

藥對是中藥配伍應(yīng)用的基本形式，雖組成簡單，卻有著嚴謹?shù)呐湮橐?guī)律和特定的藥理作用。開展中藥藥對配伍的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機理研究對探討中藥配伍規(guī)律具有重要意義，同時也為更有效地指導臨床用藥和中藥新藥研制提供科學依據(jù)。黃連與吳茱萸配伍是中醫(yī)寒熱配伍藥對的代表之一，亦是現(xiàn)代臨床的常用藥對之一，有著良好的臨床療效和使用范圍。具有瀉火、疏肝、和胃、止痛等功效，屢經(jīng)歷代臨床應(yīng)用至今不衰［1－2］。本文建立了同時測定血漿中黃連-吳茱萸藥對中四種生物堿濃度的高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS)方法，并進行了方法學考察。結(jié)果表明，該方法靈敏度高，準確性好，樣品處理簡單，適合于黃連-吳茱萸藥對中生物堿的血藥濃度監(jiān)測及藥代動力學研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Accela高效液相色譜儀、TSQ Quantum Access Max三重四極桿質(zhì)譜檢測器(美國Thermo Fisher Scientific公司);TDL-5-L臺式離心機(上海安亭);HSC-12A氮吹儀(天津Hengao);XW-80A旋渦混合器(上海青浦滬西);Advantage A10超純水處理系統(tǒng)(美國Millipore公司)。

1.2 試藥

鹽酸小檗堿對照品(批號:110713-200609)、鹽酸藥根堿(批號:110733-200806)、鹽酸巴馬汀(批號:110732-200506)、吳茱萸堿(批號:110802-200606)購于中國藥品生物制品檢定所;甲醇、冰乙酸(MERCK色譜純);高純氮氣(純度＞99.999%);高純氬氣(純度＞99.999%));水為超純水。

2 測定方法

2.1 對照品儲備液的配制

用40%甲醇溶液配制含鹽酸小檗堿(397.72 μg/ml)、鹽酸巴馬汀(396.94 μg/ml)、鹽酸藥根堿(399.36 μg/ml)和吳茱萸堿(395.28 μg/ml)的生物堿對照儲備液，置4℃冰箱中保存，使用時用40%甲醇水溶液稀釋至所需濃度。……