用uv測(cè)定倍生顆粒中人參皂苷Re的含量

孫 麗，許 彥

（南通市中醫(yī)院，江蘇 南通 226001）

倍生顆粒為我院復(fù)方制劑，由人參、炙黃芪、丹參等八味藥組成，其功效為益氣養(yǎng)陰、補(bǔ)腎通瘀、振元抗衰。為使其得到更廣泛的應(yīng)用，我們對(duì)其進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，利用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定主要成分人參皂苷Re的含量，為全面控制本品的質(zhì)量提供了科學(xué)依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

7504紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海分析儀器廠）。

1.2 試劑

人參皂苷Re對(duì)照品（批號(hào)0754-9809）購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，人參對(duì)照藥材經(jīng)市藥檢所鑒定，倍生顆粒（自制，批號(hào)070326），其他試劑均為分析醇，水為蒸餾水。

2 含量測(cè)定［1］

2.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取對(duì)照品人參皂苷Re 2.0mg，置于2mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，即得對(duì)照品溶液（稱定步驟：取2mL量瓶精密稱定，其重量為14.6606g，取人參單體皂苷對(duì)照品人參皂苷Re使稱定的總重量為14.6627g）。

2.2 供試品溶液的制備

取倍生顆粒72g，用甲醇回流提取5次（每次50mL，加熱3h），合并甲醇提取液，常壓蒸餾。蒸干后用30mL水將殘?jiān)芙猓儆盟柡驼〈?0mL萃取。重復(fù)操作6次，合并正丁醇萃取液，并用30mL蒸餾水洗滌。經(jīng)蒸餾后將其殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移到25mL量瓶中，再用甲醇稀釋至刻度，即得供試品溶液。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

量取對(duì)照品溶液 Re60、60、90、120、150、180、210μL分別放入試管中，再加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒溫水浴加熱15min。然后水浴冷卻10min，室溫下再放置10min。隨行空白。用UV-7504紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)于599nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，結(jié)果見(jiàn)表1。并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見(jiàn)圖1。其線性方程為y＝0.0158x+0.0627，相關(guān)系數(shù)R＝0.9979。

表1 人參皂苷Re含量與吸收度的關(guān)系

2.4 精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液180μL放入試管中，再加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒溫水浴加熱15min，然后水浴冷卻10min，室溫下再放置10min，測(cè)定吸光度，重復(fù)測(cè)6次，結(jié)果RSD為0.28%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液180μL放入試管中，再加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒溫水浴加熱15min。然后水浴冷卻10min，室溫下再放置10min，每隔30min測(cè)定吸光度，RSD為0.497%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

用微量進(jìn)樣器量取已知含量的樣品溶液6份，分別加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒溫水浴加熱15min，然后水浴冷卻10min，室溫下再放置10min，測(cè)定吸光度。RSD＝0.825%。

2.7 回收率試驗(yàn)

用微量進(jìn)樣器量取已知含量的樣品溶液6份，分別精密加入一定量的對(duì)照品溶液，再分別加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5mL，置于60℃恒溫水浴加熱15min，然后水浴冷卻10min，室溫下再放置10min，測(cè)定含量，分別計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.8 樣品測(cè)定

用微量進(jìn)樣器分別取供試品溶液10μL，加入5%（W／V）香草醛冰醋酸溶液0.5mL和70%（V／V）硫酸水溶液5.00mL，置于60℃恒溫水浴加熱15min。然后水浴冷卻10min，室溫下再放置10min。隨行空白。用UV-7504紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)于599nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算出樣品中人參皂苷Re的含量。測(cè)得吸光度為0.342，計(jì)算得樣品中人參皂苷Re含量為17.677μg，則1g樣品中含人參皂苷Re 0.368mg。

3 小結(jié)與討論

根據(jù)“君臣佐使”的方劑學(xué)術(shù)語(yǔ)，在該制劑中，人參為“君”，其中以人參皂苷為其主要有效成分，故最終選擇對(duì)人參皂苷進(jìn)行測(cè)定。用人參皂苷Re對(duì)照品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，其線性方程為y＝0.0158x+0.0627，r＝0.9979，該單體穩(wěn)定性好，平均回收率99.63%，RSD為1.05%，可作為倍生顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。該制劑為醫(yī)院制劑，利用紫外分光光度法作為醫(yī)院制劑的含量測(cè)定是一種有效快捷的測(cè)定方法，故我們選用該方法來(lái)完善倍生顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

［1］陳發(fā)奎.常用中草藥有效含量測(cè)定［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：13.