茄子果實中黃酮提取工藝優化及不同茄子品種黃酮含量比較

周寶利，李興寶，李騰飛，趙 瑩，宋 研，尚 淼

(沈陽農業大學園藝學院，遼寧 沈陽 110866)

茄子果實中黃酮提取工藝優化及不同茄子品種黃酮含量比較

周寶利，李興寶，李騰飛，趙 瑩，宋 研，尚 淼

(沈陽農業大學園藝學院，遼寧 沈陽 110866)

研究茄子果實中黃酮提取的最佳工藝，比較不同品種茄子果實的黃酮含量。通過單因素試驗考察乙醇溶液體積分數、提取溫度、提取時間、料液比4因素對黃酮提取率的影響。在單因素試驗基礎上設計正交試驗，確定最佳提取工藝。通過對不同品種茄子黃酮含量的測定比較，確定黃酮含量相對高的品種和采收時期。結果表明：茄子黃酮的最佳提取工藝條件為乙醇溶液體積分數80%、溫度40℃、提取時間80min、料液比1∶20(g/mL)，提取率為2.2%，工藝穩定；在此條件下，檢測遼寧地區主栽的8個茄子品種黃酮含量，在坐果之后14d黃酮含量最高，其中，綠茄品種中遼茄5號的黃酮含量最高為56.3mg/g；紫茄品種中，立原紫茄黃酮含量最高為25.7mg/g?？梢姡谇炎又虚_發利用黃酮具有一定的可行性。

茄子；黃酮；提取工藝；品種；含量

茄子學名為Solanum melongenaL．，別名落蘇、酪酥、昆侖瓜等，為茄科茄屬以漿果為產品的一年生草本植物。茄子味道鮮美，營養豐富，不僅是我國廣大城鄉人民喜愛的主要蔬菜之一，也是一味中藥[1]，而且茄子皮中富含VE和VP，這是其他蔬菜所沒有的[2]。茄子種植廣泛，價格低廉，取材容易，而且果實中含有豐富的黃酮類化合物，因此從茄子中提取黃酮具有一定的開發價值。

黃酮類化合物又稱生物類黃酮，是植物經光合作用產生的一大類化合物[3]。蘆丁，是茄子中主要的黃酮類物質，其性狀為黃色結晶粉末或無晶形粉末，味微苦，熔點177～178℃，略溶于水，能溶于熱水及乙醇[4]。該類化合物在醫學界已得到證明，有不可多得的治病防病作用[5-7]。研究表明，蘆丁具有消炎抑菌[8]、降低血液膽固醇，增強血管彈性，改善血液循環[9]，降低毛細血管通透性和脆性，促進細胞增生和防止血細胞凝聚[10]，目前已經被作為抗菌劑和降壓藥[11]，臨床用于防治腦出血、高血壓、視網膜出血、紫癜和急性出血性腎炎，因此被廣泛用于醫藥保健領域[12]。在食品方面，蘆丁具有抗氧化性[13]，是一種天然抗氧化劑并具有良好的抗自由基性能，可以抑制人體內的不飽和脂肪酸的過氧化作用[14]。據報道，蘆丁有紫外吸收功能，具有抗曬作用，防曬強度高[15]。因此，蘆丁被廣泛應用于醫藥、食品和化妝品中，具有很高的開發價值和商業價值。

本實驗采用超聲波輔助提取法提取茄子果實中的黃酮，通過單因素和正交試驗確定最佳工藝條件，同時對不同品種、不同色澤、不同時期的茄子果實中黃酮含量進行測定，確定黃酮含量高的茄子品種和采收時期，以期為茄子中黃酮的提取、栽培品種選擇及采收加工提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

茄子果實黃酮提取工藝優化試驗所用綠茄為市購；茄子果實黃酮含量測定比較試驗所用材料種子由沈陽農業大學園藝學院提供，共8個品種，綠茄品種為遼茄5號、西安綠茄、韓育綠茄和綠寶石；紫茄品種為遼茄3號、黑又亮、遼茄6號和立原紫茄。供試材料種子于2010年3月22日播種，2010年5月12日定植于科學研究基地溫室內，按常規方式進行栽培管理。

無水乙醇、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁(均為AR)；蘆丁標樣(≥98%) 遼寧省食品藥品檢驗所。

1.2 儀器與設備

UV-1800紫外分光光度計、EB-330H分析天平日本島津公司；KQ-250B型超聲波清洗器微波振蕩器昆山市超聲儀器廠；RE-52A型旋轉蒸發器 上海亞榮生化儀器廠；SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵 鄭州長城科工貿有限公司；PHS-3C型數字pH計 上海偉業儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 檢測波長的選擇

取蘆丁標品溶液適量，在0.5mL 5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在400～700nm波長范圍測定螯合物的吸光度，螯合物于508nm波長處有最大吸收，故測定時選用此波長。

1.3.2 標準曲線的繪制

分別精密吸取蘆丁對照液(0.10mg/mL)0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL于10.00mL容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.50mL，搖勻，靜置5min；再加10%硝酸鋁溶液0.50mL，搖勻，靜置5min；再加4%氫氧化鈉溶液5.00mL，用70%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，靜置15min，以試劑作空白，于波長508nm處測吸光度，繪制標準曲線。得吸光度(A)對質量濃度(C)的線性回歸方程為：A＝13.066C－0.0181，R2＝0.9998，在5mg/L和40mg/L范圍內呈良好的線性關系。

1.3.3 茄子果實中黃酮提取工藝優化試驗

取茄子樣品，洗凈切片，55℃烘干，粉碎。準確稱取茄子粉末10.0g，利用超聲波輔助法提取[16]，加入不同體積分數的乙醇溶液，選擇不同的提取溫度，不同的提取時間，加入相應比例的提取溶劑，放入超聲波儀中進行提取、抽濾，所得濾液經旋轉蒸發儀濃縮，濃縮至10～20mL，用75%乙醇溶液定容至100mL，利用1.3.2節方法測定蘆丁含量，重復3次，取平均值并計算提取率。

分別以乙醇溶液體積分數、提取溫度、料液比、提取時間為單因素進行試驗，在單因素試驗基礎上，進行正交試驗。

1.3.4 茄子果實黃酮含量的測定試驗

茄子坐果后開始，每隔7d取一次樣，共取5次。再根據正交試驗所得到的最佳提取工藝，進行黃酮含量的測定。

2 結果與分析

2.1 不同提取條件對茄子黃酮提取率影響單因素試驗

2.1.1 乙醇溶液體積分數的影響

圖1 乙醇溶液體積分數對黃酮提取率的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on extraction rate of flavonoids

選擇乙醇溶液體積分數50%、60%、70%、80%、90%進行提取乙醇溶液體積分數的單因素試驗，其結果如圖1所示。乙醇溶液體積分數在50%～80%時，黃酮提取率隨乙醇溶液體積分數的提高而增加，在乙醇溶液體積分數大于80%時，黃酮提取率下降，在乙醇溶液體積分數為80%時，達到最高為1.94%，并且達到顯著水平。

2.1.2 提取溫度的影響

選擇溫度20、40、60、80、100℃進行提取溫度的單因素試驗，結果如圖2所示。當溫度在20～40℃時，黃酮提取率隨溫度的升高而提高，當溫度高于40℃時，黃酮提取率隨溫度的升高而下降，當溫度在40℃時，黃酮提取率最大為2.18%。

圖2 提取溫度對黃酮提取率的影響Fig.2 Effect of extraction temperature on extraction rate of flavonoids

2.1.3 料液比的影響

選擇料液比 1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30(g/mL)進行料液比的單因素試驗。由圖3可知，黃酮提取率隨溶劑比例的加大而提高，當料液比小于1∶20時，差異顯著，而當料液比大于1∶20mL/g時，差異不顯著，在料液比1∶30g/mL時，黃酮提取率最高為2.17%。

圖3 不同料液比對黃酮提取率的影響曲線Fig.3 Effect of material-liquid ratio on extraction rate of flavonoids

2.1.4 提取時間對黃酮提取率的影響

選擇提取時間20、40、60、80、100min進行提取時間的單因素試驗，結果如圖4所示。黃酮提取率隨提取時間的延長而增加，當提取時間小于60min時，提取率隨提取時間的延長而提高顯著，當提取時間大于60min時，黃酮提取率隨提取時間延長變化不顯著，提取時間為100min時，黃酮提取率為2.18%。

圖4 提取時間對黃酮提取率的影響Fig.4 Effect of extraction time on extraction rate of flavonoids

2.2 茄子果實黃酮提取工藝的正交試驗優化結果

在單因素試驗基礎上，選擇乙醇溶液體積分數、提取溫度、料液比、提取時間進行L9(34)正交試驗，重復3次。以黃酮提取率為考察指標，研究各因素對提取率的影響。正交試驗因素水平見表1，試驗設計及結果見表2。

表1 茄子果實黃酮提取工藝正交試驗因素水平表Table 1 Factors and levels of orthogonal tests for optimizing extraction process of flavonoids from eggplants

由表2可得，影響茄子中黃酮提取率的因素主次順序為：乙醇溶液體積分數對茄子中黃酮提取率影響最大，提取溫度和料液比的影響次之，提取時間影響最小。即各因素對超聲波提取茄子中黃酮提取率的主次順序一次為A＞B＞C＞D。超聲波提取茄子中黃酮的最佳組合為A2B2C3D3，即提取乙醇溶液的體積分數80%、提取溫度40℃、提取時間80min、料液比1∶20。對最佳提取工藝條件A2B2C3D3進行驗證實驗，結果黃酮提取率為2.2%，表明這種工藝條件比較合理。

表2 茄子果實黃酮提取工藝正交試驗設計及結果Table 2 Design and results of orthogonal tests for optimizing extraction process of flavonoids from eggplants

2.3 不同茄子品種黃酮含量比較

2.3.1 不同綠茄品種黃酮含量比較

圖5 黃酮含量隨生長時間關系圖Fig.5 Change of flavonoid content in eggplants during the various growth stages

從圖5可知，在綠茄品種中，遼茄5號、西安綠茄、韓育綠茄和綠寶石，都是在茄子坐果以后，7～14d黃酮含量隨時間增加，在14d時含量最高；14～21d黃酮含量顯著下降；21～35d黃酮含量變化不顯著，基本維持在一定水平。從圖5可看出，在坐果之后7～14d，遼茄5號的黃酮含量最高為56.3mg/g，西安綠茄次之，韓育綠茄再次，綠寶石最低；在21～35d，4個品種黃酮含量都處于較低水平，差異不顯著。

2.3.2 不同紫茄品種黃酮含量比較

圖6 黃酮含量隨生長時間關系圖Fig.6 Curve of growth time effect on content of flavonoids

從圖6可以看出，在紫茄品種中，遼茄3號、黑又亮、遼茄6號和立原紫茄，在茄子坐果以后，7～14d黃酮含量隨時間增加，在14d時含量最高；14～21d黃酮含量顯著下降；21～35d黃酮含量變化不顯著，基本維持在一定水平。坐果之后14d，立原紫茄黃酮含量最高為25.7mg/g，遼茄6號次之，遼茄3號再次，黑又亮最低。14～21d，立原紫茄黃酮含量要顯著高于另外3個品種；遼茄3號、黑又亮、和遼茄6號黃酮含量相對較低，三者間差異不顯著。

3 結 論

超聲波法提取茄子黃酮的最佳提取條件：乙醇溶液體積分數80%、溫度40℃、料液比1∶20(g/mL)、提取時間80min，在此條件下，黃酮的提取率達到2.2%，提取工藝穩定。

綠茄品種坐果之后7～14d，黃酮含量隨生長時間的延長而增加；在21～35d，黃酮含量隨生長時間的延長而逐漸降低。紫茄品種坐果之后7～14d內，黃酮含量要高于21～35d內的黃酮含量。遼茄5號適宜在遼寧地區種植。坐果之后14d，黃酮含量達到最高，此時為最佳采收時期。

總之，茄子黃酮的提取工藝相對簡單穩定，具有一定的可行性，而且茄子在我國種植廣泛，原料來源容易，價格低廉，茄子中黃酮含量相對較高且，因此開發利用黃酮茄子黃酮具有廣闊的前景。

[1] 張宇. 珍蔬∶ 茄子[J]. 上海蔬菜, 2003(2)∶ 43-44.

[2] 周寶利, 張琦, 陳志霞, 等. 不同品種茄子果皮花青素含量及其穩定性研究[J]. 食品科學, 2011, 32(1)∶ 99-103.

[3] 郭剛軍, 何美瑩, 鄒建云, 等. 苦蕎黃酮的提取分離及抗氧化活性研究[J]. 食品科學, 2008, 29(12)∶ 373-376.

[4] 張朝燕, 吳純潔, 謝紹繃, 等. 蘆丁提取工藝的研究[J]. 基層中藥雜志, 2002, 4(16)∶ 29-30.

[5] EVERCHON E R. Supercritical fluid extraction and fraction of essential oils and related products[J]. Supercritical Fluids, 1997(10)∶ 1-37.

[6] CHATZOPOULOU P S, KATSIOTIS S T. Procedures influencing the yield and the quality of the essential oil fromJuniperuscom-munisL.berries[J]. Pharmaceutica Acta Helvetiac,1995, 70(3)∶ 247-253.

[7] REVERCHON E, DELLA P G. Supercritical CO2extraction and fractionation of lavender essential oil and waxes[J]. J Agric Food Chem,1995, 43(6)∶ 1654-1658.

[8] VARBAN M, SAVOV A S, GALABOV L P, et al. Effects of rutin and quercetin on monooxygenase activities in experimental influenza virus infection[J]. Experimental and Toxicologic Pathology, 2006, 58(l)∶ 59-64.

[9] 韓玉珠, 栗長蘭. 17個茄子品種(系)蘆丁含量及雜種優勢研究[J]. 吉林農業大學學報, 2002, 24(6)∶ 39-41.

[10] ODETTI P R, BORGOGLIO A, De PASCALE A, et al. Prevention of diabetes of increased aging effect on rat collagen-linked fluorescence by aminoguanidne and rudin[J]. Diabetes, 1990, 39(7)∶ 796-801.

[11] YANG Yi, ZHANG Fan. Ultrasound-assisted extraction of rutin and quercetin fromEuonymus alatus(Thunb.) Sieb[J]. Ultrason Sonochem,2008, 15(4)∶ 308-313.

[12] 張中朋, 劉張林. 蘆丁出口現狀及前景分析[J]. 中國現代中藥, 2008,10(1)∶ 37-38.

[13] YANG Jianxiong, GUO Juan, YUAN Jiangfeng.In vitroantioxidant properties of rutin[J]. LWT-Food Science and Technology, 2008, 41(6)∶1060-1066.

[14] 郭亞力, 李聰, 歐靈澄, 等. 槐米中天然抗氧化劑的提取及其抗自由基性能研究[J]. 食品科學, 2004, 25(7)∶ 54-57.

[15] 牛小花, 陳洪源, 曹曉鋼, 等. 蘆丁的研究新進展[J]. 天然產物研究與開發, 2008, 20(5)∶ 156-159.

[16] 馬國剛, 王建中. 響應面分析法優化槐米蘆丁超聲波提取工藝的研究[J]. 分離與提取, 2007, 33(8)∶ 167-170.

Optimization of Extraction Process for Flavonoids from Eggplants and Content Comparison of Flavonoids in Different Eggplant Cultivars

ZHOU Bao-li，LI Xing-bao，LI Teng-fei，ZHAO Ying，SONG Yan，SHANG Miao
(College of Horticulture, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China)

In this study, the optimal extraction process for flavonoids from eggplants was explored and the contents of flavonoids in eggplants from different cultivars were compared. Single-factor tests were adopted to investigate the effects of ethanol concentration, extraction temperature, extraction time and material-liquid ratio on the extraction rate of flavonoids. Based on the single-factor tests, orthogonal tests were used to explore the optimal extraction process. The results showed that the best extraction conditions for flavonoids from eggplants were ethanol concentration of 80%, extraction temperature of 40 ℃, extraction time of 80 min and material-liquid ratio of 1∶20. Under the optimal extraction conditions, the extraction rate of flavonoids was up to 2.2%. The contents of flavonoids in 8 eggplant cultivars cultivated in Liaoning province were determined. Flavonoids revealed the highest content after fruit setting for 14 days. As for green eggplant cultivars, the highest flavonoid content was determined in LiaoQie 5 with the content of 56.3 mg/g. Similarly, as for purple eggplant cultivars, the highest flavonoid content was determined in LiYuan purple eggplants with the content of 25.7 mg/g. Therefore, the development and utilization of flavonoids in eggplants were feasible.

eggplant；flavonoids；extraction technology；cultivars；content

TS202.3

A

1002-6630(2012)10-0103-04

2011-05-25

沈陽市科技計劃項目(F10-226-4-00)

周寶利(1956—)，男，教授，博士，主要從事蔬菜栽培與生理生態研究。E-mail：zblaaa@163.com