玫瑰糠疹患者急性期血清中白介素-4、12和干擾素-γ的表達

陳慧君，董萍云，陳治國

玫瑰糠疹（pityriasis rosea，PR）是一種具有特征性皮損的急性炎癥性自限性皮膚病。自1860年命名至今[1]，其病因仍不十分清楚。150年來人們一直認為玫瑰糠疹的發病與感染相關[2]，但關于感染（尤其是病毒感染）的研究最終均未得到確鑿的證據。近期研究表明玫瑰糠疹患者體內存在細胞免疫和（或）體液免疫的失衡，細胞免疫反應參與本病的發生。Setsuya等[3]研究發現玫瑰糠疹患者皮膚內浸潤的細胞主要為輔助/誘導T淋巴細胞，表皮、真皮乳頭內朗格漢細胞明顯增多，角質形成細胞內出現HLA-DR抗原的表達。胡玉賢等[4]研究發現VCAM-1在玫瑰糠疹患者皮損及皮損周圍毛細血管中高表達，這可能與上調血管內皮細胞的細胞因子相關。我們采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測玫瑰糠疹患者急性期血清中白介素（IL）-4、IL-12、干擾素（IFN）-γ水平，并和正常者進行對照，現報告如下。

1 對象和方法

1.1 研究對象

實驗組30例玫瑰糠疹患者均來自我院皮膚科2010年3月1日～12月31日門診就診者；對照組30名健康志愿者均為我院職工和臨床實習學生。所有入組人員資料的獲取均對本人無不良影響，且經過本人和（或）家屬同意，并簽署知情同意書。根據玫瑰糠疹的診斷標準[5]選擇患病時間≤1周(時間以患者主訴為準)，年齡及性別不限，未經過任何藥物治療的患者為受試對象。30例玫瑰糠疹患者中男13例（43.3%）、女17例（56.7%），年齡18～54歲。30名健康者中男14例（46.7%）、女16例（53.3%），年齡18～53歲。兩組性別構成、年齡差異均無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 標本采集

采集實驗組及對照組受試者靜脈血3 ml放入抗凝管（含1%EDTA和抑肽酶500 kU/ml）中，放置30 min后，3000 r/min離心10 min，-20℃保存。

1.3 實驗方法

IL-4、 IL-12 和IFN-γ的檢測應用雙抗體夾心ELISA方法，試劑盒購自欣博盛生物科技有限公司。結果測定使用芬蘭雷勃公司MK3酶標儀，測定450 nm處A值，以標準A值繪制標準曲線。所有數據測定均由同一操作者使用相同設備完成。所有操作均嚴格按照試劑盒的使用說明書進行。

1.4 統計學方法

2 結果

玫瑰糠疹患者血清中IL-4水平低于正常對照組，IL-12及IFN-γ水平高于正常對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1 實驗組與正常對照組血清IL-4、IL-12、IFN-γ水平比較 ( ±s，pg/ml)

表1 實驗組與正常對照組血清IL-4、IL-12、IFN-γ水平比較 ( ±s，pg/ml)

組別 例數 IL-4 IL-12 IFN-γ實驗組 30 5.57±4.809.14±4.751.38±0.87正常對照組 30 9.65±7.445.34±3.910.89±0.68 t值 2.52 3.39 2.24 P值 0.01 0.001 0.03

3 討論

有關玫瑰糠疹的細胞免疫學發病機制的研究方法目前主要有組織病理、透射電鏡、免疫組化及細胞因子等[6]。一些學者研究發現玫瑰糠疹患者皮損中CD4+/CD8+比值升高，皮損內浸潤的主要為CD4+T細胞，血清中IFN-γ水平升高，表明細胞免疫在玫瑰糠疹的發病中起主要作用。而劉亞玲等[7]測定玫瑰糠疹患者在不同時期血清中IL-2、IL-10、IFN-γ水平并與正常人對照比較發現，玫瑰糠疹患者患病不同時期存在細胞因子分泌異常。病程≤4周時IL-2、IL-10水平降低，病程＞4周時IL-2水平更低，IL-10水平趨于恢復，認為玫瑰糠疹患者細胞免疫和體液免疫均受到抑制。T淋巴細胞根據其免疫表型與功能的不同分為CD4+輔助性T細胞（Th）與CD8+細胞毒性T細胞（Tc）。Th細胞又分為Th1細胞和 Th2細胞。Th1細胞產生IL-2、IL-12、IFN-γ等Th1類細胞因子，與細胞免疫有關；Th2細胞產生IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-13等Th2類細胞因子，與體液免疫有關。IFN-γ和IL-4這兩種細胞因子作為Th1和Th2細胞的代表性細胞因子，免疫學上常常通過檢測IFN-γ和IL-4來了解Th1和Th2細胞的功能狀態。而IL-12獨特的且重要的生物學活性是能調節Th1和 Th2細胞間的平衡，可誘導Th1細胞分泌IL-2和IFN-γ，使Th0向 Th1方向發展[8]。本研究通過檢測玫瑰糠疹患者急性期和正常者血清中IL-4、IL-12和IFN-γ的水平，其結果顯示玫瑰糠疹患者急性期血清中IL-4降低，而IL-12和IFN-γ升高，這說明玫瑰糠疹患者體內存在Th1細胞和Th2細胞免疫應答水平的失衡，同時說明IL-4、 IL-12、IFN-γ參與了玫瑰糠疹的發病。

IL-12表達于活化的T淋巴細胞表面，促進Th0細胞分化為 Th1細胞，并促進IFN-γ、腫瘤壞死因子（TNF）-α和 IL-2的合成，而抑制Th2細胞合成IL-4、IL-10等[8]。因此IL-4分泌受到抑制，IL-12分泌增加并促使IFN-γ合成增加，結果使Th1亞群的細胞因子高表達，而調節Th2亞群的細胞因子則低表達，從而導致細胞免疫和體液免疫的失衡，導致玫瑰糠疹發生和發展。

[1]Chuh A, Lee A, Zawar V, et al. pityriasis rosea-Anupdata [J].Indian Dermatol Venereol Leprol, 2005, 71(5):311-315.

[2]Drago F, Broccolo F, Rebora A. Pityriasis rosea: an update with a critical appraisal of its possible herpesviral etiology [J]. J Am Acad Dermatol, 2009, 61(2):303-318.

[3]Setsuya A, Hachiro T. Immununistogic studies reaction in the lesional epidermis [J]. Arch Dermatol,1985,121:761-765.

[4]胡玉賢, 王愛學, 李玉平, 等. 玫瑰糠疹皮損血管細胞黏附分子-1的檢測 [J].中國皮膚性病學雜志, 2007, 21(7):395-396.

[5]趙辨. 臨床皮膚病學 [M]. 3版. 南京: 江蘇科學技術出版社,2001:775.

[6]廖家, 吳昌輝. 玫瑰糠疹免疫病因學研究新進展 [J]. 嶺南皮膚性病科雜志, 2008, 15(1):52-54.

[7]劉亞玲, 四榮聯, 李玉平. 玫瑰糠疹患者血清中IL-2、IL-10和IFN-γ水平的研究 [J]. 河北醫科大學學報, 2009,9(30):923-925.

[8]龔非力. 醫學免疫學 [M]. 2版. 北京: 科學出版社, 2004:73-74.