痛風寧防治急性痛風性關節炎的實驗研究*

姜德友，張曉鑫，解 穎，韓潔茹，李 斗，陳 飛，常佳怡，李富震

（黑龍江中醫藥大學，哈爾濱 150040）

痛風寧防治急性痛風性關節炎的實驗研究*

姜德友，張曉鑫，解 穎，韓潔茹，李 斗，陳 飛，常佳怡，李富震

（黑龍江中醫藥大學，哈爾濱 150040）

[目的]探討痛風寧防治大鼠急性痛風性關節炎的作用機制。[方法]將70只大鼠隨機分為7組，分別為空白組、模型組、中藥對照組、西藥對照組、痛風寧高、中、低劑量組，每組10只，采用尿酸鈉和氧嗪酸鉀誘導大鼠急性痛風性關節炎模型，測定大鼠關節腫脹度和大鼠血清尿酸水平。[結果]痛風寧具有抑制大鼠足腫脹的作用，并能降低大鼠血清尿酸水平。[結論]痛風寧對大鼠急性痛風性關節炎有一定的防治作用，其中痛風寧高、中劑量組作用明顯。

急性痛風性關節炎；痛風寧；尿酸；實驗研究

痛風是由于嘌呤代謝紊亂，導致血尿酸水平增高和尿酸排泄減少而導致尿酸鹽在組織沉積的疾病[1]。隨著生活水平的提高，痛風的患病率不斷增加，急性痛風性關節炎是痛風最常見的表現形式，目前治療急性痛風發作的藥物主要有非甾體消炎藥、秋水仙堿、糖皮質激素等，但其不良反應多[2]，因此中藥防治急性痛風性關節炎日益引起關注。姜德友教授總結諸位醫家及結合自身多年臨床成功經驗，認為腎虛是本病發生的始動因素，提出從腎論治急性痛風性關節炎的學術觀點，自擬經驗方痛風寧。本研究就痛風寧防治急性痛風性關節炎的作用進行實驗，為該藥的臨床應用提供依據，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 雄性Wistar大鼠70只，10周齡，體質量（180±20）g，由黑龍江中醫藥大學實驗動物研究中心提供。

1.1.2 實驗藥物與試劑 痛風寧是姜德友教授經驗方（熟地黃、澤瀉、山茱萸、懷牛膝、萆薢等），由黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院制劑科提供，經精加工成含生藥0.9g/mL的溶液。痛風舒片由湖北綠金子藥業有限責任公司提供，批號110601；秋水仙堿片由西雙版納藥業有限責任公司提供，批號20091007；氧嗪酸鉀鹽由美國Sigma公司生產提供，批號CAS2207-75-2；尿酸鈉結晶由美國Sigma公司生產提供，批號CAS1198-77-2；尿酸測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，批號20101108；吐溫80由天津市富寧精細化工有限公司生產提供，批號101020。

1.1.3 實驗儀器 UV754紫外分光光度計由上海精密科學儀器有限公司提供；FA1104型電子天平由意大利梅特勒公司提供；恒溫水浴箱由上海精宏實驗設備有限公司提供；高速臺式離心機由科大創新股份有限公司提供。

1.2 實驗方法

1.2.1 溶液的制備 痛風寧溶液的制備（煎液過濾濃縮成高、中、低各劑量組間比4∶2∶1，既實際含生藥量900、450、225mg/kg）；痛風舒片溶液的制備（將10g痛風舒片溶解于40mL生理鹽水中，配置成痛風舒片溶液)；秋水仙堿溶液的制備（將5mg秋水仙堿溶解于50mL生理鹽水中，配置成秋水仙堿溶液）；氧嗪酸鉀溶液的制備（將3g氧嗪酸鉀晶體溶解于97mL生理鹽水，加熱攪拌，配置成3%氧嗪酸鉀溶液）；尿酸鈉溶液的制備（將1000mg尿酸鈉結晶加9mL生理鹽水，再加1mL吐溫80，加熱攪拌，配置成10mL尿酸鈉溶液）。

1.2.2 動物分組 將雄性大鼠70只喂養1周后按隨機數字表法隨機分為7組：空白組、模型組、中藥對照組、西藥對照組、痛風寧高、中、低劑量組，每組各10只。均以60 kg人為標準，按照人鼠體表面積-劑量換算法計算大鼠給藥劑量，以每100g大鼠體質量灌胃1mL為標準。空白組和模型組分別灌胃生理鹽水，中藥對照組、西藥對照組、痛風寧高劑量組（900mg/kg）、痛風寧中劑量組（450mg/kg）、痛風寧低劑量組（225mg/kg）分別給予痛風舒片溶液、秋水仙堿溶液、痛風寧溶液灌胃，每日1次，連續7d，末次給藥后造模。

1.2.3 造模方法[3]除空白組外均采用以下方法造模：用3%氧嗪酸鉀溶液進行腹腔內注射，30mL/kg，15min后用6號注射針在大鼠右側踝關節后側插入至跟腱內側，把0.2mL尿酸鈉溶液注入到關節腔內。空白組只采用6號注射針在大鼠右側踝關節后側插入至跟腱內側，把0.2mL生理鹽水注入到關節腔內。

1.2.4 標本采集方法 各組大鼠于造模前及造模后1、2、4、8、24h測定右踝關節容積，以造模后關節容積-造模前關節容積的差值作為關節腫脹度。各組大鼠24h后處死，心臟取血，4000 r/min，離心15min，取上清液，待測。

1.2.5 統計學分析 采用SPSS18.0軟件包進行處理，計量資料采用均數±標準差（±s）表示，正態分布計量資料組間比較采用單因素方差分析，偏態分布計量資料組間比較采用秩和檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對尿酸鈉所致大鼠痛風性關節炎血尿酸水平影響 與空白組比較，模型組大鼠血尿酸值明顯升高，說明造模成功。與模型組比較，中藥對照組大鼠血尿酸差異無統計學意義（P>0.05），而西藥對照組大鼠血尿酸值均明顯偏低（P<0.01），痛風寧高、中、低劑量組大鼠血尿酸值均明顯偏低（P<0.01），與西藥對照組比較，痛風寧高、中、低劑量組大鼠血尿酸值均明顯偏低（P<0.01），說明痛風寧高、中、低劑量組可降低實驗大鼠血尿酸水平，同樣痛風寧高、中、低劑量組之間雖差異無統計學意義，但存在著一定的量效關系趨勢，其中痛風寧高、中劑量組作用明顯。實驗結果見表1。

表1 對尿酸鈉導致大鼠痛風性關節炎血尿酸水平的影響（±s）Tab.1 Effect on serum uric acid levels of rats with acute gouty arthritis induced by uric acid sodium（±s）

表1 對尿酸鈉導致大鼠痛風性關節炎血尿酸水平的影響（±s）Tab.1 Effect on serum uric acid levels of rats with acute gouty arthritis induced by uric acid sodium（±s）

注：與空白組比較，*P<0.01；與模型組比較，#P>0.01，##P<0.01；與西藥對照組比較，▲P<0.01。

組別空白組模型組中藥對照組西藥對照組痛風寧高劑量組痛風寧中劑量組痛風寧低劑量組n 10101010101010劑量（mg/kg） 血清尿酸值（μmol/L）—105.50±4.32180.57±5.64* 190 174.28±6.79#0.1 165.20±4.96##900 152.58±4.20▲450 163.35±4.05▲225 170.20±4.05▲—

2.2 對大鼠關節腫脹度的影響 與空白組比較，模型組大鼠造模后1～2h關節明顯腫脹（P＜0．01），說明造模成功。與模型組比較，中藥對照組大鼠關節腫脹度僅有降低趨勢，而西藥對照組大鼠關節腫脹度均明顯降低（P＜0．01）、痛風寧高、中、低劑量組大鼠關節腫脹度均明顯降低（P＜0．01），與西藥對照組比較，痛風寧高、中、低劑量組大鼠關節腫脹度均明顯降低，說明痛風寧高、中、低劑量組對大鼠足腫脹具有抑制作用，痛風寧高、中、低劑量組之間雖差異無統計學意義，但存在著一定的量效關系趨勢，其中痛風寧高、中劑量組作用明顯。實驗結果見表2。

3 討論

在實驗中這種模型可在一定程度上評價藥物對急性痛風性關節炎的療效，能觀察藥物對血尿酸水平影響這一核心環節，能在大鼠關節腫脹度方面的指標檢測結果中更為明顯，能用于藥物作用機制的研究，符合人體急性痛風性關節炎的發病機制與臨床表現。

表2 對大鼠關節腫脹度的影響（±s）Tab.2 Effect on joint swelling of rats（±s）

表2 對大鼠關節腫脹度的影響（±s）Tab.2 Effect on joint swelling of rats（±s）

注：與空白組比較，*P<0.01；與模型組比較，#P<0.01。

腫脹度（mL）1h 2h 4h 8h 24h空白組 10 0.04±0.03 0.09±0.03 0.06±0.03 0.05±0.12 0.02±0.01模型組 10 — 0.55±0.05* 0.70±0.08 0.60±0.40 0.45±0.05 0.33±0.05中藥對照組 10 190 0.40±0.05 0.69±0.05 0.55±0.06 0.45±0.06 0.32±0.03西藥對照組 10 0.1 0.38±0.05# 0.45±0.05# 0.44±0.05# 0.38±0.05# 0.26±0.05#痛風寧高劑量組 10 900 0.36±0.05# 0.44±0.05# 0.40±0.05# 0.35±0.05# 0.20±0.04#痛風寧中劑量組 10 450 0.37±0.05# 0.43±0.05# 0.42±0.05# 0.37±0.05# 0.25±0.05#痛風寧低劑量組 10 225 0.39±0.05# 0.50±0.05# 0.48±0.05# 0.41±0.05# 0.30±0.05#組別 n 劑量（mg/kg）—

筆者認為急性痛風性關節炎的病因病機是以腎虛為本，水濕、痰濕、濕濁、濁毒閉阻經脈，氣血運行失暢痹阻關節，乃本虛標實之證，自擬經驗方痛風寧。本研究實驗結果表明，痛風寧能明顯抑制尿酸鈉所致大鼠足腫脹，并能顯著降低尿酸鈉所致急性痛風性關節炎大鼠的血尿酸，因而對急性痛風性關節炎具有良好的防治作用，同時豐富中醫藥對急性痛風性關節炎的防治理論。

[1]粟勝勇，黃錦軍，雷龍鳴，等.“通法”推拿對急性痛風性關節炎大鼠外周疼痛介質的影響[J].四川中醫，2010，28（9）：19-20.

[2]呂 婧，苗志敏，閻勝利，等.穿山龍治療急性痛風性關節炎的效果[J].青島大學醫學院學報，2009，45（4）：389－391.

[3]韓潔茹，謝 穎.補腎利濕法防治痛風性關節炎的實驗研究[J].四川中醫，2011，29（4）：26－28．

Experiment study of Tongfengning in preventing and curing acute gouty arthritis

JIANG De-you,ZHANG Xiao-Xin,XIE Ying,HAN Jie-ru,LI Dou,CHEN Fei,CHANG Jia-yi,LI Fu-zhen
（Heilongjiang University of TCM,Heilongjiang Harbin 150040,China）

[Objective]To explore the mechanism of the preventing and curing effect of Tongfengning on acute gouty arthritis in rats.[Methods]The 70 rats were randomly divided into seven groups:the blank group,the model group,traditional Chinese medicine control group,Western medicine control group,Tongfengning high,medium and low doses groups,with 10 rats in each group.The uric acid sodium and oxygen polybenzoxazines potassium were used to induce acute gouty arthritis in rats.The joint swelling degree and serum uric acid levels in rats were determined.[Results]Tongfengning could inhibit foot swelling,reduce serum uric acid levels.[Conclusion]Tongfengning has certain preventive and therapeutic effect on acute gouty arthritis in rats.The effect of Tongfengning high dose and medium dose group is more obvious.

acute gouty arthritis;Tongfengning;uric acid;experimental study

R255.6

A

1672-1519（2012）04-0372-03

2012-05-04）

國家自然科學基金項目（81173170），黑龍江中醫藥大學校基金項目（201107）。

姜德友（1960-），男，博士，教授，博士生導師，博士后合作導師，基礎醫學院院長，研究方向為經方治療內科疑難雜病臨床與基礎研究。