亞洲前列腺癌患者維生素D受體基因TaqI多態(tài)性的Meta分析

侯 祺 李夏西 申 健 彭俊銘 劉希哲 羅榮城 鄭少斌

(南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院泌尿外科，廣東 廣州 510515)

前列腺癌多發(fā)生于50歲以上男性。研究提示，前列腺癌與環(huán)境、種族、基因、激素及飲食習慣等多因素有關(guān)〔1〕。對前列腺癌患者流行病學研究表明，前列腺癌發(fā)生率與體內(nèi)維生素D濃度有關(guān)，而位于細胞核內(nèi)的維生素D受體(VDR)介導(dǎo)了維生素D對前列腺細胞生長、分化的作用〔2〕。VDR基因TaqI位點(rs731236)較早被發(fā)現(xiàn)，因其可影響VDR基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯而被廣泛研究。由于種族、地域等差異，國內(nèi)外關(guān)于TaqI位點與前列腺癌關(guān)系的研究存在爭議。為了全面評價亞洲人群TaqI位點多態(tài)性與前列腺癌易感性的關(guān)系，本文綜合既往相關(guān)研究進行Meta分析。

1 資料與方法

1.1 檢索策略 檢索 Pubmed、EMBase、CBM、CNKI、VIP、萬方數(shù)據(jù)平臺，并追溯所有初步納入文獻的參考文獻。搜索年限從建庫到2011年6月1日。英文搜索策略為(“single nucleotide polymorphism”O(jiān)R SNP OR polymorphism OR“genetic variation”O(jiān)R“genetic variant”O(jiān)R mut*OR“Polymorphism，Single Nucleotide”〔MeSH〕)AND(“prostate cancer”O(jiān)R“prostate carcinoma”O(jiān)R“Prostatic Neoplasms”〔MeSH〕)AND(“vitamin D”O(jiān)R VDR OR“vitamin d”［MeSH〕OR“ergocalciferols”〔MeSH〕)。中文搜索策略:(前列腺癌 OR前列腺腫瘤)AND(基因多態(tài)性O(shè)R多態(tài)性O(shè)R SNP)AND(維生素D OR VDR)。手工檢索相關(guān)雜志、會議論文、學位論文、科技報告。逐一閱讀以亞洲人群為試驗對象的有關(guān)TaqI位點多態(tài)性的文獻。

1.2 文獻納入和排除標準 納入標準:①國內(nèi)外公開發(fā)表的研究維生素D受體位點TaqI多態(tài)性與前列腺癌易感性的相關(guān)臨床對照研究，研究設(shè)計科學，研究對象有基本構(gòu)成資料，語言不限;②文獻給出病例組及對照組各多態(tài)性基因型頻率;③病例組病理學確診為前列腺癌;④對照組為年齡配對、無泌尿系癥狀的健康人群;⑤病例組與對照組人群基因頻率符合Hardy-Weinberg遺傳平衡。排除標準:①重復(fù)發(fā)表的文獻;②對照組人群來源不清，特別是患前列腺增生、前列腺炎等患者;③只分析基因的雜合性，未給出多態(tài)性基因頻率;④非臨床對照研究。

1.3 數(shù)據(jù)提取 由第一、第二作者獨立閱讀文題、摘要，對可能符合納入標準的試驗進一步閱讀全文，對納入有矛盾的試驗由第三作者與前二位作者共同討論決定。從每個納入的文獻中提取以下數(shù)據(jù):第一作者、出版年份、對象人群、檢測方法、病例組和對照組基因型頻率。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用RevMan5.0.0進行Meta分析，Stata11.0軟件進行Egger和Begg檢驗。各研究的異質(zhì)性由Q檢驗和I2值評價。如I2＜50%，選用固定效應(yīng)模型進行Meta分析;如I2＞50%，則采用隨機效應(yīng)模型。Egger檢驗和Begg檢驗評價發(fā)表偏倚。

2 結(jié)果

2.1 文獻檢索結(jié)果 共檢索到英文文獻98篇、中文文獻8篇(截至2011年5月20日)，逐一閱讀全文篩選與VDR TaqI位點有關(guān)文獻，最后共納入7篇，文獻的基本特征見表1，試驗設(shè)計均為病例對照研究，累計樣本量為1 766例，其中病例組801例，對照組965例。

表1 納入文獻的基本特征(n)

2.2 Meta分析結(jié)果 等位基因T對t(圖1)、基因型TT/Tt對tt(圖2)、TT 對 Tt/tt(圖3)，各基因型 TT、Tt、tt之間與前列腺癌易感性的OR值(表2)。Meta分析顯示，納入的7篇文獻研究間未見明顯異質(zhì)性(Q=5.06，P=0.54，I2=0%)，故采用倒方差法為各獨立研究賦予權(quán)重并進行合并。固定效應(yīng)模型未見等位基因T對t的與前列腺癌易感性有顯著性關(guān)聯(lián)(OR=1.16，95%CI=0.93 ～1.46，P=0.19)。基因型 TT/Tt對 tt、TT對Tt/tt各合并OR值均大于1，但95%可信區(qū)間(CI)包含1，且P＞0.05，表明亞洲人群前列腺癌發(fā)病與TaqI的等位基因T與t，基因型TT、Tt與tt均無顯著性關(guān)聯(lián)。

2.3 發(fā)表偏倚評估 采用Egger檢驗和Begg檢驗分別評價入選7個試驗的發(fā)表偏倚(圖4，圖5)。在Egger法回歸分析中，截距為－0.76，P＞|t|指標為0.479;且由圖4可見，7個點分布均勻?qū)ΨQ，未見明顯發(fā)表偏倚。Begg檢驗顯示 Pr＞|z|=0.548，且圖5點分布對稱，同樣未見明顯發(fā)表偏倚。

表2 TaqI多態(tài)性與前列腺癌易感性的Meta分析結(jié)果匯總

圖1 等位基因T對t的森林圖

圖2 基因型TT/Tt對tt的森林圖

圖3 基因型TT對Tt/tt的森林圖

圖4 Egger發(fā)表偏倚評價圖

圖5 Begg發(fā)表偏倚評價圖

3 討論

前列腺癌是由遺傳和環(huán)境等多因素共同致病的復(fù)雜疾病。流行病學研究顯示，維生素D〔1，25(OH)2D3〕缺乏可增加前列腺癌的發(fā)生率〔10〕。臨床上也有報道將活性維生素D作為預(yù)防前列腺癌復(fù)發(fā)的輔助治療〔11〕。進一步離體實驗表明維生素D及其類似物能抑制前列腺細胞生長、分化〔2〕。VDR蛋白在健康前列腺細胞和前列腺癌細胞中都有表達，作為甾體激素受體超家族成員介導(dǎo)了1，25(OH)2D3的抗腫瘤作用。VDR蛋白與1，25(OH)2D3結(jié)合形成異二聚體，與VDR基因反應(yīng)原件(react element)一起調(diào)節(jié) p21、p27、c-fos、c-myc 等基因的轉(zhuǎn)錄〔12〕。多態(tài)性位點 TaqI位于染色體12q13，VDR基因第9號外顯子，多態(tài)性變化介導(dǎo)同義突變，導(dǎo)致該多態(tài)性影響了VDR蛋白轉(zhuǎn)錄效率〔13〕和mRNA的穩(wěn)定性〔14〕，由此改變前列腺癌易感性。

前列腺癌的生物學行為極其復(fù)雜，發(fā)生率在不同種族和地區(qū)差異很大。1996年Taylor等〔15〕最早對258例美國白人(96例前列腺癌和162例健康對照)VDR TaqI位點多態(tài)性研究發(fā)現(xiàn)，基因型tt相較TT/Tt攜帶者不易患前列腺癌(OR=0.32，95%CI=0.15～0.75，P＜0.01)。但2006年 Andersson等〔16〕的研究得出不同結(jié)果，通過檢測瑞典人(137例前列腺癌和176例健康對照)VDR TaqI位點多態(tài)性與前列腺癌易感性發(fā)現(xiàn)兩者并不存在顯著關(guān)聯(lián)。最近Bonilla等〔17〕運用全基因組SNP芯片檢測的方法，研究550例非裔美國人(253例前列腺癌和297例健康對照)基因多態(tài)性與前列腺癌易感性的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，VDR TaqI等位基因t是前列腺癌發(fā)生的臨界危險因素(OR=1.3，95%CI=1.0～1.8，P=0.04)。前列腺癌易感性與TaqI位點多態(tài)性的關(guān)系在亞洲人群中研究較少，由于亞洲人群均由黃種人(蒙古人)構(gòu)成，具有人種、地域和基因頻率的特殊性。開發(fā)具有亞洲人群特異性的前列腺癌基因標記物，對腫瘤個體化診斷和治療有重大研究前景。本研究雖未發(fā)現(xiàn)TaqI位點與前列腺癌的相關(guān)性，但VDR調(diào)控機制復(fù)雜，目前尚未完全清楚。VDR基因多態(tài)性僅是調(diào)控VDR的一個因素，而VDR基因多態(tài)性并不取決于單個位點的多態(tài)性，TaqI位點仍可通過連鎖不平衡影響其他位點多態(tài)性對VDR基因的表達和功能〔15〕，推測TaqI位點與其他位點多態(tài)性可共同對VDR的發(fā)揮復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)調(diào)控作用。故下一步的研究可定為于TaqI位點和其他位點多態(tài)性共同作用與前列腺癌易感性之間的關(guān)聯(lián)。

既往的研究對TaqI與前列腺癌是否相關(guān)仍有爭論，本研究利用系統(tǒng)評價方法，通過搜集既往同類型研究，根據(jù)研究可靠性賦予不同權(quán)重，定量合并效應(yīng)值，達到類似于多中心、大樣本臨床對照試驗的效果，得出更科學、可靠的結(jié)論。但本研究的Meta分析也存在眾多限制。在搜集同類型的獨立研究過程中，不能得到每個研究對象的確切資料(紫外線暴露劑量、用藥情況、維生素D攝入劑量及飲食習慣)，影響對前列腺癌與各因素關(guān)系的深入挖掘，并限制異質(zhì)性來源的分析;發(fā)表偏倚也需要特別關(guān)注，由于研究者往往傾向發(fā)表有顯著性結(jié)論的研究，導(dǎo)致Meta分析得出不真實的結(jié)論。本研究雖經(jīng)Egger和Begg檢驗未發(fā)現(xiàn)明顯發(fā)表偏倚，但考慮到納入試驗數(shù)較少，發(fā)表偏倚仍存在;另外納入文獻的質(zhì)量和真實程度也影響Meta分析最終的結(jié)果。本研究雖未得出TaqI與前列腺相關(guān)性的結(jié)論，但考慮到樣本量和調(diào)控機制問題，更確切的結(jié)論有待進一步研究說明。

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