蛋白芯片法檢測結核分枝桿菌IgG抗體的診斷價值

李 影 張東浩

（吉林省結核病醫院檢驗科，吉林 九臺 130500）

我國是全球22個結核病高負擔國家之一，結核病的患患者數在世界居第2位。現有肺結核患者約451萬，其中痰涂片陽性肺結核約150萬人（結核病傳染源），全國每年新發肺結核患者約145萬人，全年死于結核病者達12萬余人，相當于各種其他傳染病死亡人數總和的2倍[1,2]。因此，結核病的快速診斷依然是亟待解決的問題。目前，結核病診斷的實驗室輔助檢查方法很多，現就南京大澳生物技術公司所采用的蛋白芯片法檢測結核分枝桿菌抗體3項的技術進行分析，評價其臨床診斷價值。

1 材料與方法

1.1 標本來源

2011年5月8日至2011年11月5日，本院住院的結核病（包括肺結核、結核性胸膜炎和肺外結核）確診患者，共計531例，男性279例，女性252例，年齡在12～86歲。其中，肺結核（包括痰菌涂片陽性和痰菌涂片陰性）患者血清259例，結核性胸膜炎患者血清158例，肺外結核（包括骨結核、腎結核、結核性腦膜炎、淋巴結結核等）患者血清114例。

1.2 儀器及試劑

南京大澳生物技術公司的配套儀器及相應試劑盒。

1.3 檢測方法

嚴格依照配套說明書進行操作，結果由儀器自動判讀。

2 結 果

2.1 3種抗原的抗體聯合測定，任何一種陽性即為結核抗體陽性。531例結核患者血清標本蛋白芯片檢測共261例陽性，靈敏度為49.15%。

不同類型的結核病抗體陽性率不同，痰菌涂片陽性的肺結核患者122例，其中陽性95例。痰菌涂片陰性的肺結核患者137例，其中陽性74例。見表1。

表1 不同類型結核患者結核抗體蛋白芯片陽性檢測率 例（%）

2.2 結核患者的3種抗體陽性率以抗LAM的陽性率最高，占42.75%（227/531）；其次是抗38KDa抗體，占34.84%（185/531）；最低的為抗16KDa抗體，占21.81%（68/531）。實驗表明，結核桿菌蛋白3種抗體均為陽性為6.59（35/531）%，所有陽性結果，以LAM和38KDa同時出現的檢出率為最高，占26.55（141/531）。詳見表2。

表2 結核桿菌蛋白LAM、16KDa和38KDa抗體的陽性檢出率 例(%)

3 討 論

脂阿拉伯甘露聚糖（LAM） 脂阿拉伯甘露聚糖是一種非蛋白結核分枝桿菌抗原，屬特異性抗原，主要存在于結核菌表面，具有較強的免疫原性和抗原性，能夠刺激結核菌感染者產生抗體。而其它分枝桿菌由于表面LAM含量低，不能刺激機體產生高水平的抗體量，故抗-LAM的特異性和敏感性都較高，對活動性肺結核，尤其對痰菌涂片陰性肺結核的診斷有較好的價值。

38KDa和16KDa蛋白質抗原 38KDa抗原具有強免疫性。這種抗原在區分結核分枝桿菌感染還是非結核分枝桿菌感染方面具有重要的實際價值，重組38KDa抗原與結核分枝桿菌本身合成的38KDa抗原無免疫性差異，其特異性100%，與正常健康人、非結核分枝桿菌感染和麻風無交叉。38KDa與16KDa聯合檢測可提高敏感性。結核分枝桿菌抗原多而復雜，在宿主體內表達的數量、種類或時機可能隨患者的個體免疫背景和病程而異，表現出不同的抗原抗體譜。檢測時有的抗原不表達，未檢測出相應的抗體；有的抗體含量高，有的則低。因此，多種抗原聯合檢測，在保證特異性的基礎上有助于提高靈敏度，并可用于結核分枝桿菌的自然感染或卡介苗接種后陽轉者的區別。

結核分枝桿菌3種抗原IgG抗體蛋白芯片的檢測意義：當LAM、38 KDa任意一指標為陽性結果或單一指標呈陽性時，表示患者體內有活動性結核分枝桿菌抗體存在，結合臨床癥狀后需要進行抗癆治療。此兩項指標可排除卡介苗接種的影響；僅當16KDa為陽性時，表示患者體內有結核分枝桿菌抗體，但不能完全排除卡介苗接種的影響，需要結合其他信息進一步確認；當3項指標均為陽性時，表示患者體內有活動性結核分枝桿菌存在，需要及時的給予抗癆治療；當3項指標均為陰性時，表示患者未被活動性結核分枝桿菌感染；當患者第1次檢查時，某項指標為陽性時，但沒有任何臨床癥狀時，需要在一個半月至2個月后復檢，如果為陰性，不需要對其治療，如果仍為陽性，需要進一步查找原因，并給予患者適當的治療；當患者經過1個療程治療2個月后復檢時LAM或38KDa仍呈陽性反應，表示治療效果不佳，需要調整治療方案并持續治療。如果呈陰性反應，表示治療達到效果。特異結核菌抗原LAM、16KDa、38KDa，這些抗原是其他分枝桿菌所不具有的或者含量非常低的，人感染結核菌后會產生針對此3種抗原的特異性抗體。應用蛋白芯片技術可從患者血清中檢測到這些特異性抗體，而對患者做出早期診斷。已證實接種卡介苗后，人體基本不會出現針對3種抗原的抗體，因此，即使已經預防接種，對試驗結果的干擾也極其微小[3]。

用生物蛋白芯片技術測定患者體液中結核分枝桿菌IgG抗體，敏感性高，特異性好，操作簡單、靈活，是一種較理想的結核病的輔助診斷方法。生物蛋白芯片技術檢測結核分枝桿菌IgG抗體在臨床上主要用于[4]：①用于活動性結核菌感染引起的疾病特異性抗體檢測；②非活動性感染及接受過卡介苗接種者；③涂片、培養檢測為陰性的人群檢測；④肺部其他疾病的鑒別診斷和結核病化療后的動態觀察。

部分病例出現痰菌涂片陽性而蛋白芯片檢測陰性，原因如下[5]：首先是早期的患者體內抗體水平較低，還沒有達到檢測的最低量；其次是有些較重的患者，免疫功能相對較弱，或者用藥后抑制了免疫功能，造成了患者體內的抗體水平低下；其他還有方法本身還不夠完善、患者有抗原抗體之間的差異等因素所造成。

[1]梅建.結核病流行現狀與控制策略[J].上海預防醫學雜志,2003,15(3)：103-104.

[2]樊學軍,孫敏.結核病實驗室診斷技術的比較研究[J].中國國境衛生檢驗雜志,2005,28(1)：160-162.

[3]王紅.蛋白芯片技術檢測結核分枝桿菌IgG抗體結果分析[J].實用醫技雜志,2006,11(13)：22.

[4]李洪敏,吳雪瓊,王巍,等.結核生物蛋白芯片在結核病中的應用[J].中國醫師雜志,2005,11(17)：1556-1557.

[5]米琳,劉幸福.蛋白芯片技術檢測抗酸柑橘涂片陽性患者結核分枝桿菌多種抗原的IgG抗體的研究[J].山東雜志,2006,11(11)：1047.