不同栽培方式對靈芝活性成分的影響*

袁學軍，陳永敢，陳光宙，陳忠蔭，李艷麗

（瓊州學院生物科學與技術學，海南 三亞 572000）

靈芝的生物活性成分十分豐富，豐富的生物活性成分決定了它功能的多樣性[1]。據有關研究表明，目前已分離到靈芝的150余種活性成分，有多糖類、核苷類、生物堿類、氨基酸、蛋白質類、三萜類和礦質元素等[2]，具有抗腫瘤、保肝解毒、預防心血管系統疾病、抗過敏、抗衰老、抗神經衰弱、治療高血壓、慢性支氣管炎、支氣管哮喘等作用[3]。除醫學外，靈芝在食品、飲品以及保健品產業都占有一定的市場與地位，具有較高的觀賞價值及經濟價值[4]。靈芝既不同于一般藥物對某種疾病起治療作用，亦不同于一般營養保健食品只對某一方面營養素的不足進行補充和強化，它的獨特之處主要在于它是在整體上雙向調節人體機能平衡，調動機體內部活力，調節人體新陳代謝，提高自身免疫能力，促使全部的內臟或器官機能正?；?，從而從根本上達到治病強身保健的目的[3]。

目前，國內外學者已經對藥用靈芝中活性成分進行不同的研究：靈芝活性蛋白[5-8]、靈芝多糖[9-11]、靈芝三萜[12-14]和靈芝酸[15-17]等，到目前為止，還沒有關于不同栽培方式對靈芝活性成分的影響的報道。

1 材料與方法

1.1 材料和藥品

1.1.1 材料

靈芝采收后及時將污物清理干凈，在60℃的條件下在干燥箱內干燥24 h，然后用20目的粉碎機粉碎，最后用帶拉鏈的塑料帶密封備用。

1.1.2 藥品

葡萄糖，廣州化學試劑廠；熊果酸和香草醛，上海晶純試劑有限公司；牛白蛋白、考馬斯亮藍G250，國藥集團化學試劑有限公司；活性炭、蒽酮、三氯甲烷、磷酸、冰乙酸、氯化鈉、硫酸銨、碳酸氫鈉、鹽酸、氫氧化鈉、無水乙醇、硫酸和高氯酸均為分析純。

1.2 方法

1.2.1材料來源

野生靈芝來源于尖峰嶺自然保護區，栽培用的菌種來源于從尖峰嶺自然保護區獲得的經過分離出的同一管母種，栽培料用直徑15 cm、長20 cm印度紫檀的木段，發菌結束后進行不同方式的栽培，其他條件均相同。

1.2.2 測定方法

靈芝多糖的測定參考蒽酮-硫酸法[18]，用葡萄糖做的標準曲線為：y=0.7622x+0.0122，R2=0.998。

靈芝蛋白的測定參考考馬斯亮藍G-250法[18]，用牛血清白蛋白做的標準曲線為：y=0.6643x+0.0009，R2=0.999。

靈芝三萜的測定參考直接光度法測定法[19]，用熊果酸做的標準曲線為：y=0.4144x-0.01，R2=0.9934。

1.3 統計分析

用南京農業大學王韶華教授發明的stst軟件進行統計分析。

2 結果與分析

不同栽培方式對靈芝活性成分的影響見表1。

表1 不同栽培方式對靈芝活性成分的影響

從表1可知，靈芝多糖方面，尖峰嶺處理的和野生的相比無顯著性差異，可能是由于菌種來源于同一子實體，前期一個是在實驗室中發菌，一個是在自然中發菌，但子實體生長階段條件則基本相同的緣故；其他處理之間均存在顯著性差異，其中椰糠處理的最高，可能是菌絲也能從椰糠中吸收一部分糖分，且椰糠中糖分相對豐富，而太白山處理的多糖含量最低，可能是由于太白山土壤貧瘠造成的，靈芝多糖含量由高到低的順序為椰糠、尖峰嶺、野生、果園、太白山，因此，靈芝多糖的含量與栽培基質有直接關系。

靈芝蛋白方面，尖峰嶺處理的和野生的相比無顯著性差異，造成的原因與多糖相同，其他處理之間均存在顯著性差異，其中椰糠處理的最高，但西校區處理的最低，這與多糖含量不同。靈芝蛋白含量由高到低的順序為椰糠、尖峰嶺、野生、太白山、果園，因此，靈芝蛋白的含量也與栽培基質有直接關系。

靈芝三萜方面，尖峰嶺處理的和野生的相比無顯著性差異，其他處理之間均存在顯著性差異，其中椰糠處理的最高，西校區處理的最低，靈芝三萜含量由高到低的順序為椰糠、太白山、野生、尖峰嶺、果園，因此，靈芝蛋白的含量也與栽培基質有直接關系。

3 討論與結論

靈芝多糖、蛋白、三萜類化合物是靈芝中的主要活性物質，也是衡量靈芝質量的重要指標[20]。該研究對同一靈芝菌不同栽培方式的多糖、蛋白和三萜含量進行了比較，結果表明，由于分離的子實體來源于尖峰嶺，前期人工發菌，出菇返回原生地，出菇條件相同，所以和野生相比，3種活性成分的含量無顯著性差異，但不同處理之間差異性極顯著，這說明產地的子實體活性物質的含量不同，這可能與周圍基質中的養分含量的多少有關。

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