蓮芝消炎膠囊中脫水穿心蓮內酯質控標準的研究

王奇志，黃輝球，黃志剛，梁旭霞，馮 煦*

1江蘇省中國科學院植物研究所(南京中山植物園)江蘇省藥用植物研究開發中心，南京 210014;2廣東惠州九惠藥業有限公司，南岸路199號，惠州 516007

蓮芝消炎膠囊系穿心蓮醇浸膏與山芝麻浸膏組成的復方制劑，具有清熱、解毒、消炎功效。用于腸胃炎、支氣管炎、扁桃體炎、咽喉炎、肺炎等疾患。為目前暢銷的一種非處方藥。有關其質量標準中含量測定采用加堿水解酸回滴定，以每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.1 moL/L)，相當于 35.05 mg的穿心蓮內酯(C20H30O5)計算，應為標準量的 90.0% ～110.0%［1］，由于加入指示劑的色澤標準存在人為因素，難以掌握，重現性差，且測定對象僅為總內酯。無脫水穿心蓮內酯含量的標示，與藥典要求以脫水穿心蓮內酯含量評價穿心蓮制劑質量不一致。雖然有關穿心蓮膠囊中脫水穿心蓮內酯已有報道［2，3］，但對蓮芝膠囊的相關研究則很少。為此，我們從原料質量、總內酯、提取工藝、測定方法和有效成分質控諸多方面對該產品進行了系統研究，本文報道蓮芝消炎膠囊中脫水穿心蓮內酯質控的探討。

1 儀器、藥品和試劑

1.1 儀器

高效液相色譜儀LC-10ATVP配SPD-10AVP檢測器;UV2100紫外掃描儀;色譜柱YMP pack ODS-A A303 S-5 μm，250 ×4.6 mm。

1.2 試劑

純凈水、甲醇(色譜純)、乙醇(分析純)。

1.3 樣品

蓮芝消炎膠囊浸膏，蓮芝消炎膠囊產品、山芝麻浸膏(廣惠州九惠制藥有限公司提供)、脫水穿心蓮內酯、穿心蓮內酯(中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用）。

2 色譜條件

流動相為甲醇:水(6∶4)，體積流量1 mL/min，靈敏度0.005 AuFS，檢測波長254 nm，柱溫30℃。

圖3結果表示在保留時間t=14～17 min間，山芝麻浸膏此處無出峰信號，測定脫水穿心蓮內酯時不存在干擾。

3 溶液的配制

3.1 標準溶液的配制

為適應制劑中可能存在所含脫水穿心蓮內酯不同質量濃度的要求，本實驗制備了高、中、低三種不同濃度的標準液。高濃度取5.26 mg，中濃度3.96 mg，低濃度取2.69 mg分別置于25 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，三個質量濃度分別為:0.2104 mg/mL、0.1584 mg/mL 和 0.1076 mg/mL。

3.2 標準曲線的制備

取上述配制的標準液用量分別為2，6，10，14，18(μL)，在相同條件下測得面積積分值。結果脫水穿心蓮內酯量在0.2～4 μg間呈線性關系，回歸方程y和r值分別為:

3.3 精密度的測定

精密吸取相同體積的標準液20 μL，進樣6次，分別測得面積積分值見表1，RSD%值表明精密度良好。

表1 兩次精密度測定結果Table 1 Two results of precision

3.4 回收率的測定

表2 加樣回收率試驗Table 2 Adding recovery test(n=12)

3.5 日內穩定性和日間穩定性的考察

3.5.1 日內穩定性

取批號051003樣品的配制液(配制見后)定時進樣10 μL，測定內含脫水穿心蓮內酯峰面積見表2。

3.5.2 日間穩定性

取批號050901樣品的配制液，進樣10 μL，隔日一次，共三次，測得脫水穿心蓮內酯峰面積見表3，其日內和日間的RSD分別為0.99%和0.56%，說明膠囊中脫水穿心蓮內酯日內和日間穩定性良好。

表3 樣品穩定性的測定Table 3 Determination of the stability of the sample

4 蓮芝消炎膠囊中脫水穿心蓮內酯的含量測定

4.1 樣品液制備

根據正交試驗優選蓮芝消炎膠囊穿心蓮浸膏的制備工藝得出的結果，穿心蓮中穿心蓮內酯類成分以稀醇的溶出率為最高，考慮到HPLC常用甲醇為流動相，所以本試驗用甲醇為提取溶劑，并結合超聲處理可在短時間內達到提取完全的效果，因此本法為精密稱取樣品0.1 g，置25 mL量瓶中加甲醇20 mL，搖勻，放置30 min后經超聲20 min，再室溫放置30 min，加甲醇定容，用0.22 μ 膜濾過，取續濾液5 mL置于10 mL量瓶中，加甲醇定容備用。此液進樣20 μL 或 10 μL。

4.2 樣品液中脫水穿心蓮內酯的含量測定

本測定采用外標法，色譜條件同前，在樣品液測試的同時進行了標準品質量與峰面積的分析，求得質量與峰面積的比值，分別為2.104 μg/7644279.7;1.055 μg/3045742.5(n=3，RSD ＜1%)。從 2004-2006三年間任選多批次，抽樣分析結果見表4，除一批次(20051003)每0.5 g蓮芝膠囊中脫水穿心蓮內酯＜10 mg外大部分都高于10 mg，因此建議蓮芝消炎膠囊中脫水穿心蓮內酯的質量標準擬控制在每0.5 g的膠囊中含脫水穿心蓮內酯≥10 mg，可保證蓮芝消炎膠囊的良好療效。

表4 蓮芝消炎膠囊中脫水穿心蓮內酯的含量Table 4 dehydroandrographolide content of Lian Zhi Xiao Yan Capsule

5 討論

本實驗建立的RP-HPLC法簡便、快捷、正確，完全適用于復方制劑蓮芝消炎膠囊中脫水穿心蓮內酯的含量測定。

實驗結果表明蓮芝消炎膠囊中脫水穿心蓮內酯的質量標準是每粒蓮芝消炎膠囊(0.5 g)中脫水穿心蓮內酯的含量控制在≥10 mg為宜。

1 Guangdong Institute for Drug Control.Lian Zhi Xiao Yan Capsule.WS3-B-2403-97

2 Yu XT(俞小陶)，Xu H(許紅).Determination of dehydroandrographolide content in andrographolide capsules by RP-HPLC.Acad J of Guangdong Coll of Pharm(廣東藥學院學報)，2003，19:17-19.

3 Chen BL.Determination of dehydroandrographolide content in andrographolide capsules by HPLC.Anhui Med and Pharm J(安徽醫藥)2005，9:591-592.