乙型肝炎病毒PreS1抗原與HBV DNA載量及HBeAg的關系探討

唐維政，孫鴻高

(海南省農墾總醫院東湖院區檢驗科，海南海口570311)

乙型肝炎病毒PreS1抗原與HBV DNA載量及HBeAg的關系探討

唐維政，孫鴻高

(海南省農墾總醫院東湖院區檢驗科，海南海口570311)

目的探討乙型肝炎病毒（HBV）前S1(PreS1)抗原與HBV DNA熒光定量結果及HBeAg之間的相關性，以了解PreS1抗原在反映HBV復制中的價值。方法對475例熒光定量PCR檢測HBV DNA陽性患者的血清PreS1抗原和HBVm結果進行分析。結果475例HBV DNA陽性患者中，PreS1抗原的陽性率為88.4%，且血清中HBV DNA載量水平與PreS1抗原陽性檢出率間不存在顯著相關性(χ2=0.41，P＞0.05)；HBeAg陽性率為50.9%，不同HBV DNA載量水平下HBeAg陽性檢出率間差異有統計學意義(χ2=94.27，P＜0.01)，HBeAg陽性檢出率隨著HBV DNA載量增加而增加；HBV DNA陽性者血清中PreS1抗原陽性率與HBeAg陽性率之間差異有統計學意義(χ2=148.05，P＜0.01)。HBeAg陽性患者中PreS1抗原陽性率為92.6%，HBeAg陰性患者中PreS1抗原陽性率為84.1%，兩組PreS1抗原陽性率的差異有統計學意義(χ2=8.26，P＜0.01)。結論PreS1抗原是判斷HBV復制的良好指標，其與HBeAg沒有相關性，對HBV的復制和療效判斷優于HBeAg，PreS1抗原可作為HBV DNA熒光定量的有益補充，用來判斷病毒復制情況。

乙型肝炎病毒；前S1抗原；HBV DNA

我國是乙型肝炎的高發區，慢性HBV攜帶者傳染性強弱、患者治療效果等始終是醫生和患者都十分關注的問題。過去認為HBeAg陰性的乙肝患者傳染性弱，是否有病毒的復制，不進行HBV DNA檢測則無法判斷。HBV DNA是診斷乙肝病毒復制的金標準，但其對檢測條件要求嚴格，一些單位不能開展，而且因DNA序列變異等原因，HBV DNA檢測也存在假陰性。近年來隨著乙肝病毒PreS1抗原檢測試劑盒的推廣應用，對其在乙肝臨床診斷中的意義進行了很多探討，但結論不一。本研究通過對HBV DNA陽性患者的PreS1抗原及HBVm進行血清學檢測，探討PreS1抗原對乙肝病毒復制的診斷意義。

1 資料與方法

1.1 標本來源2011年3月至2011年8月間本院門診及住院HBV DNA檢測陽性并同時檢測前S1抗原及HBVm的慢性乙型病毒性肝炎患者及慢性乙肝病毒攜帶者共475例，男301例，女174例；年齡20～65歲，平均40.4歲。

1.2 方法PreS1抗原檢測采用ELISA雙抗夾心法，試劑盒由湖北武漢康珠生物技術有限公司提供。HBVm采用ELISA法測定，試劑盒由廈門新創科技有限公司提供。ELISA法實驗操作嚴格按試劑說明書進行，酶標儀為芬蘭雷勃Wellscan k3。HBV DNA檢測采用實時熒光定量PCR法，儀器型號Taqman 33A，儀器和試劑均由上海復興長征醫學科學有限公司提供。

1.3 統計學方法采用SPSS16.0軟件統計，樣本率的差別采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 陽性檢查情況在475例HBV DNA陽性(病毒載量≥1×103copies/ml)的慢性乙肝患者及乙肝病毒攜帶者中，PreS1抗原陽性率為88.4%，HBeAg陽性率為50.9%，檢出率之間差異有統計學意義(χ2=148.05，P＜0.01)，見表1。

表1 475例HBV DNA陽性者血清中PreS1抗原與HBeAg檢出情況

2.2 血清中不同HBV DNA載量水平之間PreS1抗原與HBeAg檢出情況檢測發現，不同HBV DNA載量水平下PreS1抗原檢出率間差異無統計學意義，而HBeAg檢出率隨HBV DNA載量水平增高而增高，不同HBV DNA載量水平下HBeAg檢出率之間差異有統計學意義（P＜0.01），見表2。

表2 不同HBV DNA載量水平下PreS1抗原與HBeAg檢出情況

2.3 不同載量水平下的檢出情況在475例HBV DNA陽性者血清中，HBeAg陽性和HBeAg陰性患者的PreS1抗原陽性率分別為92.6%和84.1%，兩組間PreS1抗原陽性率差異有統計學意義（P＜0.01），見表3。

表3 HBV DNA陽性者PreS1抗原與HBeAg相關分析

3 討論

目前認為熒光定量PCR直接檢測患者血清HBV DNA載量，是反映HBV感染、復制及判斷治療效果的金標準。PreS1是HBV外膜蛋白的重要組成成分之一，在介導HBV感染和免疫清除中具有重要的作用。近年來，國內外臨床研究表明PreS1抗原可作為判斷HBV復制的指標。我們的研究表明，在HBV DNA陽性乙肝患者中，PreS1抗原和HBeAg的陽性率分別為88.4%和50.9%，PreS1抗原檢出率顯著高于HBeAg，表明PreS1抗原反映HBV復制時優于HBeAg，與文獻報道相似[1-2]，但有的作者報道HBeAg檢出率顯著高于PreS1抗原[3]，可能與所選病例的感染狀態不同有關。

表2所示，無論病毒載量的高低，PreS1抗原檢出率間差異無統計學意義，這與PreS1抗原存在于病毒表面的理論相符，但有的報道PreS1隨HBV DNA含量的增加而增加[1]，與我們觀察的結果不同。HBeAg檢出率隨HBV DNA載量水平增高而增高，在HBV DNA載量≥1×107copies/ml組，PreS1抗原與HBeAg的陽性率差異無統計學意義，表現出與HBV DNA高度相符，這提示在HBV低水平復制時檢測PreS1抗原更有意義。

在HBV DNA陽性情況下，HBeAg總的陰性率達49.0%。HBeAg陰性者中PreS1抗原的陽性率達84.1%，可能是由于HBV基因組前C區發生變異導致HBeAg表達障礙，此時HBeAg陰性并不表明HBV復制停止，過去認為HBeAg陰性的乙肝病毒攜帶者傳染性低是不科學的。我國部分省市HBeAg陰性的慢性乙型肝炎患者經過核酸序列測定，證實HBV前C區或C區啟動區突變率為17.6%～78.9%。本文研究的475例HBV DNA陽性的標本中仍有55例PreS1抗原陰性，可能與前S區缺失突變有關。Sugauchi等[4]研究表明，HBV攜帶者前S區缺失突變率為23%。國內蔣棟等[5]檢測363例慢性乙型肝炎和無癥狀攜帶者血清，發現30例存在前S區缺失突變，而前S區突變并不影響病毒的復制和裝配。由于前C區突變的頻率遠高于前S區突變，這可能是在反映HBV復制方面HBeAg不如PreS1靈敏的原因。

我們在統計HBV DNA定量檢測結果小于1×l03copies/ml的55例患者中發現，HBVm檢測中有6例為“大三陽”模式，其他為“小三陽”模式，但有45例PreS1抗原為陽性，可能與選擇的病例一直在抗病毒治療有關，即抗病毒治療后，患者體內HBV DNA載量下降至FQ-PCR的檢測限以下(＜1×103copies/m1)，肝細胞內仍有病毒存在,或引物對應的DNA序列變異等原因所致。

綜上所述，傳統上根據HBeAg是否陽性來判斷HBV的復制情況是很不嚴謹的。全面而真實地反映HBV復制的情況都應進行血清PreS1抗原測定，有條件的最好同時進行HBV DNA定量檢測。PreS1抗原是反映病毒復制的良好指標，在HBeAg陰性或HBV DNA載量下降至FQ-PCR的檢測限以下或引物對應的DNA序列變異時，PreS1抗原在病毒復制的監測方面可以作為HBV DNA監測不足的補充。

[1]占國清,譚華炳,李芳,等.血清乙型肝炎病毒前S1抗原對判定HBV DNA復制的臨床價值[J].實用肝臟病雜志,2011,14(2): 103-105.

[2]張春平,楊洋,譚太昌,等.乙型肝炎病毒載量與血清學標志及PreS1抗原的關系[J].中國實驗診斷學,2005,9(3):334-336.

[3]竇亞玲,李永哲,劉志肖,等.乙型肝炎病毒前S1抗原檢測的臨床價值[J].中華檢驗醫學雜志,2006,29(8):714-716.

[4]Sugauchi F,Ohno T,Orito E,et a1.Influence of hepatitis B virus genotypes 0n the development of PreS deletion and advanced liver disease[J].J Med Virol,2003,70(4):537-544.

[5]蔣棟,許軍,李若冰,等.乙型肝炎病毒前S基因區缺失突變發生機制的探討[J].病毒學報,2002,18(4):317-324.

R512.6+2

B

1003—6350（2012）21—095—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.21.041

2012-03-31）

唐維政（1964—），男，江蘇省宿遷市人，副主任技師。