雷公藤內(nèi)酯醇提取工藝的研究比較

肖永平 郭彬 凌英蓉

雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)，屬衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，性味“苦，大毒”，可“殺蟲，消炎，解毒”[1]，其主要作用成分雷公藤內(nèi)酯醇(triptolide)經(jīng)提取富集常用于治療類風濕性關(guān)節(jié)炎、器官移植排異、皮膚病等多種自身免疫系統(tǒng)疾病。目前國內(nèi)外主要采用先經(jīng)水或乙醇提取，再用氯仿或醋酸乙酯等有機溶劑萃取的生產(chǎn)工藝[2]及超臨界提取法等。筆者所在機構(gòu)以雷公藤葉為材料研究比較雷公藤內(nèi)酯醇水提醇沉法與醇提水沉法，現(xiàn)報告如下。

1 實驗材料與設(shè)備

高效液相色譜儀(上海天普分析儀器有限公司);雷公藤內(nèi)酯醇對照品(昆明科翔生物科技有限公司);雷公藤葉(浙江新昌);實驗用乙醇含量為95%，其他所有試劑均為分析純。

2 方法

2.1 色譜條件[3]色譜柱:LichrospherC18柱(4.6 mm×200 mm，5μm，淮陰漢邦科技有限公司);流動相:乙腈-水(35∶65，v/v);檢測波長210 mm;流速:1.0 ml/min。進行前樣品經(jīng)0.45 μm濾膜過濾。

2.2 考察方法 色譜分離:經(jīng)過上述色譜條件下分離，雷公藤內(nèi)酯醇保留時間約為10 min，且與其他共有物質(zhì)分離良好。同時對同一批供試品進行重復性、穩(wěn)定性、精密度實驗，均進行10次，結(jié)果RSD分別為0.52%，5.2%，3.67%。取已測知雷公藤內(nèi)酯醇含量供試品平行10份進行加樣回收率實驗，均精密加入對照品242.4 μg，按樣品制備方法操作，得出平均加樣回收率93.17%，由此可證明所行測定方法可行。

2.3 樣品處理方法[4]醇提水沉法:取雷公藤葉1kg，95%乙醇回流提取3次，每次2 h，回收適量乙醇靜置，再經(jīng)抽濾、濾渣烘干，稱重得a醇=46.3 g，濾液定容至每次0.5 g/ml生藥(A醇)，留樣待測。其余加10倍量蒸餾水煮沸，靜置48h后過濾，所得濾渣量很少，忽略不計。將濾液濃縮至0.5 g/ml生藥(B醇)備用。

水提醇沉法:取雷公藤葉1 kg，水剪煮3次，每次2 h，將所得水煎液合并濃縮至適量，靜置48 h，再經(jīng)抽濾、濾渣烘干，稱重得a水=56.3 g，濾液定容至1 g/5 ml生藥(A水)，留樣待測。其余加95%乙醇至含醇量70%，沉淀靜置48h，抽濾、濾渣烘干稱重得b水=66.3 g，濾液濃縮至1 g/2 ml生藥，靜置24h后抽濾、濾渣烘干稱重得c水=1.6 g，將濾液定容為1 g/2 ml生藥(B水)備用。

2.4 樣本制備 固體樣本:取a醇20 g，a水20 g，b水20 g，c 水 1.6 g，分別加蒸餾水 100 ml、100 ml、100 ml、50 ml，經(jīng)水浴、過濾、濾液氯仿萃取、水浴揮干，最后定容至10 ml，留樣測定含量，詳見表1。

液體樣本:取 a醇 80 ml，b 醇 80 ml，a 水 100 ml，b 水 80 ml，水浴揮干，加水40 ml，繼續(xù)揮干至無醇味，加蒸餾水60 ml，氯仿萃取、水浴揮干，最后定容至10 ml，留樣測定含量，詳見表2。

3 結(jié)果

表1 各固體樣本中雷公藤內(nèi)酯醇含量

表2 各液體樣本中雷公藤內(nèi)酯醇含量

4 討論

雷公藤內(nèi)酯醇的提取目前以溶劑法為主，本研究通過比較醇提水沉法與水提醇沉法兩種提取工藝，得出醇提水沉法更加有利于保存雷公藤內(nèi)酯醇，其提取液中含量比水提醇沉法提取液含量更高且差異明顯。分別加水處理后，醇水法雷公藤內(nèi)酯醇含量損失較水醇法更低。

通過本研究，筆者可得出結(jié)論醇，醇水法提取雷公藤內(nèi)酯含量明顯優(yōu)于水醇法。

[1]蔡光先.湖南藥物志.湖南科技出版社，2004:3645-3647.

[2]陳俊元，夏志林，鄧福孝.雷公藤內(nèi)酯醇提取工藝改進.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，1989，20(5):195.

[3]李克，袁依盛，戴曉莉，等.反相高效液相色譜法測定雷公藤提取物中雷公藤甲素含量.色譜，1998，16(4):356-357.

[4]王曙東，湯淏，李克.不同提取工藝對雷公藤內(nèi)酯醇含量的影響.南京中醫(yī)藥大學學報，2009，25(4):289-290.