欒新紅,郭英振,姜懷志,張世偉,郭 丹,于立輝,趙 鵬
(1.沈陽農業大學畜牧獸醫學院,遼寧 沈陽110866;2.吉林農業大學動物科技學院,吉林 長春130118;3.遼寧省畜牧科學研究院,遼寧 遼陽111000;4.甘肅農業大學動物科技學院,甘肅 蘭州730070)
遼寧絨山羊具有重要經濟價值,尤其是山羊絨,因其纖維細而柔軟、輕而保暖,廣受人們歡迎。但山羊絨的生長呈季節性,產量較低,遠不能滿足市場需要,而且人工剪羊毛也消耗了大量的勞動力。為提高山羊絨的產量和品質、解決人工剪羊毛所帶來的勞動量繁重等缺點,國內外學者研究用生物或化學脫毛劑來進行脫毛,目前這方面的藥物有小鼠表皮生長因子(mEGF)、含羞草氨酸(Mimosine)、乙硫氨酸(Ethionine)、環磷酰胺(Cyclophosphamide)等[1]。環磷酰胺作為一種比較理想的脫毛用藥,從20世紀70年代開始,國、內外就有專家對其進行了研究,并已獲得成效[2-3]。但是,藥物脫毛后羊絨的再生長是這類藥物脫毛劑在生產應用過程中面臨的一個實際問題。有研究[4-5]表明,梳絨后于動物頸部皮下埋植褪黑素可以誘導當年絨毛再生長,從而增加羊絨產量。但目前尚未見環磷酰胺和裉黑志聯合使用以實現有效脫毛及增產效果的報道,為此,本研究著重探討這兩種藥物組合應用對遼寧絨山羊血清激素及酶水平的影響,旨為實踐應用提供理論依據。
1.1 試驗動物及分組 4歲雌性健康遼寧絨山羊12只 (吉林省絨山羊種羊繁育中心提供),隨機分為4組,即對照組和試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組,每組3只。其中試驗Ⅰ和Ⅱ組埋植褪黑素(每只60mg);試驗Ⅱ和Ⅲ組于試驗開始后第30天肌肉注射環磷酰胺(26mg·kg-1[2])。所有試驗羊均維持自然光照,采取舍飼和放牧相結合,以放牧為主的飼養模式。
1.2 指標測定及數據處理 分別于試驗開始后0、30和50d采集血樣,制備血清,采用全自動生化分析儀及酶標儀檢測血清中酶和激素水平。其中血清酶測定試劑盒選自中生北控生物科技股份有限公司,酶免法試劑盒選自上海勁馬生物科技有限公司。
試驗數據以平均值±標準差表示,用SPSS 13.0軟件進行方差分析,運用LSD法進行多重比較。
2.1 遼寧絨山羊血清酶水平的檢測 肌酸磷酸激酶(CPK)含量,對照組加入或注射藥后不同采樣時間之間差異顯著(P<0.05)(表1);試驗Ⅱ組50d時與0和30d比較均差異顯著(P<0.05);試驗Ⅲ組30d與0和50d比較均差異顯著(P<0.05)。α-淀粉酶(A-AMY)含量,對照組、試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組組內3次采樣所得值之間均差異顯著(P<0.05);試驗Ⅲ組50d與0和30d間均差異顯著(P<0.05);試驗全期各組均值呈隨時間增加而上升的趨勢。堿性磷酸酶(ALP)含量,對照組3次采樣所得值之間均差異顯著(P<0.05);30d時對照組與試驗Ⅲ組差異顯著(P<0.05);其余各組內及組間差異不顯著(P>0.05);對照組、試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組呈隨時間而升高的趨勢,試驗Ⅲ組呈先升高后降低趨勢。
2.2 遼寧絨山羊血清激素水平的檢測 血清中促腎上腺皮質激素(ACTH)水平,試驗全期各組間及組內差異均不顯著(P>0.05)(表2);各試驗組50d時均降低,尤其是試驗組Ⅰ和Ⅱ更為明顯。皮質醇(Cor)及EGF水平,試驗全期各組間及組內差異不顯著(P>0.05)。試驗全期各組褪黑素(MT)含量均呈隨時間而降低的趨勢,各處理組組間差異均不顯著(P>0.05);對照組、試驗Ⅰ、Ⅲ組組內差異也均不顯著(P>0.05),試驗Ⅱ組50d與0和30 d比較均差異顯著(P<0.05)。

表1 藥物脫絨對血清酶含量的影響Table 1 Effects of depilation by drugs on serum enzyme content U·L-1

表2 藥物脫絨對血清激素含量的影響Table 2 Effects of depilation by drugs on serum hormone levels U·L-1
3.1 藥物脫絨對遼寧絨山羊血清酶水平的影響 肌酸激酶與細胞內能量運轉、肌肉收縮、腺嘌呤核苷三磷酸再生有著直接的關系。結果顯示,30和50d時,試驗Ⅰ組肌酸磷酸激酶含量水平降低,試驗Ⅲ組肌酸磷酸激酶含量升高,說明環磷酰胺可能具有提升肌酸磷酸激酶含量的作用,而褪黑素則具有降低其含量的作用。有研究[2]表明,長期給予環磷酰胺可能導致出血性膀胱炎,骨髓抑制進而發展為造血功能降低,而這兩種疾病的重要指標之一即為肌酸磷酸激酶含量。本研究顯示,試驗Ⅱ組50 d時肌酸磷酸激酶含量升高,但最終含量低于試驗Ⅲ組,這說明褪黑素可能通過調節體內各系統的生理功能對機體起保護作用,降低環磷酰胺的副作用。
埋植褪黑素或注射環磷酰胺都有提高血清α-淀粉酶含量的作用。30和50d時,試驗Ⅲ組與其他各組差異顯著(P<0.05),說明環磷酰胺對血清α-淀粉酶含量有顯著的增強作用。α-淀粉酶能催化水解直鏈淀粉,生成α-麥芽糖和葡萄糖[6-7],其含量的提高有利于機體更加充分地吸收營養物質。
堿性磷酸酶催化磷酸酯類化合物水解釋放磷酸,與骨骼的代謝密切相關[8-9]。本研究中除試驗Ⅲ組堿性磷酸酶含量先升高后降低外,其余各組均呈升高趨勢,這說明褪黑素具有升高堿性磷酸酶含量的作用,而環磷酰胺具有降低堿性磷酸酶含量的作用,二者共同作用時褪黑素的升高作用強于環磷酰胺的降低作用。
3.2 藥物脫絨對遼寧絨山羊血清激素水平的影響 促腎上腺皮質激素和皮質醇均屬應激激素,其水平高低反映機體的應激反應強度,過強的應激反應會對機體造成一定程度的損傷。50d時(脫毛時)的結果可以看出,埋植褪黑素試驗組Ⅰ和Ⅱ的促腎上腺皮質激素含量明顯降低,均低于對照組,尤其是試驗I組。表2中對照組皮質醇含量在3個時間點表現為先降低后升高的趨勢,而試驗Ⅰ和Ⅱ組均表現為先升高后降低的趨勢,試驗Ⅲ組則始終表現為升高的趨勢。綜上分析,埋植褪黑素可以在一定程度上緩解應激反應,包括采樣和脫毛過程的刺激所引起的應激。試驗Ⅲ組第3次采樣時,皮質醇濃度均較其他試驗組偏高,說明單純注射環磷酰胺可能會導致動物應激、刺激動物皮質醇的分泌,從而使其血清皮質醇濃度升高。因此,利用環磷酰胺作為脫毛劑,埋植褪黑素可以在一定程度上保護機體,降低應激反應帶來的損害。
表皮生長因子對皮膚的發生,結構功能的維持以及皮膚衍生物的發育與功能具有重要作用[10-11]。其對羊毛生長具有抑制作用,表現為低劑量時毛球稍微變小,纖維表皮層形成暫時性障礙;大劑量時毛囊退化,羊毛纖維根端扭曲變形,最后呈錐形脫落[12-13]。本研究中,試驗全期各組組間及組內差異不顯著,試驗Ⅰ和Ⅱ組(埋植褪黑素)呈降低趨勢,說明褪黑素具有降低表皮生長因子濃度的作用。試驗Ⅲ組略有升高,但變化不顯著,這可能是因為環磷酰胺具有脫毛作用,而高濃度的表皮生長因子對羊毛生長具有抑制作用,表現為羊毛纖維根端扭曲變形,最后呈錐形脫落[10-11]。
長日照時血液褪黑素濃度相對較低,短日照期間褪黑素升高[14-16]。本研究結果表明,遼寧絨山羊血液中褪黑素濃度受季節影響,從短日照向長日照過渡中,血液褪黑素濃度逐漸降低,埋植褪黑素可能會干擾此規律,試驗Ⅰ和Ⅱ組血清褪黑素濃度先維持在較高水平,然后略微降低但仍高于對照組,這是由于動物機體為維持體內激素系統平衡啟動了負反饋調控機制,使濃度維持在正常生理范圍之內,這與岳春旺等[17]的試驗結果一致。本研究中對照組與各試驗組褪黑素濃度呈下降趨勢,且各組組間差異不顯著,兩種藥物共同處理的試驗Ⅱ組的褪黑素含量下降程度高于褪黑素單獨處理的試驗Ⅰ組,這說明環磷酰胺具有降低血清褪黑素量的作用。
褪黑素、環磷酰胺單獨或者共同作用于遼寧絨山羊,可對絨山羊血清激素及酶產生一定的影響。埋植褪黑素可以在一定程度上降低利用環磷酰胺脫毛帶來的應激反應。
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