雌性激素受體與喉癌關系新進展

鄭實興 綜述，徐志文審校

（廣西醫科大學第一附屬醫院耳鼻咽喉頭頸外科，南寧 530021）

由于性激素的影響，男、女性在喉的發育上有較大差別，并且女性喉癌發病率顯著低于男性，這表明與性別有關的因素如性激素受體信號系統參與了喉癌的進展，雌激素受體（estrogen receptor，ER）作為轉錄因子在許多人類惡性腫瘤進展中扮演重要的角色。故ER與喉癌的關系備受關注。盡管之前性激素受體是否在喉癌組織中表達存在爭議，但近年來國內外學者的許多研究均表明，ER在喉癌中陽性表達，并且對ER與喉癌的關系進行了大量研究，取得了一定進展，在此，本文對ER在喉癌組織中的表達、與喉癌惡性程度的關系以及與對喉癌發展、診斷、治療的作用做一綜述。

1 ER在喉癌中的表達

早在50年前就有性激素受體與腫瘤有關的報道了。早期學者們主要用生化法檢測ER，然而由于腫瘤勻漿可能混有患者血清，生化方法不易確定性激素受體的來源，故生化法的檢測結果差異很大，存在爭議，而免疫化學法和細胞化學法則不存在這一弊端。陳濱等［1］應用原位雜交法對63例喉癌組織、20例癌旁正常組織和20例喉良性病變組織進行ER測定，發現ER在癌旁正常組織和喉良性病變組織中的表達均為陰性；在喉癌組織中ER的陽性表達率為69.8%。ER在喉癌組織中的表達與患者性別、臨床分型無關（均P＞0.05）。Bianchini等［2］對15例喉癌組織用免疫組化法檢測，特異的ER表達率為53.3%，癌組織性激素受體陽性率高于癌旁組織。楊艷和田鑫［3］用免疫組化法對45例喉鱗癌、30例癌旁組織和30例喉良性病變組織標本進行性激素檢測，結果ER在喉癌組織中的陽性，表達率為73.3%；而在癌旁組織及喉良性腫瘤中呈陰性表達。Lukits等［4］用免疫細胞化學法和PCR法在mRNA和分子水平證實大約50%喉癌組織中存在ERs（α和β）和孕激素受體（progestrogen receptor，PR），并且在喉腫瘤中性激素受體單獨表達是很少見的，多數是ER和PR聯合表達。進一步研究發現，正常的喉組織不表達ER－β，而喉癌組織高表達ER－β（83.8%），并且主要集中在癌細胞核［5］。但有些學者卻報道喉癌組織中ER含量很低。Hagedorn和Nerlich［6］結合免疫組化法和酶免疫測定，依照乳腺癌和前列腺癌受體陽性標準，在喉癌細胞中沒有檢測到免疫組化法特殊染色的ER，生化法也沒有測得足量的ER，故他們認為喉癌患者癌組織缺乏ER表達。作者認為以上研究所觀察到的受體含量有較大差異可能是參考標準不一樣和敏感度不同引起。從報道喉癌組織中表達ER的文獻中可以推測，由于正常喉組織不表達ER，而喉癌組織表達ER或許是癌變后獲得的，ER在癌變的過程中扮演重要的角色。

2 ER與喉癌惡性程度的關系

一些研究顯示ER與喉癌的病理分級、臨床分期、淋巴結轉移及預后的關系密切。陳濱等［1］和楊艷等［3］研究表明，ER隨喉癌病理分級、臨床分期的升高而減少，有淋巴結轉移者ER的表達率明顯低于無淋巴結轉移者。Bianchini等［2］用免疫組織化法實驗結果顯示，ER－α和PR陽性提示無淋巴結轉移，喉腫瘤黏膜ER陽性率高于癌旁組織。有學者應用免疫組化法檢測幾種喉病變組織中ER的分布，發現ER在不典型增生組織中僅20%陽性，在乳頭狀瘤中40%陽性，在喉癌中78%陽性，ER陰性者易發生頸淋巴結轉移，且術后5年存活率較ER陽性者低。Goulioumis等［5］等用免疫組化法研究表明，正常的喉組織不表達ER－β，而喉癌組織高表達ER－β（83.8%），ER－β表達與TNM分級呈負相關（P＝0.021）。臨床觀察在乳腺癌、卵巢癌、結腸癌組織中若存在 ER－β表達，預后則較好［7－8］。有學者對30例喉癌患者進行研究發現，所有ER陽性患者存活均在4年以上，ER陰性者有2例死于原發腫瘤；晚期聲門上型喉癌ER為陰性，認為ER可作為喉癌預后的指標。

綜上所述，ER的表達水平越高喉癌的病理分級越低、臨床分期越早，淋巴結轉移可能性越低，預后越好。ER可作為了解腫瘤的惡性程度和預后的標志。

3 ER與喉癌發生、發展的的關系

雌性激素與人類腫瘤的關系存在兩面性，即對腫瘤的發生、發展有促進作用或有抑制作用。這可解釋最近的研究發現——ER存在ER－α和ER－β兩個亞型，其在腫瘤形成中的作用恰恰相反［9］。進一步研究發現，在乳腺癌和婦科腫瘤中，活化的ER－α與腫瘤細胞的增殖、生長密切相關［10］，而ER－β的表達則能抑制腫瘤細胞的轉化和生長［11］。ER參與喉癌演變與發展的機制目前主要是ER信號傳導與 Wnt－連環蛋白β（βcatenin）通路中存在交叉點和ER調節表皮細胞生長因子（endothelial cell growth，ECGF）的表達進而調控喉癌的發展。

上皮－間充質轉化（epithelial－mesenchymal transition，EMT）是腫瘤惡性化的重要一步，細胞因子類，如 Wnt和TGF－β［12］，在EMT中起到重要的誘導作用，這一過程的重要特征就是鈣黏蛋白－E的減少和β－catenin向核內轉移。ERs在β－catenin和淋巴細胞增強因子LEF的轉錄過程中起到輔助因子的作用［13］，并能調節參與Wnt信號通路因子的表達［14］。這說明了在ER信號傳導與 Wnt－β－catenin通路中存在交叉點。Gouliounis等［5］發現ER－β的表達對維持喉癌組織上皮鈣黏蛋白－E和β－catenin有積極作用，并抑制β－catenin向核內轉移。先前也有學者在研究ER－β與卵巢癌關系時得出相似結論［15］。而細胞連接處的鈣黏蛋白－E減少和β－catenin向核內轉移是許多惡性腫瘤發展的關鍵步驟［16］，在喉癌進展的過程中也發揮重要作用［17－18］，ER－α能引起腫瘤的鈣黏連蛋白－E減少，而 ER－β恰能抑制ER－α這一效應［19］。這似乎表明ER－β可通過防止細胞連接處的鈣黏蛋白－E減少和β－catenin向核內轉移進而阻止EMT的誘導，從而阻止腫瘤向侵襲階段發展。

Lukits等［4］報道大約50%喉癌組織中存在ERs（α和β）和PR，并且在喉腫瘤中性激素受體單獨表達是很少見的，多數是ER和PR聯合表達。而ER和PR聯合表達被認為是功能性ER在癌組織中表達的一種間接征象［20］。ER信號肽與ECGF信號肽表達相關［21］，ECGF受體在腫瘤包括喉鱗癌發展中的作用已經被證實［22］。由此可見，ECGF在頭頸腫瘤中的持續表達可能控制ER和（或）PR的表達。由此可以猜測ER的表達可通過調節ECGF的表達調控喉癌的發展。

4 喉癌的抗雌激素治療

對于性激素依賴的腫瘤如乳腺癌、卵巢癌、結腸癌等使用內分泌治療效果較好。喉癌是否為性激素依賴性腫瘤還存在爭議，故是否使用內分泌治療各家保留不同意見。有學者在體外實驗中證實T（tamoxifen，TAM）能抑制ER陽性喉癌細胞的增殖，Robbins等［23］證實，ATM在喉癌的臨床治療中有一定效果，在用裸鼠的實驗中還發現雌激素有刺激喉細胞生長的作用，而ATM能抑制雌激素這一作用。Raspaglio等［24］研究發現黃酮類槲皮素（flavonoid quercetin，Q）和TAM誘導ECGF刺激生長的Hep2細胞系凋亡作用比無ECGF刺激生長的Hep2細胞系凋亡作用強。Hep2細胞系對ECGF有特異的高親和力［25］。Hep2細胞系表達雌激素－β結合位點，該位點與Q和TAM 結合后能抑制癌細胞生長［26］。Robbins等［23］發現TAM即使在2μmol／L也有顯著的抑制喉癌細胞生長的作用。有學者報道，在乳腺癌TAM似乎通過與細胞內的ER結合，阻止雌激素進入核內并阻止一系列的高分子合成和增殖。另有學者報道，在乳腺癌細胞，TAM與雌激素競爭ER，一些TAM的生物學效應也能被雌激素逆轉。因此，可以推斷雌激素和TAM能調節ER陽性的喉癌細胞的生長。

雌激素在靶細胞的細胞質內與ER結合，形成激素受體復合物，同時激素受體復合物與雌激素反應元件的特異DNA序列高親和力結合，從而引起一系列特異基因表達的改變，起到對靶細胞的分化發育和調節代謝作用，因此激素受體是激素發揮作用的主要介導物。研究表明，卵巢切除術致雌激素減少4周后，Wistar大鼠喉組織上皮下水腫、膨脹，纖毛和杯狀細胞減少［27］，這些恰恰是致癌的基礎。這表明雌激素或許能防止喉癌的發生，但沒有證據表明這些效應是通過黏膜上的ER直接起效還是間接起效。Hagedorn和Nerlich［6］認為，從病理生理的角度用TAM治療喉癌是不科學的，因為他們沒有觀察到ER，就不會有抗雌激素的治療效果。

盡管成功的激素療法不是完全依賴可探測的激素受體，如，Greene報道，在乳腺癌中，5%～10%的ER陰性的患者同樣對抗性激素治療敏感。并且，在已明確受體陽性時，有研究用動物實驗模型來確定這些受體時，發現人在某種生理狀態，受體沒有功能，不與核染色質結合，若生理狀態改變則受體功能恢復。這或許可以解釋這些研究的差異。不過，ER－β激動劑，雌激素替代物已經用于多種腫瘤（前列腺癌和乳腺癌）的化療。

5 結 語

ER與喉癌的關系受到人們越來越多的關注，ER在喉癌的表達已被很多學者證實，在腫瘤的初期或許可以通過控制ER－β的表達抑制腫瘤向惡性階段進展。ER的陽性表達可能與喉癌的惡性程度以及淋巴結轉移有關，對喉癌患者進行ER檢查或許能提示患者預后，以便給予ER陽性患者更具針對性的治療。對ER在ECGF信號通路、Wnt信號通路中的作用有待進一步研究，對以上信號通路的阻滯有望成為防治喉癌的新手段。

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