針刺對實驗性腦出血大鼠腦組織bFGF表達的影響

李丹，鄒偉，王瓏，孫曉偉，滕偉

(1.北京中醫藥大學第三附屬醫院，北京 100029;2.黑龍江中醫藥大學附屬第一醫院，黑龍江 哈爾濱 150040)

腦出血是常見病、多發病，是嚴重威脅著人類的生活質量和健康的一類疾病。本實驗的研究從針刺調控內源性神經營養因子表達，探討針刺促進神經修復的腦保護作用機制。本研究探討針刺對腦出血大鼠腦內bFGF蛋白表達的影響，將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗試劑

bFGF兔抗大鼠多克隆抗體(美國Santa Cruz公司);BCA蛋白定量試劑盒(碧云天);茴拉西坦(憶立福，山西亞寶藥業集團有限公司，50mg/片)。

1.2 實驗方法 實驗動物設備及方法參考本課題組前期研究成果［1］。

2 結果

由表1可見，各組大鼠腦內bFGF蛋白表達的Western印跡結果:空白組有少量表達。模型組在腦出血后6h表達量開始明顯增加，蛋白陽性信號持續增強，于3天達高峰，7天時仍有表達，與空白組比較，P＜0.01;針刺組各個時相點與模型組比較，具有統計學意義(P＜0.01);針刺組與西藥組比較，各個時相點具有統計學意義(P＜0.05)。

表1 各組大鼠不同時相點血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達相對含量比較(s)

表1 各組大鼠不同時相點血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達相對含量比較(s)

注:針刺組與模型組比較，▲P＜0.01;針刺組與西藥組比較，●P＜0.05;西藥組與模型組比較，#P＜0.05;模型組與空白組比較，★P＜0.01。

組別 n 6h 1天 2天 3天 7天空白組 6 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02 0.21 ±0.02模型組 30 0.27 ±0.02★ 0.31 ±0.02★ 0.38 ±0.02★ 0.48 ±0.02★ 0.33 ±0.02★西藥組 30 0.29 ±0.02 0.32 ±0.02 0.39 ±0.01 0.49 ±0.03 0.36 ±0.02#針刺組 30 0.31±0.02▲● 0.35 ±0.02▲● 0.46±0.04▲● 0.55±0.02▲● 0.39 ±0.02▲●

3 討論

bFGF是一種廣譜的有絲分裂原，具有廣泛的細胞增殖效應，它對廣泛的來源于中胚層和神經外胚層的細胞具有明顯的促增殖作用，其靶細胞有成纖維細胞、血管內皮細胞、神經元和膠質細胞等。bFGF是神經營養因子，可促進神經元的存活及突起生長，對神經起保護作用［2－3］。bFGF是一種具有多種生物活性的神經營養因子，它的基本生物學作用是促進細胞分裂增殖，可增強有絲分裂活性。bFGF可促進的神經元的存活及突起生長，對神經保護的作用。其與相關聯的受體結合導致廣泛的細胞反應，包括細胞增殖和分化、血管形成和抑制凋亡等。研究表明，bFGF在體內、外對多種神經元有維持生存和促進生長的作用，并能促進受損神經元的修復和再生。在培養的胎鼠海馬神經元中加入bFGF可使神經元成活時間增加和軸突延長［4］，bFGF及其受體FGFR濃度的變化調節著膠質細胞和神經元的生長［5］。正常腦組織中bFGF表達很少，腦組織缺血損傷后bFGF表達明顯增強。bFGF能改善血供，對抗缺血缺氧，減少腦水腫，促進成纖維細胞和神經細胞的分裂和增殖，促進新生血管和突觸形成，改善新生神經元突起的生長，有助于神經元抵御缺血性損傷;外源性給予bFGF可降低腦缺血后的腦梗死體積［6］。bFGF對早期神經細胞發育分化的影響主要表現在促使神經干細胞存活、增殖并分化［7］。

通過本實驗的研究發現，各組大鼠不同時間點血腫周圍腦組織bFGF蛋白表達的Western blot檢測結果:在腦出血后6h模型組表達量顯著增加，蛋白陽性信號增強，于3天達高峰，7天時仍有表達;針刺可上調腦出血后bFGF的水平，針刺組與模型組比較，具有統計學意義(P＜0.01);針刺組與西藥組比較，差異有統計學意義(P＜0.05)。通過實驗結果我們可以看到，在腦出血的過程中，針刺可能通過bFGF表達的增強，進而保護神經元，營養膠質細胞，從而實現了其促進神經修復的腦保護作用。而且bFGF與腦出血后的缺血性損傷、神經元的修復有密切關系［8］。綜上所述，“百會”透“曲鬢”針刺法可能通過促進腦出血后bFGF蛋白表水平，從而減輕神經元損傷并促進神經修復與再生。

［1］李丹，鄒偉，王瓏，等.針刺對實驗性腦出血急性期大鼠腦組織Nestin表達的影響［J］.中醫藥學報，2010，38(2):60－62.

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［3］李欣欣，戴德哉.堿性成纖維細胞生長因子對腦塊血的保護作用［J］.藥學進展，2003，27(1):103 －112.

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［5］Stachowiak EK，Fang X，Myers J，et al.CAMP － induced differentration of human neuronal progenitor cells is mediated by nuclear fibroblast growth factor receptor－1(FGFR －1)［J］.Neurochem，2003，84(6):1296－1312.

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［7］Levina E，Oren M，Ben － Ze＇ev A.Down regulation of β － catenin and p53 involves changes in the rate of β－catenin phosphorylation and Axin dynamics［J］.Oncogene，2004，23:4444 －4453.

［8］鄒偉，王瓏，孫曉偉，等.頭針透刺對腦出血大鼠腦組織IL－6表達影響的研究［J］.中醫藥學報，2012，40(1):81 －83.