氣相色譜-電子捕獲檢測器法測定異氟烷的含量

褚素霞，宋更申，郭毅(河北省食品藥品檢驗院，石家莊050011)

異氟烷(Isoflurane)是國內、外臨床上廣泛使用的高效、安全、穩定、低毒的吸入性全身麻醉劑[1]。現有文獻[2-4]報道中，均采用氫火焰離子化檢測器(FID)測定異氟烷的含量，但由于所選用溶劑在FID檢測器上均有較強響應，易對含量測定產生干擾。為此，筆者根據異氟烷分子結構中含有電負性的氟原子，參考相關文獻[5，6]，采用氣相色譜-電子捕獲檢測器(GC-ECD)法測定異氟烷的含量，所選溶劑環己烷在ECD檢測器上無響應，可有效避免溶劑對含量測定的干擾，同時靈敏度也有較大提高。

1 儀器與試藥

6890型氣相色譜儀、B.02.01-SR1工作站(美國Agilent公司)；BP 211 D型電子天平(德國Sartorius公司)。

異氟烷對照品(本院標定，批號:080011，含量:100.0%)；異氟烷(河北九派制藥有限公司，批號:080308、080101、080102)；環己烷(國藥集團化學試劑有限公司，色譜純)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:HP-INNOWax毛細管柱(60 m×0.53 mm，1 μm)；柱溫:75℃；檢測器:ECD檢測器；檢測器溫度:250℃；進樣方式:分流進樣，分流比1∶1；進樣口溫度:150℃；載氣:氮氣；流速:5 mL·min－1；進樣量:1μL。

2.2 溶液的制備

對照品溶液:稱取異氟烷對照品約100 mg，精密稱定，置于100 mL量瓶中，加環己烷稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

供試品溶液:稱取樣品約100 mg，精密稱定，置于100 mL量瓶中，加環己烷稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

陰性對照溶液:取環己烷適量，作為陰性對照溶液。

2.3 系統適用性試驗

精密量取“2.2”項下的對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液適量，按“2.1”項下的色譜條件進樣分析，記錄色譜，見圖1。

結果表明，理論板數以異氟烷峰計為18029，溶劑在此色譜條件下沒有吸收峰，不干擾異氟烷的測定。

2.4 線性關系考察

取異氟烷對照品適量，分別加環己烷溶解并稀釋制成每1 mL中含0.1002、0.2501、0.5006、1.008、1.201 mg的溶液，按“2.1”項下的色譜條件進樣分析。以異氟烷濃度(mg·mL－1，C)為橫坐標，異氟烷的峰面積為縱坐標(A)，繪制標準曲線，得回歸方程A＝291008.18C+403.22(r＝0.9999)。結果表明，異氟烷檢測濃度在0.1002～1.201 mg·mL－1范圍內與峰面積積分值呈良好的線性關系。

2.5 重復性試驗

取批號為080308的樣品適量，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，另取異氟烷對照品適量，按“2.2”項下方法制備對照品溶液，按“2.1”項下的色譜條件進樣分析，重復測定樣品6次。結果，平均含量為99.9%，RSD＝0.5%，表明該方法重復性良好。

2.6 中間精密度試驗

取批號為080308的樣品適量，由3名不同試驗者在不同時間、以不同儀器、采用不同色譜柱測定其含量。結果，RSD＝0.3%，表明本方法中間精密度良好。

2.7 穩定性試驗

取批號為080308的樣品適量，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、24 h進樣測定峰面積。結果，平均峰面積為29101.3，RSD＝0.5%，表明供試品溶液在24 h內穩定。

2.8 檢測限和定量限試驗

用逐步稀釋法進行測定，以信噪比約為3時計算檢出限，以信噪比約為10時計算定量限。結果，本品檢測限為0.10 pg，定量限為0.33 pg。

2.9 回收率試驗

精密稱取異氟烷對照品適量，分別置于100 mL量瓶中，用環己烷配制成測定濃度的80%、100%、120%的溶液，按“2.1”項下色譜條件進樣分析，計算回收率。結果，平均回收率為99.90%～100.00%，RSD＝0.10%(n＝9)，表明該方法回收率良好，詳見表1。

2.10 樣品含量測定

取3批樣品各適量，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，另取異氟烷對照品適量，按“2.2”項下方法制備對照品溶液，按“2.1”項下色譜條件進樣分析，并按外標法以峰面積計算異氟烷的含量，結果見表2。

表1 回收率試驗結果(n＝9)Tab 1Results of recovery tests(n＝9)

表2 樣品含量測定結果(n＝3)Tab 2 Results of content determination of sample(n＝3)

3 討論

3.1 色譜柱的選擇

HP-INNOWax是強極性毛細管柱，適用于酚、碳氫化合物、藥物及醇等，比較適合用于殘留溶劑分析。在該研究條件下異氟烷與溶解介質可達到有效分離，且峰形好，靈敏度高，重復性好，結果準確、可靠。

3.2 溶劑的選擇

本試驗采用環己烷作溶劑，環己烷在ECD檢測器上無響應，可有效避免溶劑及溶劑中的雜質對含量測定的干擾。

3.3 檢測器的選擇

由于異氟烷中含有氟原子，采用ECD檢測器測定含量，較文獻[2-4]采用的FID檢測器靈敏度有較大提高，可有效降低進樣量，提高分離度，避免超載。該方法也適合于測定異氟烷的有關物質。

3.4 該方法具有的優勢

異氟烷在本文建立的色譜條件下保留時間只有3 min，大大節約了分析時間，同時也降低了分析成本。

[1]宋更申，張毅，姜建國，等.毛細管氣相色譜法測定異氟烷中的有機溶劑殘留量[J].中國藥房，2010，21(17):1595.

[2]李寶林.氣相色譜法測定異氟烷含量[J].色譜，1994，12(6):453.

[3]劉明潔，胡德福，錢利民，等.氣相色譜法測定異氟烷的含量[J].藥物分析雜志，1998，18(3):196.

[4]張勇，錢廣生，劉三康，等.大口徑毛細管氣相色譜法測定異氟烷注射液含量及有關物質[J].四川大學學報(醫學版)，2006，37(1):153.

[5]宋更申，郭毅，付焱，等.毛細管氣相色譜法測定鹽酸美金剛原料藥中三氯甲烷的殘留量[J].中國藥房，2010，21(37):3536.

[6]宋更申，姜建國，劉紅莉，等.頂空氣相色譜法測定美羅培南中有機溶劑的殘留量[J].中國藥房，2010，21(5):447.