ACEI類藥物對糖尿病大鼠脂質(zhì)過氧化、內(nèi)皮素-1及血脂的影響

莊 志，端禮榮，朱燦宏

(1鎮(zhèn)江市第一人民醫(yī)院，江蘇鎮(zhèn)江212001;2江蘇大學基礎醫(yī)學與醫(yī)學技術(shù)學院)

研究發(fā)現(xiàn)，血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)除降血壓外還具有抗動脈粥樣硬化作用，并可減少糖尿病患者尿蛋白的排泄，故對糖尿病患者的腎臟損害有明顯的保護作用［1］。機體的抗氧化系統(tǒng)包含酶促體系和非酶促體系兩部分，超氧化物歧化酶(SOD)是酶促體系中最主要的抗氧化酶之一，丙二醛(MDA)是脂質(zhì)過氧化物之一。2011年3～10月，本研究利用四氧嘧啶誘導糖尿病動物模型，觀察ACEI類藥物治療后對糖尿病模型血脂、脂質(zhì)過氧化、NO和內(nèi)皮素-1(ET-1)的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康雄性Wistar大鼠50只(江蘇大學動物實驗中心提供)，體質(zhì)量160～180 g。四氧嘧啶(上海艾研生物科技有限公司，純度99.8%);洛汀新(北京諾華制藥有限公司);依那普利(上海現(xiàn)代制藥股份);卡托普利(北京同正生物技術(shù)公司);血糖儀(美國強生穩(wěn)豪血糖儀);7150自動生化分析儀(日本日立生化儀器公司);TC、TG試劑盒(北京萊幫生物技術(shù)有限公司);MDA及SOD活力測試盒由南京建成生物工程研究所提供;ET-1放免測定試劑盒(北京東亞放免研究所)。

1.2 動物模型建立 大鼠被隨機分為正常對照組、糖尿病模型組、洛汀新組、依那普利組和卡托普利治療組，每組10只。后4組大鼠腹腔注射四氧嘧啶(60 mg/kg)，72 h后用血糖儀測定大鼠血糖在16.8 mmol/L以上者，即為模型制備成功。(洛汀新、依那普利和卡托普利)治療組于造模成功后，第1天起即分別給予洛汀新、依那普利和卡托普利腹腔注射(5 mg/kg，1次/d，10周);正常對照組大鼠腹腔注射生理鹽水0.6 mL，10周;糖尿病模型組于造模成功后第1天起每日腹腔注射生理鹽水0.5 mL，10周。10周末抽取各組動物腹主動脈血測定TC、TG、NO、ET-1水平。

1.3 MDA和SOD含量的測定 大鼠處死后，立即取肝臟，生理鹽水清洗后，在冰浴中制成不同濃度的組織勻漿，BCA法測肝組織勻漿中蛋白的含量。用硫代巴比妥酸法測定肝組織MDA含量;比色法測定肝組織勻漿中SOD的水平。嚴格按試劑盒說明操作。

1.4 測定指標及方法 ①采用7150自動生化分析儀利用TC試劑盒和TG試劑盒測定血漿TC和TG水平。②用NO試劑盒(北京晶美試劑公司)根據(jù)還原酶比色法測定NO。③用放免測定試劑盒測定ET-1。

1.5 統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)以ˉx±s表示，采用SPSS 16.0軟件進行單因素方差分析，以P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 糖尿病大鼠體質(zhì)量的變化 給藥10周后糖尿病模型組大鼠體質(zhì)量［(269.84±9.15)g］低于正常對照組(P ＜0.01)，而洛汀新組［(319.48 ±5.71)g］、依那普利組［(322.03 ±5.79)g］和卡托普利組［(324.48±7.76)g］大鼠的體質(zhì)量低于正常對照組，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。與糖尿病模型組比較，洛汀新組、依那普利組和卡托普利組體質(zhì)量差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

2.2 糖尿病大鼠血漿中的TG、TC水平變化 見表1。

表1 各組大鼠血漿中的TG、TC水平變化(mg/L，ˉx±s)

2.3 各組大鼠NO、ET-1水平變化 見表2。

表2 各組大鼠NO、ET-1水平變化(ˉx±s)

2.4 糖尿病大鼠肝組織勻漿MDA和SOD含量變化 見表3。

表3 各組大鼠肝組織勻漿MDA和SOD的水平變化(ˉx±s)

3 討論

近年來研究表明，ACEI類藥物對糖尿病腎病患者腎臟有保護作用，但其機制尚不十分明確。除了改善糖尿病腎小球血流動力學，降低腎小球內(nèi)高壓外，還存在非血流動力學機制。近來一些基礎研究提示，ACEI可通過抑制腎組織局部血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的形成或阻斷AngⅡ的作用，從而降低AngⅡ誘導多種細胞因子如TGF-β1、內(nèi)皮生長因子和內(nèi)皮素等的表達、合成和釋放等。我們采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型［2］，四氧嘧啶對動物的胰腺B細胞具有直接的毒性作用，可使B細胞數(shù)量減少和胰島素釋放功能減弱或消失，結(jié)果大鼠血糖明顯升高并出現(xiàn)糖尿病癥狀。同時伴有血管粥樣硬化及腎臟損害等并發(fā)癥，這與脂質(zhì)代謝紊亂有一定關(guān)系［3，4］。TG、TC、ET-1 及 NO 水平變化能引起血管內(nèi)皮細胞功能的改變［5，6］。糖尿病患者體內(nèi)的SOD降低是因為機體清除氧自由基而消耗，過氧化脂質(zhì)明顯升高是由于體內(nèi)脂質(zhì)過氧化作用發(fā)生不飽和脂酸、肪酸共價鍵上的一系列自由基反應所致［7］。肝臟脂質(zhì)的過度氧化產(chǎn)生的氧自由基可破壞細胞器、激發(fā)信號轉(zhuǎn)導通路導致微細胞結(jié)構(gòu)損傷，并且機體存在氧化和抗氧化的失衡，自由基在體內(nèi)蓄積，損害機體，促使生理周期老化。本研究應用ACEI類藥物對糖尿病大鼠進行治療，結(jié)果表明ACEI類藥物具有降血脂、恢復血漿NO的作用，還發(fā)現(xiàn)ACEI類藥物能調(diào)節(jié)糖尿病大鼠體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物的動態(tài)平衡。提示ACEI類藥物對血管內(nèi)皮功能具有一定的保護作用，其機制可能是降低血漿中的TG、TC，調(diào)節(jié)ET-1和NO的平衡，提高機體自由基清除能力。因此ACEI可在臨床上作為糖尿病患者治療的輔助協(xié)同用藥，但是否具有協(xié)同作用尚需進一步觀察。

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