銀杏達莫對大鼠蛛網膜下腔出血后癥狀性腦血管痙攣的影響

張 揚 張曉娜 韓志國 朱曉波 (吉林大學第一醫院神經外科，吉林 長春 300)

癥狀性腦血管痙攣(SCV)是指自發性蛛網膜下腔出血(SAH)引起的腦血管痙攣，是SAH后嚴重的并發癥之一，對患者臨床經過和預后具有重大影響。血管痙攣也是SAH病人致死、致殘的主要原因，本文觀察銀杏達莫對大鼠SAH后SCV的臨床效果。

1 材料與方法

1.1 實驗分組 將80只大鼠雙側頸總動脈結扎后，將很快死亡和出現嚴重神經功能缺損的23只大鼠排除本實驗。將無癥狀和輕微神經功能缺損的57只大鼠在結扎頸總動脈后隨機分為三組:假手術組，SAH組，SAH+銀杏達莫組。

1.2 方法

1.2.1 動物模型的制備 參照Roux等〔1〕的方法制備大鼠SAH模型。10%水合氯醛(400 mg/kg)腹腔注射麻醉后，大鼠頭部及左側股動脈區備皮，常規消毒鋪巾;大鼠仰臥位，手術顯微鏡下暴露左側股動脈備用;然后改俯臥位，取枕外隆凸以下約2.0 cm正中直切口，暴露枕骨、環椎及環枕膜，用5 ml注射器針頭刺破環枕膜并稍稍推進到達枕大池;有腦脊液流出后，用1 ml注射器抽取股動脈血0.3 ml，在2 min之內注入枕大池;注血后環枕膜穿刺處填塞可吸收性明膠海綿一塊，俯臥位頭低30°約30 min，以利血液沉積在腦底血管周圍，縫合頭部及股部切口。48 h后同法抽取右側股動脈血0.3 ml注入枕大池，制成大鼠SAH動物模型。假手術組兩次均注入0.3ml生理鹽水。

1.2.2 給藥方式 SAH+銀杏達莫組大鼠在第一次注血后30 min經靜脈給0.4 ml/kg體重銀杏達莫(用生理鹽水稀釋)，此后每日按同樣的方式分別給藥至SAH第4天實驗結束。每次注藥時間為10 min。假手術組，SAH組大鼠以同樣的方式分別經靜脈給予同量的生理鹽水。

1.2.3 神經癥狀的觀察 神經功能缺損癥狀通過觀察大鼠的

運動功能進行分級描述。采用1998年Endo神經癥狀分級法:1級，無神經功能缺損;2級，輕微或者可疑神經功能缺損;3級，輕度神經功能缺損，不伴有異常運動;4級，嚴重神經功能缺損，伴有異常運動。

1.2.4 血液流變學檢查 用一次性2 ml注射器采頸靜脈血2 ml注入含1.019 mol/L的枸櫞酸鈉抗凝無菌試管內，用日本SysmexCA-500全自動血凝分析儀處理標本，取樣、檢測及結果打印均自動完成。各組在實驗結束時采血。

1.2.5 基底動脈形態學檢查 每組各取8只，取出基底動脈后立即放入預冷的2.5%戊二醛磷酸緩沖液中固定，并且用1%鋨酸磷酸緩沖液后固定。丙酮酸逐級脫水，環氧樹脂包埋，半薄切片，次甲基藍天青Ⅱ染色光鏡下觀察并定位，超薄切片機切片，用枸櫞酸鉛和醋酸鈾雙重電子染色，在H-600透射電鏡下觀察。

1.3 統計學方法 應用SPSS統計軟件進行分析，數據資料以±s表示，組內計數資料采用方差分析，組間比較采用兩樣本均數的t檢驗。

2 結果

2.1 大體觀察 SAH后第4天取腦組織，血液分布于腦底，以橋腦前池和基底池量最多，有血塊形成，腦底池呈暗紅色。

2.2 神經功能缺損觀察 假手術組神經功能缺損分級13只為1級，6只為2級;其余兩組在向蛛網膜下腔注血前每組分別有13只為1級，6只為2級。在SAH后第3天SAH組2級4只，3級12只，4級3只;SAH+銀杏達莫組分別為10只、7只、2只。SAH組在SAH后第4天最為嚴重，其中6只為4級，10只為3級，3只為2級，SAH+銀杏達莫組在SAH第0～4天神經功能缺損癥狀較SAH組，第4天有3只表現為4級，8只表現為3級，8只表現為2級。

2.3 各組血液流變學變化 SAH組全血比黏度與其他兩組比較顯著增高(P＜0.01)。SAH組血漿比黏度與假手術組顯著增高(P＜0.01)，與SAH+銀杏達莫組比較，其血漿比黏度明顯增高(P＜0.05)。SAH組纖維蛋白原(Fbg)含量與假手術組相比顯著增高(P＜0.01)，與SAH+銀杏達莫組比較明顯增高(P＜0.05)。見表1。

2.4 基底動脈形態學觀察 SAH+銀杏達莫組與SAH組可見細胞質內空泡，內皮細胞腫脹，內彈力膜皺折;且SAH組還可見內皮細胞脫落。假手術組未見明顯變化。見圖1，圖2。

表1 各組血液流變學變化(±s，n=14)

表1 各組血液流變學變化(±s，n=14)

與假手術組比較:1)P＜0.05;與SAH+銀杏達莫組比較:2)P＜0.05

組別 全血比黏度(ηb)(Mpa·s)血漿比黏度(ηp，Mpa·s)纖維蛋白原(FbG，g/L)假手術組3.95±0.29 1.53±0.09 3.15±0.60 SAH 組 8.34±0.461) 1.89±0.151)2)5.05±0.621)2)SAH+銀杏達莫組 5.89±0.471)1.53±0.06 3.32±0.44

圖1 光鏡下各組基底動脈形態學觀察(×400)

圖2 電鏡下各組基底動脈形態學改變

3 討論

銀杏達莫具有良好的藥物作用:①調節血流動力學:擴張動脈血管，降低血管壁通透性，改善水腫;②血液流變學的改善:降低缺血黏度、抑制血小板和紅細胞的高聚集性、增加紅細胞的變形性;③改善組織代謝:穩定細胞膜、維持正常的細胞結構和功能;④神經保護作用:直接保護神經元，加強神經傳導、加快神經遞質的更新。

研究證明〔2〕，銀杏達莫可以增加紅細胞變形能力和攜氧能力，從而改善缺血細胞的氧供，促進大腦循環、代謝，改善記憶功能;銀杏內酯特異性拮抗血小板活化因子，抑制血小板的活化與聚集，降低血液黏度;雙嘧達莫雙重阻斷血小板聚集，抑制中性粒細胞的趨化和聚集，增加缺血區的血流灌注;銀杏黃酮甙與銀杏內酯雙向調節血管張力，糾正病理性毛細血管高滲透性，可清除自由基，保護血管內皮細胞，提高超氧化物歧化酶的活性，拮抗內皮素，抑制毛細血管通透性，抑制炎癥與過敏反應，從而保護腦組織，改善腦缺血;白果內酯直接保護神經細胞，抑制自由基誘導的神經細胞凋亡，加強神經傳導，加快神經遞質更新，促進神經功能的回復。

銀杏達莫內的各種有效成分決定了其具有多方面生物效能〔3〕，可糾正病理性毛細血管的高滲性，雙向調節血管張力，減輕血管源性及細胞性腦水腫;抗血小板活化因子，減少血小板的高聚集性;改善細胞能量代謝及末梢血液循環;清除自由基，保護細胞膜，直接保護神經元;增加毒蕈堿型膽堿能受體密度，對抗興奮性氨基酸的神經毒性作用，從而減輕或改善腦缺血、缺氧及腦水腫的發生發展，改善腦組織的血氧供應，減輕病損程度，促進病變區神經功能恢復和臨床癥狀好轉。本文證實其有效率高，顯效率顯著，且無明顯毒副作用，安全性高，故值得臨床應用。

1 Roux S，Lofflor BM，Gray GA，et al.The role of endothelin in experimental cerebral vasospasm〔J〕.Neurosurgery，1995;37(1):78-85.

2 蔡 鴻，桂薌湘，向道康，等.杏丁與金納多對急性腦梗死患者血液流變學影響的臨床研究〔J〕.浙江中西醫結合雜志，2002;12(8):484-5.

3 王筠默.銀杏的藥理研究〔J〕.中草藥，1999;29(2):9-10.