缺血性腦卒中患者血漿LPA和LP-PLA2水平檢測及意義

(聊城市第三人民醫院，山東聊城 252000)

近年來，腦血管疾病發病率逐年升高，且發病年齡呈現年輕化趨勢，缺血性腦卒中占腦血管疾病的60% ～80%，其致殘率和死亡率均較高，與心臟病、惡性腫瘤構成人類的三大致死病因。2011年4月～2012年1月，我們檢測了缺血性腦卒中患者血漿溶血磷脂酸(LPA)和脂蛋白相關性磷脂酶A2(LPPLA2)水平變化，探討早期檢測兩指標對缺血性腦卒中的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 126例我院同期收治的缺血性腦卒中患者，診斷均符合全國第四屆腦血管病會議標準，且經頭顱CT或MRI確診。排除出血性卒中、梗死后腦出血、合并有冠心病、周圍血管性疾病的腦梗死以及服用降血脂藥的患者。所有患者按照臨床診斷分為兩組。急性腦梗死(ACI)65例(急性組)，男34例，女31例;年齡46～72(63.7±7.6)歲，臨床有明顯的體征，發病均在72 h內。按美國國立衛生研究所中風量表(NIHSS評分)，神經功能缺損程度為輕度(＜5分)23例，中度(5～15分)20例，重度(＞15分)22例。短暫性腦缺血(TIA)61例(短暫組)，男31例，女30例;年齡43 ～68(65.8 ±6.9)歲，臨床有明顯的TIA體征，持續數分鐘或數小時，24 h內恢復完全。另選同期我院健康查體中心中老年體檢者60例作為對照組，男32例，女28例;年齡42～74(61.9±7.4)歲，既往無腦血管病病史，經頭顱CT或MRI證實無卒中。

1.2 LPA、LP-PLA2水平檢測 各組分別空腹取肘靜脈血4 mL，注入肝素抗凝管，充分混勻，標本采集30 min內于2～8℃離心15 min(3 000 r/min)，分離血漿，將標本統一編號放于－80℃保存。為減少批間誤差和測量誤差，全部標本采集完成后一次性成批檢測。LPA測定:采用無機磷定量法。LPA測定試劑購自北京泰福仕科技開發公司，嚴格按試劑說明書操作。所有患者清晨空腹抽取靜脈血4 mL，置于抗凝管中，4 000 r/min離心10 min，準確吸取上清液1 mL，抽提磷脂成分，過濾濃縮分離，加入顯色劑，在90℃水浴放置90 min，然后取出在室溫下放置35 min后，用722型分光光度計于636 nm比色測定。LP-PLA2測定:LP-PLA2試劑購自美國ADL公司，嚴格按試劑說明書操作。采用固相夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，已知LP-PLA2濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將PLA2和生物素標記的抗體同時溫育，洗滌后，加入親和標記過的HRP，在經過溫育和洗滌，去除為結合的酶結合物，然后加入底物A、B，與酶結合物同時作用，產生顏色，顏色的深淺和樣品中PLA2的活性濃度呈比例關系。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件。計量資料以±s表示，兩組間比較采用兩獨立t檢驗，多組比較采用單因素的方差分析(F檢驗)，其中兩兩比較采用SNK-q檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血漿LPA和LP-PLA2水平比較 見表1。

表1 各組血漿LPA和LP-PLA2水平比較(±s)

表1 各組血漿LPA和LP-PLA2水平比較(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.01;與短暫組比較，△P ＜0.01

組別 n LPA(μmmol/L) LP-PLA2(μg/L)急性組 65 3.881±1.250＊△ 16.420±6.351*短暫組 60 4.722 ±1.215* 14.355 ±5.917*對照組60 1.923 ±0.872 7.653 ±2.941

2.2 不同神經功能缺損患者血漿LPA和LP-PLA2水平比較 見表2。

表2 不同神經功能缺損患者血漿LPA和 LP-PLA2 水平比較(±s)

表2 不同神經功能缺損患者血漿LPA和 LP-PLA2 水平比較(±s)

注:與重度者比較，*P ＜0.01

神經功能缺損 n LPA(μmmol/L) LP-PLA2(μg/L)輕度 23 3.651 ±1.212* 14.150 ±5.762*中度 20 3.690 ±1.195* 15.923 ±5.991*重度22 5.694 ±1.363 26.036 ±7.135

3 討論

LPA及LP-PLA2是近年來被廣泛關注的與動脈粥樣硬化(AS)和缺血性心腦血管病密切相關的分子家族，特別是它們在啟動AS與缺血性心腦血管病中的重要作用以及潛在的臨床應用價值，引起臨床的極大關注［1］，LPA和LP-PLA2已作為標示缺血性心腦血管病的新的預警標志物。LPA是磷脂中的一種小分子物質，為磷脂生物合成早期階段的關鍵性前體，在體內信號傳遞中起重要作用，被稱為多功能“磷脂信使”。正常人血漿中LPA濃度很低，甚至檢測不到，血漿中LPA明顯增高反映血小板活化凝血過程開始，預示有形成血栓的可能。本研究急性組和短暫組血漿LPA水平高于對照組，且短暫組血漿LPA水平高于腦梗死組，其原因可能是TIA患者抽血時均處于微小血栓形成時期，而腦梗死患者取血時腦血栓形成已有一段時間，血栓形成趨于穩定，血小板產生LPA釋放到血漿中的濃度開始下降。近年研究發現，LPA可從多方面促進AS和血栓形成。在凝血的過程中，活化的血小板產生LPA，LPA可進一步促進血小板聚集。AS斑塊中LPA位于脂質核心，易致血栓脫落后形成栓子［2］。LPA可導致第二強的收縮血管物質—內皮素(ET-1)的釋放，在腦血管痙攣中起重要作用。ACI患者血漿LPA水平與病程、病灶部位有關［3］。在腦血栓形成的最早期，血小板被活化產生并釋放LPA，而LPA是腦血栓形成最早期所產生釋放的分子標記物，因此可作為缺血性腦卒中的預測指標。

AS是ACI主要的病理基礎，炎癥反應參與了AS發生的各個環節，在動脈粥樣斑塊形成的起始、發展以及穩定性喪失和斑塊破裂脫落中均起著重要的作用，貫穿其發生、發展整個過程［4］，慢性炎癥被認為能增加心腦血管缺血性卒中風險。LP-PLA2可促進氧化低密度脂蛋白的生成并促進AS的形成，是存在于血漿中的一種危險因子。LP-PLA2主要由單核巨噬細胞合成并分泌［5］，人體循環中的 LPPLA2以與脂蛋白顆粒結合的形式存在，其中2/3與LDL結合，1/3與HDL結合。LP-PLA2代謝活性復雜，既可水解血小板活化因子，還能水解LDL上的氧化卵磷脂，生成炎性介質溶血卵磷脂和氧化游離脂肪酸，二者能損傷血管內皮細胞，引起單核細胞侵潤，分化為巨噬細胞進行清除反應形成泡沫細胞，壞死的泡沫細胞聚集成AS斑塊，而LP-PLA2能增加斑塊的易損性和促進斑塊破裂［6］，導致血栓形成和缺血事件發生。腦梗死患者中60% ～80%與As有關，國外研究發現LP-PLA2活性是AS新的炎癥反應標志物，同時又是AS影響因素的補充因子［7］;安學林等［8］研究表明，LP-PLA2在AS的形成過程中起著重要作用。本研究急性組和短暫組LP-PLA2水平明顯高于對照組，提示血漿LP-PLA2水平與缺血性腦卒中的發生密切相關，作為一種炎性介質，可以獨立預測缺血性腦卒中的發生［9］。本研究還發現，急性組輕度及中度患者LPA、LP-PLA2水平明顯低于重度患者，提示患者病情的嚴重程度與梗死的不同神經功能區有關，又與梗死灶體積的大小有關。梁江紅等［10］研究表明，LP-PLA2與梗死體積無相關性，對相關機制有待進一步探討。因此，測定血漿LPA和LP-PLA2水平可作為判斷病情嚴重程度的指標之一。

總之，血漿LPA和LP-PLA2與缺血性腦卒中的發生密切相關，可作為缺血性腦卒中高危人群的預警指標，可以判斷病情嚴重程度，為臨床使用抗血小板治療和抗腦血栓治療提供客觀根據。

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