HPLC－MS／MS法測定茶葉中滅多威、除蟲脲和殺螟丹的殘留量

蔡亞萍

（福州市工業產品生產許可證審查技術中心，福建 福州 350000）

滅多威為氨基甲酸酯類內吸型廣譜殺蟲劑，其穩定性較差，尤其在通風、日光或較高溫度下會迅速分解；滅多威代謝物為滅多威肟，化學分子式為C3H7NOS，相對分子量為105，其穩定性比較高［1－2］。除蟲脲的化學分子式為 C14H9ClF2N2O2，是屬于苯甲酰脲類農藥，能夠抑制昆蟲幾丁質合成，使昆蟲變態受阻，不能蛻皮而致死［3］。殺螟丹化學名稱為1，3－二－ （氨基甲酰硫）－2－二甲基氨基丙烷，是殺蠶毒素類殺蟲劑，具有內吸、胃毒、觸殺等多種作用，效果迅速，持效期長，殺蟲譜廣，對鞘翅目、半翅目、直翅目、薊馬等害蟲均有很好的防治效果［4－5］。隨著人們對食品中農藥殘留的意識也逐漸加強，農藥殘留的監測也日益受到重視。我國關于茶葉中滅多威的殘留量限量是3 mg／kg，除蟲脲的限量是20mg／kg，殺螟丹的限量是20mg／kg。

目前在土壤、蔬菜和水果等基質比較簡單的樣品中對滅多威、除蟲脲和殺螟丹的殘留分析較多，而相對于基質比較復雜的茶葉中對滅多威、除蟲脲和殺螟丹的殘留分析方法報道較少［6－19］。本研究采用HPLC－MS／MS法對茶葉中滅多威、除蟲脲和殺螟丹的殘留進行分析，該方法具有快速、簡便、靈敏、準確等優點，并在實際樣品檢測應用中結果良好，能滿足日常茶葉中有機磷農藥殘留的分析測定要求。

1 材料與方法

1．1 儀器與試劑

試驗采用Agilent1200LC／6410MS色譜－串聯四級桿質譜聯用儀。所用試劑均為色譜純，水為超純水。滅多威、除蟲脲和殺螟丹混合標準工作溶液（1μg／mL）：分別準確稱取1．0010g、1．0013g和1．0027g，用甲醇溶解定容10mL，再分別準確量取10μL置于10mL容量瓶中，用甲醇定容，得到1μg／mL混合標準工作溶液，置于冰箱于4℃下保存。

1．2 色譜－質譜條件

色譜條件：Agilengt Zorbax XDB C18色譜柱（2．1mm×50mm，3．5μm）；流動相：乙腈－1‰甲酸水，流速：200μL／min，進樣量10μL。

質譜條件：滅多威、殺螟丹以電噴霧 （ESI）正離子電離模式；除蟲脲以負離子模式電離。電噴霧電壓4000V；干燥氣 （氮氣）溫度350℃，流量9．00L／min；霧化氣 （氮氣）壓力275．8kPa；多反應監測 （MRM）模式檢測，質譜分析參數見表1。

1．3 試驗方法

稱取粉碎茶樣約5g于50mL具塞三角瓶中，加25mL乙腈提取液，于 （43±2）℃的震蕩器中震蕩提取45min，冷卻后轉移至具塞試管或離心管靜置澄清。以5mL乙腈＋甲苯 （3∶1）預洗Cleanet TPT小柱，棄去淋洗液。加入2mL提取液，用25mL乙腈＋甲苯 （3∶1）洗脫液洗脫，KD瓶收集以上洗脫液。于45℃水浴上氮吹至干，加2mL甲醇溶解，過0．2μm濾膜，上機檢測。

表1 滅多威、除蟲脲和殺螟丹的質譜分析參數

2 結果與討論

2．1 萃取溶劑的選擇

滅多威、除蟲脲和殺螟丹均屬于有機磷類農藥。乙腈對極性物質的提取效率比較好，從基體中提取的共提干擾物較少，相對于乙酸乙酯和正己烷等萃取溶劑來說，選用乙腈作為萃取溶劑，對滅多威、除蟲脲和殺螟丹的提取效率較為理想。

2．2 凈化條件的選擇

對于茶葉樣品，考慮到樣品的極性及提取液中色素等大量復雜成分的存在，試驗選用了Cleanet TPT小柱，以進一步除去樣品中的復雜干擾物質，達到較好的凈化效果。使用不同比例的乙腈、甲苯混合溶液作為洗脫溶劑時，當乙腈、甲苯比例為3∶1能達到最好的洗脫效果，因此選擇乙腈＋甲苯（3∶1）溶液為洗脫液。

2．3 儀器條件的選擇

2．3．1 液相色譜條件的選擇 為了能更好實現3種農藥的同步分離，對色譜方法的流動相做了優化。對比了乙腈＋甲酸水溶液、甲醇＋乙酸銨水溶液、甲醇＋甲酸水溶液、乙腈＋乙酸銨水溶液等4種流動相的色譜效果。試驗表明，用乙腈－1‰甲酸水進行梯度洗脫時，能達到較好分離效果。最終優化的儀器條件為：色譜柱C18柱， （3．5μm，50mm×2．1mm）；流動相： （A）1‰ 甲酸水溶液， （B）乙腈 （表2）；柱溫：30℃；流速：200 μL／min；進樣量10μL。

2．3．2質譜條件的選擇 滅多威、殺螟丹以電噴霧（ESI）正離子電離模式，除蟲脲以負離子模式電離，實現3種農藥的定性定量分析。

2．4 標準曲線和檢出限

在儀器工作條件下對滅多威、除蟲脲和殺螟丹混合標準溶液系列進行測定，以標準物質的質量濃度對其峰面積進行線性回歸，結果 （表3）表明：3種農藥的質量濃度在0．1～10μg／mL范圍內呈線性。

2．5 方法的回收率

取6份茶葉各5．00g，分別加入適量的滅多威、除蟲脲和殺螟丹混合標準溶液，按試驗方法處理后測定滅多威、除蟲脲和殺螟丹的含量，結果見表4。

表3 回收試驗結果 （n＝6）

表4 回收試驗結果 （n＝6）

3 小結

本試驗建立了HPLC－MS／MS檢測茶葉中的滅多威、除蟲脲和殺螟丹的方法，采用乙腈－1‰甲酸水作為流動相，進行梯度洗脫，方法重現性好，操作簡便，并且靈敏度、準確度、精密度均符合農藥殘留技術測定要求，適用于茶葉的日常檢測。

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