大理地區豬源甲型、乙型、戊型肝炎病毒血清流行病學調查＊

李麗娟 申元英、△ 艾志瓊 王濤 張文 李東 段彪

（1.大理學院公共衛生學院，云南 大理671000；2.大理學院基礎醫學院，云南 大理671000）

病毒性肝炎是嚴重威脅人類健康的一類疾病，一直以來都受到研究者的重視。隨著研究的不斷深人，新的病毒不斷被發現。迄今，已確定的有7種肝炎病毒，即甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、丁型肝炎病毒（HDV）、戊型肝炎病毒（HEV）、庚型肝炎病毒（HGV）、輸血傳播的病毒（TTV）等。由于各型肝炎病毒之間病毒的生物學特性不同，傳播方式不同，病毒感染后無交叉免疫，因而同一個體可以感染兩種或兩種以上肝炎病毒，這種現象稱為病毒性肝炎多重感染。本文將探討與人類接觸密切的豬體內甲肝、乙肝、戊肝的感染情況。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象

以大理市屠宰生豬為研究對象，于2011年5～7月于大理市屠宰場采集屠宰生豬血197份，逐一編號，其中甲肝戊肝檢測所用標本為1－178號標本，乙肝檢測所用標本為1－197號標本。

1.1.2 試劑

抗－HAV IgM（批號：20110401）和抗－HAV IgG（批號：20110403）購自濰坊三維生物工程集團有限公司；HBsAg（批號：01009051）、HBsAb（批 號：201011021）、HBeAg（批 號：201011021）、HBeAb（批 號：201011021）、HBcAb（批 號：201011011）均購自上海科華生物工程公司；抗－HEV IgM（批號：EG20110402）和抗－HEV IgG（批號：EG20110402）購自北京萬泰生物藥業股份有限公司。

1.1.3 儀器

微量移液器（Eppenddorf公司，德國），酶標儀（Elx800，美國）。

1.2 方法

無菌采集大理市屠宰生豬全血197份，分離血清，－20℃保存備用；采用酶聯免疫吸附實驗（ELISA）方法對甲型、乙型和戊型肝炎病毒感染學指標，即抗－HAV IgM、抗－HAV IgG、乙型感染“二對半”和抗－HEV IgM、抗－HEV IgG進行檢測，操作嚴格按照試劑盒說明書進行，結果按試劑盒說明書進行判斷。

2 結果

2.1 甲肝檢測結果

甲肝、戊肝檢測標本有178份，其結果如表1所示。

表1 甲肝病毒、戊肝病毒檢測結果

2.2 乙肝檢測結果

乙肝檢測標本數197份，其檢測結果如表2所示。

2.3 戊肝檢測結果

檢出戊肝血清標志物總陽性數42份，陽性率為23.6%（42／178），其中HEV－lgG陽性血清有31份，所占比例為17.4%（42／178）；HEV－lgM陽性血清有11份，所占比例為6.2%（11／178）；lgG和lgM 同時陽性的標本有0份。

表2 乙肝病毒檢測結果

2.4 三種嗜肝病毒重疊感染情況

1－178號標本，均有肝炎病毒的感染，其中HAV、HBV、HEV單獨感染率分別為3.4% （6／178）、4.5% （8／178）、0；HAV和 HBV 二重感染率為67.97%（121／178）；HAV、HBV和HEV三重感染率為20.2%（36／178）；HAV和HEV二重感染率為1.7%（3／178）；HBV 和 HEV 二重感染率為2.2%（4／178），見圖1。

圖1 三種嗜肝病毒感染情況

3 討論

血清抗體lgM出現早，消失快，是新近感染的重要指標。抗體lgG在血中持續存在的時間可達數年，lgG的檢測主要用于了解既往感染史或進行流行病學調查。本實驗甲肝血清標志物陽性率為91%，提示可能有91%的屠宰豬感染或既往感染過HAV。由于本次實驗所用試劑盒為人用試劑盒，尚不能確定引起試劑盒反應的是否為豬體內的甲肝病毒所致。查文獻也未見相關文獻報道。本實驗首次在豬體內檢測HAV免疫學標志物，且檢出率頗高。其具體原因有待于進一步的病原學和分子生物學的研究。

Meng［1］曾在不同月齡的豬血清中檢測出了HEV RNA，李文貴等［2］應用RT－PCR方法從屠宰豬肝中擴增出了 HEV RNA，證實了豬體內確實存在HEV的感染。韋獻飛等［3］對廣西地區豬戊型肝炎病毒感染血清學分析結果表明，豬血清抗－HEV IgG陽性率為26.40%（66／250）。李文貴等［4］對云南省豬戊型肝炎血清流行病學調查結果表明，屠宰豬的HEV抗體陽性率高達68.9%。本研究HEV抗體陽性率為23.6%（42／178），與韋獻飛報道相符，與李文貴等、秦毅斌等［5］報道存在差異。

HBsAg是乙型肝炎的早期診斷最重要的指標，HBeAg是目前臨床上評價HBV復制的較敏感、穩定、可靠的指標［6］。本實驗檢測結果為HBsAg陽性標本2例，HBeAg陽性標本3例，說明有2.5%（5／197）的屠宰豬體內存在 HBV 的復制。HBsAb是HBsAg刺激機體產生的特異性中和抗體，保護性抗體，其出現表示機體對乙肝已產生免疫力。本實驗HBsAb陽性率為50.3%（99／197），表明50.3%的屠宰豬經自然感染HBV后產生了免疫力。傅妹伢等［7］曾對大理屠宰豬HBV流行病學檢測，結果表明豬HBV感染流行率為59.1%，本實驗研究結果可能是不同來源的豬，其感染情況不同，具體原因有待進一步調查。

本研究發現，三種肝炎病毒的血清標志物均有檢出，尤其是甲肝、乙肝血清標志物檢出率頗高，這是很值得注意的問題。因為從公共衛生的角度來看，屠宰豬已經進入到了豬肉品生產鏈的末端。雖然未見從豬肉中檢測到HAV、HBV、HEV的報道，但豬血清標志物陽性檢出率如此之高，可能會對人類健康構成潛在的威脅。

1 Meng XJ.Hepatitis E virus：cross－species infection and zoo－notic risk［J］.Clin Microbiol New，2005，27（6）：43－48.

2 李文貴，佘銳萍，韋海濤，等.屠宰豬肝和血清中乙型肝炎病毒及戊型肝炎病毒的檢測［J］.中國獸醫科學，2007，37（11）：921－925.

3 韋獻飛，梁靖瑞，唐榮蘭，等.廣西地區豬、鼠、狗戊型肝炎病毒感染血清學分析［J］.中國公共衛生，2007，23（2）：228－229.

4 李文貴，李精華，楊貴樹，等.云南省豬戊型肝炎血清流行病學調查［J］.云南農業大學學報，2009，26（4）：917－919.

5 秦毅斌，趙武，肖愛歡，等.廣西豬戊型肝炎血清流行病學調查［J］.廣西農業科學，2010，41（4）：383－385.

6 王建軍，成軍.乙型肝炎病毒e抗原的生物學作用［J］.胃腸病學和肝病學雜志，2004，13（1）：76－77.

7 傅妹伢，申元英，艾志瓊，等.大理屠宰豬HBV流行病學檢測［J］.大理學院學報，2010，9（6）：32－34.