干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢檢測(cè)尿中白細(xì)胞的比較分析

陳亞平

尿液中有形成分的檢測(cè)，是用來(lái)診斷各種腎臟疾病、泌尿系疾病的主要手段，并可以用于對(duì)疾病進(jìn)行鑒別。其中白細(xì)胞是一項(xiàng)重要的檢測(cè)內(nèi)容，其具有吞噬、產(chǎn)生抗體、抵御病原菌等能力，很多疾病均有白細(xì)胞數(shù)量的改變[1]。本研究分析干化學(xué)法和尿沉渣鏡檢法在檢測(cè)尿液中白細(xì)胞的差異，研究干化學(xué)法的假陽(yáng)性和假陰性原因，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究標(biāo)本為2010～2011年870例門(mén)診尿常規(guī)標(biāo)本。其中男性410例，女性460例，年齡在7～69歲之間，平均（33.87±7.95）歲。

1.2 方法 儀器和試劑：干化學(xué)法儀器采用H-300尿液分析儀（長(zhǎng)春瑞迪公司生產(chǎn)），試劑為原廠配套試劑。尿沉渣鏡檢法儀器采用奧林巴斯CX31顯微鏡，802臺(tái)式離心機(jī)（上海）。檢驗(yàn)前首先進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控。實(shí)驗(yàn)室工作人員嚴(yán)格按照儀器的說(shuō)明書(shū)及其操作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)。

首先，取新鮮的尿液標(biāo)本約10mL，進(jìn)行干化學(xué)法檢驗(yàn)，將試紙的試劑部分均進(jìn)入到尿液中，靜待2s后，取出試紙，使用濾紙將多余尿液輕輕吸除，在傳輸盤(pán)上進(jìn)行檢測(cè)。

隨后，使用高速離心機(jī)以1500r/min離心5min，將上清液去除，留取沉渣進(jìn)行尿沉渣鏡檢。將沉渣放于載玻片，先使用低倍鏡觀察尿液中有形成分的全貌，再使用高倍鏡觀察不同視野的白細(xì)胞值，一般選擇10個(gè)視野，準(zhǔn)確記錄。

1.3 白細(xì)胞判定標(biāo)準(zhǔn) 尿沉渣鏡檢法：每高倍視野下有5個(gè)以上白細(xì)胞為陽(yáng)性；干化學(xué)分析法：白細(xì)胞在70/U以上為陽(yáng)性。

假陰性：經(jīng)過(guò)干化學(xué)檢測(cè)為陰性，但鏡檢結(jié)果為陽(yáng)性。假陽(yáng)性：干化學(xué)法檢測(cè)為陽(yáng)性，尿沉渣鏡檢法為陰性[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均錄入SPSS18.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。干化學(xué)法與鏡檢法比較采用例數(shù)（n）、百分?jǐn)?shù)（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，當(dāng)P＜0.05時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

以尿沉渣鏡檢法作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果中，有20例假陽(yáng)性，占2.29%；假陰性68例，占7.82%。2種方法檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 干化學(xué)法及尿沉渣鏡檢法檢驗(yàn)白細(xì)胞的比較分析[例（%）]

3 討論

尿沉渣鏡檢法與干化學(xué)分析法的檢驗(yàn)原理不同。干化學(xué)法對(duì)尿液中白細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)的原理在于白細(xì)胞（粒細(xì)胞）中含有一定的酯酶，其作用在試劑帶模塊內(nèi)部的吲哚酚酯，使之產(chǎn)生吲哚酚。而吲哚酚在與試劑中的重氮鹽相結(jié)合后，可以形成紫色的縮合物。標(biāo)本中白細(xì)胞越多，其顏色越深。

3.1 干化學(xué)分析法假陰性 假陰性一般與以下幾點(diǎn)因素有關(guān)：⑴患者尿液中有較多的淋巴細(xì)胞，如腎移植患者出現(xiàn)排斥反應(yīng)時(shí)，即會(huì)有淋巴細(xì)胞在尿液中[3]，而淋巴細(xì)胞內(nèi)也含有使吲哚酚酯發(fā)生反應(yīng)的酯酶，導(dǎo)致試紙變色；⑵尿液中如果有先鋒、慶大霉素等藥物，也能夠與重氮鹽結(jié)合；⑶尿液濃度過(guò)高，高蛋白尿等患者，也會(huì)出現(xiàn)假陰性。臨床研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)尿蛋白在++以上時(shí)，白細(xì)胞即為假陰性出現(xiàn)，而尿糖在+++以上也可以導(dǎo)致白細(xì)胞下降。此外，當(dāng)標(biāo)本內(nèi)含有亞硝酸鹽也可以導(dǎo)致試紙不變色而出現(xiàn)假陰性。另外，研究認(rèn)為，當(dāng)檢驗(yàn)溫度偏低時(shí)，也可能導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)[4]。

針對(duì)假陰性情況，醫(yī)生要注意患者是否有泌尿系感染，泌尿系感染的細(xì)菌是否含有硝酸鹽還原酶；患者尿液是否在膀胱內(nèi)停留在4h以上，且是否服用了如抗生素、維生素C等會(huì)導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)的藥物。

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，有68例假陰性出現(xiàn)，經(jīng)分析，42例患者尿液中存在淋巴細(xì)胞，7例患者有泌尿系感染，15例患者為高蛋白和高尿糖，4例患者在檢查前服用了抗生素類藥物。

3.2 干化學(xué)分析法假陽(yáng)性 假陽(yáng)性一般與以下幾點(diǎn)有關(guān)：⑴尿液如果在膀胱內(nèi)儲(chǔ)存的時(shí)間較長(zhǎng)，或者標(biāo)本放置的時(shí)間較長(zhǎng)，可能會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞被破壞，進(jìn)而將酯酶釋放到尿液中，造成干化學(xué)分析法檢測(cè)為陽(yáng)性，但是鏡檢結(jié)果卻為陰性。⑵在尿液中如果混有甲醛、膽紅素或者呋喃啶等，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性。⑶女性尿液標(biāo)本容易受到各種陰道分泌物的感染，如果有扁平上皮細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞的污染[5]，可能會(huì)造成干化學(xué)法檢驗(yàn)陽(yáng)性。

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，有20例假陰性出現(xiàn)，其中15例標(biāo)本為女性，有較多分泌物混入，鏡檢發(fā)現(xiàn)有大量的上皮細(xì)胞，而上皮細(xì)胞有類似顆粒細(xì)胞的功能，可能導(dǎo)致其與白細(xì)胞的模塊發(fā)生反應(yīng)；其余5例原因不明。

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢法對(duì)尿液標(biāo)本內(nèi)白細(xì)胞的檢驗(yàn)結(jié)果盡管存在一定差異，但差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

盡管如此，使用干化學(xué)分析法檢驗(yàn)?zāi)蛞簶?biāo)本容易受到各種因素的影響，并可能導(dǎo)致出現(xiàn)白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性和假陰性，在臨床檢驗(yàn)工作中，要注意盡量避免各種干擾因素，對(duì)可疑患者，當(dāng)出現(xiàn)干化學(xué)法檢測(cè)為陰性時(shí)，為了避免誤診和漏診，需要給予尿沉渣鏡檢法檢驗(yàn)，不能單純依賴干化學(xué)法對(duì)患者進(jìn)行診斷。

[1]Neumuller,J,Neumuller-Guber,SE,Lipovac,M et al.Immunological and ultrastructural characterization of endothelial cell cultures differentiated from human cord blood derived endothelial progenitor cells[J].Histochemistry and cell biology,2006,126(6):649-664.

[2]梁偉明,陳志偉,梁再玲,等.干化學(xué)法與沉渣鏡檢法對(duì)比檢測(cè)尿中紅細(xì)胞和白細(xì)胞[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(14):855-855,857.

[3]顧文剛,陳激揚(yáng).尿干化學(xué)法與沉渣鏡檢聯(lián)合檢測(cè)尿紅細(xì)胞及白細(xì)胞的臨床意義[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(10):1127-1128.

[4]薛冰蓉,楊渝偉,陳曦,等.UF-1000i尿沉渣分析儀檢測(cè)尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞影響因素的探討[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(11):1223-1225.

[5]姜玲,程光敏,姜淑慧,等.沉渣鏡檢法和干化學(xué)法檢測(cè)尿液紅細(xì)胞和白細(xì)胞結(jié)果分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2011,8(21):53-55.