聚合酶鏈反應與涂片法檢測對診斷結核病的價值

王盈

(江西省撫州市第一醫院檢驗科，江西 撫州 344000)

結核病是當前對人類的健康具有嚴重威脅的重大傳染性疾病之一，作為一種傳染疾病，結核病已經成為全球性的社會問題和公共衛生問題。在我國，根據抽樣調查結果，其感染率達到44.5%，而2004年WHO的一項統計顯示，我國每年新發的結核病例占全球每年新發病例的15%，感染人數位居全球第二[1]。結核病不僅感染率高，其患病率、耐藥率以及死亡率也處于較高水平。當前，對結核病的預防、診斷以及臨床治療已經成為我國重點解決的醫學課題。臨床癥狀、實驗室檢查以及影像學檢查等是當前結核診斷的主要途徑，通過早診斷、早治療，絕大多數的結核病患者均可以治愈[2]。由于患者數量較多，現有的實驗室檢查手段無法滿足臨床上的快速檢測需求，因此建立快速和準確的診斷方法，是當前結核病研究的重要方向。我院2011年1月至2012年1月間收集了疑似結核病呼吸道和體液標本共426份，采用FQ-PCR 法和涂片法對其進行同步檢測，現對這兩種方法的診斷效果進行分析總結，報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 我院2011年1月至2012年1月間收集了疑似結核病呼吸道和體液標本共426份，均為我院門診或住院患者，每位患者留取呼吸道或體液標本一份。426份標本全部送檢，其中痰液198份，支氣管灌洗液100份，尿液51份，胸腔積液28份，淋巴穿刺液21份、腦脊液18份，膿性分泌物10份。426例患者中，最終有201例臨床確診為結核病，非結核 病患者則為225例，包括肺炎、肺癌、慢性支氣管炎、哮喘等。

1.2 試劑和儀器 FQ-PCR 儀：美國ABI7300 擴增儀，購自中山達安基因；TB-PCR 熒光定量檢測試劑盒：購自中山大學達安基因股份有限公司。

1.3 檢測方法 本次共送檢426份呼吸道和體液合格標本，對每個標本同時進行FQ-PCR 法和 涂片法檢測，對于痰液標本則先用4%的氫氧化鈉溶液進行消化濃縮結核桿菌。FQ-PCR 法檢測 按照試劑盒說明進行操作，涂片法則按照常規的實驗操作規程進行操作。

1.4 統計學處理 統計數據采用SPSS 12.0軟件分析，變量數據分析采用t 驗，率的比較則采用秩和檢驗分析，P＜0.05 差異有統計學意義。

2 結果

2.1 426份標本的FQ-PCR和涂片法檢測結果426份標本的FQ-PCR和涂片法檢測結果如表1所示，總陽性率:FQ-PCR 法34.51%，涂片法為14.32%，結果差異有統計學意義(P＜0.01)。

2.2 201例確診病例的檢測結果 本組共有201例患者臨床確診為結核病患者，陽性率：FQ-PCR 法66.67%,涂片法29.85%,結果有統計學差異(P＜0.05)，如表2 所示。

2.3 兩種方法的敏感性和特異性結果 兩種檢測方法的敏感性和特異性結果如表3 所示，FQ-PCR法分別為66.67%和100%，涂片法分別為29.85%和100%。

表1 426份標本的FQ-PCR和涂片法檢測結果

表2 201例確診病例的檢測結果

表3 兩種方法的敏感性和特異性結果

3 討論

結核病的實驗室診斷長期以來主要依賴細菌學的涂片和培養法進行檢查。涂片法具有操作簡便、快捷、價格低廉且可以明確結核傳染源等優點，但通常情況下敏感性較低，無法滿足對結核病的診斷需求[3]。分子生物學技術近年來得到了飛速發展和進步，已被廣泛應用結核的實驗室鑒別和診斷，具有快速準確、高靈敏度、高特異性等特點[4]。本文共收集各類標本426份，其中采用涂片法的陽性率僅為14.32%，敏感性僅為29.85%，而FQ-PCR 法的陽性率則可以達到34.51%，敏感性更是達到了66.67%，但兩者的特異性結果則均為陽性和假陰性均具有較好的檢測準確率。由此可見結核病診斷中，FQ-PCR 法與涂片法相比具有更高的敏感性和陽性檢出率，檢測結果更加可靠，但該法相對價格較高，需要醫院具備相應的醫療設施。綜合上述，FQ-PCR 法因其顯著的優勢必將在臨床上得到越來越廣泛的應用，而涂片法亦因其自身存在的優勢而繼續在臨床上得到使用。

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