雌激素受體亞型ERα、ERβ在乳腺癌中的表達(dá)及意義

劉 睿，趙 靜，張 志，曹曉艷，楊照環(huán)

（1.河北唐山工人醫(yī)院，河北 唐山063000；2.河北聯(lián)合大學(xué)病理教研室，河北 唐山063000）

本研究采用免疫組織化學(xué)法對(duì)100例國(guó)人女性不同階段乳腺組織中雌激素受體α（ERα）、雌激素受體β（ERβ）進(jìn)行檢測(cè)，探討其與一些腫瘤病理參數(shù)和生物學(xué)標(biāo)志物（是否絕經(jīng)、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、組織學(xué)類(lèi)型、腫瘤分期、C－erbB－2表達(dá)）之間的關(guān)系，以期為有關(guān)ERα、ERβ與乳腺癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的深入研究以及臨床判斷乳腺癌預(yù)后及指導(dǎo)治療提供幫助。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

選取唐山工人醫(yī)院2004年6月至2008年6月手術(shù)切除石蠟標(biāo)本共100例（其中乳腺癌術(shù)前均未經(jīng)任何化療和抗腫瘤治療），包括浸潤(rùn)性乳腺癌62例，年齡24－67歲，平均46歲，絕經(jīng)前患者29例，絕經(jīng)后33例。組織學(xué)類(lèi)型：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌44例，浸潤(rùn)性小葉癌18例。依照國(guó)際TNM分期，其中Ⅰ／Ⅱ期乳腺癌39例，Ⅲ／Ⅳ期乳腺癌23例。腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況：腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者42例，無(wú)轉(zhuǎn)移者20例，每側(cè)腋窩檢出淋巴結(jié)數(shù)3－24個(gè)，平均每例檢出淋巴結(jié)11.8枚。乳腺原位癌8例，年齡28－62歲，平均42歲。乳腺增生標(biāo)本15例，年齡15－42歲，平均32.5歲。癌旁正常乳腺組織（距癌組織≥4cm、組織學(xué)結(jié)構(gòu)正常）15例，年齡33－60歲，平均52歲。所有病例的臨床及病理資料完整，切除標(biāo)本由兩名病理醫(yī)師做出詳細(xì)的病理診斷，包括病灶的大小、病理組織學(xué)類(lèi)型、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及規(guī)范的臨床分期（TNM分期）。

1.2 主要試劑及來(lái)源

鼠抗人ERα單克隆抗體（丹麥Dako公司），兔抗人ERβ單克隆抗體（美國(guó)Santa Cruz公司），鼠抗人C－erbB－2單克隆抗體（北京中山生物技術(shù)公司）。

1.3 方法

免疫組化實(shí)驗(yàn)按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。用試劑盒內(nèi)已知陽(yáng)性的乳腺癌切片做ERα、ERβ、C－erbB－2陽(yáng)性對(duì)照。用已知陽(yáng)性的乳腺癌切片，以PBS代替一抗做空白對(duì)照。

1.4 形態(tài)觀(guān)察與結(jié)果測(cè)定

ERα的陽(yáng)性細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞核染色，ERβ陽(yáng)性細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞核或細(xì)胞漿有染色、C－erbB－2陽(yáng)性細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞膜染色。在400高倍鏡下觀(guān)察5個(gè)視野計(jì)算陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞數(shù)占腫瘤細(xì)胞總數(shù)的比例，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)大于10%確定為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所得計(jì)數(shù)資料數(shù)據(jù)采用四格表χ2檢驗(yàn)，當(dāng)n≥40當(dāng)有1≤T＜5時(shí)，用校正的χ2檢驗(yàn)，當(dāng)n＜40用四格表的確切概率法計(jì)算，P＜0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有統(tǒng)計(jì)分析均采用SPSS 10.1統(tǒng)計(jì)軟件處理。

2 結(jié)果

2.1 ERα、ERβ在正常乳腺組織、乳腺增生、原位癌及浸潤(rùn)性乳腺癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率見(jiàn)表1。分別與正常乳腺組織和乳腺增生相比較，原位癌和浸潤(rùn)性乳腺癌中ERα表達(dá)陽(yáng)性率明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），原位癌與浸潤(rùn)性乳腺癌之間比較ERα表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。分別與正常乳腺組織和乳腺增生組織比較，浸潤(rùn)性乳腺癌中ERβ表達(dá)的降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），原位癌中ERβ表達(dá)的降低無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；原位癌與浸潤(rùn)性乳腺癌比較ERβ陽(yáng)性率的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 ERα、ERβ在不同組織的表達(dá)

2.2 ERα在浸潤(rùn)性乳腺癌中的表達(dá)情況見(jiàn)表2。在浸潤(rùn)性乳腺癌中，I／II期患者中ERα陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于Ⅲ／Ⅳ期患者ERα陽(yáng)性表達(dá)率（P＜0.05）。浸潤(rùn)性乳腺癌患者中C－erbB－2陽(yáng)性者ERα陽(yáng)性表達(dá)率明顯降低，有顯著差異（P＜0.01）。浸潤(rùn)性乳腺癌中ERα陽(yáng)性表達(dá)與是否絕經(jīng)、腫瘤大小、淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分型無(wú)關(guān)（P＞0.05）。

表2 浸潤(rùn)性乳腺癌中ERα的表達(dá)與各臨床參數(shù)之間關(guān)系

2.3 ERβ在浸潤(rùn)性乳腺癌中的表達(dá)情況見(jiàn)表3。在浸潤(rùn)性乳腺癌中ERβ陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性（P＜0.05）以及C－erbB－2表達(dá)陽(yáng)性（P＜0.01）呈現(xiàn)正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與是否絕經(jīng)、腫瘤大小、組織學(xué)類(lèi)型、臨床分期無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05）。

表3 浸潤(rùn)性乳腺癌中ERβ的表達(dá)與各臨床參數(shù)之間關(guān)系

3 討論

乳腺癌是激素依賴(lài)性腫瘤之一，雌激素在其發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。用免疫組化法在正常乳腺上皮中可檢測(cè)到少量ERα，幾乎所有導(dǎo)管上皮不典型增生病灶都高表達(dá)ERα，大約75%的導(dǎo)管原位癌、90%以上的小葉原位癌、70%的浸潤(rùn)性乳腺癌病灶中可檢測(cè)到明顯升高的ERα，并且表達(dá)不存在年齡差異［1］，這些結(jié)果提示ERα在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中可能起到促進(jìn)作用。本研究結(jié)果顯示原位癌和浸潤(rùn)性乳腺癌中ERα陽(yáng)性率明顯高于正常乳腺組織和良性乳腺病變組織（P＜0.05）。目前公認(rèn)乳腺癌ERα陽(yáng)性是預(yù)后良好的表現(xiàn)。多數(shù)臨床研究結(jié)果表明，ERα與腫瘤的組織學(xué)分化、臨床分期、癌細(xì)胞的增殖活性等密切相關(guān)，本課題研究結(jié)果顯示早期（Ⅰ、Ⅱ期）患者ERα陽(yáng)性表達(dá)率（69.2%）明顯高于晚期（Ⅲ、Ⅳ期）患者 ERα陽(yáng)性表達(dá)率（43.5%），這與國(guó)內(nèi)一些學(xué)者的研究結(jié)果相類(lèi)似［2］。有學(xué)者認(rèn)為晚期乳腺癌中ERα表達(dá)降低是細(xì)胞異型性增生中的一種正常結(jié)構(gòu)的喪失，是細(xì)胞去分化的表現(xiàn)，可能與非雌激素依賴(lài)性乳腺癌的發(fā)生有關(guān)［3］。本研究還顯示C－erbB－2陰性患者的ERα陽(yáng)性表達(dá)（71.4%）明顯高于 C－erbB－2陽(yáng)性患者 ERα陽(yáng)性表達(dá)（35.0%），而C－erbB－2陽(yáng)性表達(dá)目前被公認(rèn)為乳腺癌不良預(yù)后因素。以上結(jié)果提示乳腺癌患者中ERα的陽(yáng)性表達(dá)與一些預(yù)后良好因素相關(guān)。

ERβ于1996年被發(fā)現(xiàn)，其在85%正常乳腺上皮中有表達(dá)，也是乳腺間質(zhì)中主要的ER形式［4］。有實(shí)驗(yàn)顯示ERβ的表達(dá)強(qiáng)度在正常上皮、導(dǎo)管內(nèi)原位癌、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌依次減少［5］，由此，推斷ERβ可能對(duì)維持乳腺組織的正常生理功能起著重要作用。本課題結(jié)果顯示ERβ在正常乳腺組織、乳腺增生組織、原位癌及浸潤(rùn)癌中的表達(dá)率依次下降。目前就ERβ在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及與預(yù)后的關(guān)系問(wèn)題上尚存在較多爭(zhēng)議。本研究結(jié)果顯示ERβ陽(yáng)性表達(dá)與月經(jīng)狀況、腫瘤大小、組織學(xué)類(lèi)型、TNM分期均無(wú)明顯關(guān)聯(lián)（P＞0.05）。腋窩淋巴結(jié)陽(yáng)性患者ERβ陽(yáng)性率（57.1%）明顯高于淋巴結(jié)陰性患者ERβ陽(yáng)性率（30.0%）；C－erbB－2陽(yáng)性患者中 ERβ陽(yáng)性表達(dá)率（75%）明顯高于C－erbB－2陰性患者ERβ陽(yáng)性表達(dá)率（35.7%），這與某些國(guó)外研究結(jié)果類(lèi)似［6］。表明其陽(yáng)性表達(dá)可能與一些不良預(yù)后因素相關(guān)，但還需要更大樣本研究去進(jìn)一步證實(shí)及深入研究。

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