健康志愿者單次口服壯骨膠囊的安全性及耐受性研究

王 冰，李進(jìn)峰，閆秀娟

(威海市立醫(yī)院，山東 威海 264200)

壯骨膠囊為治療骨質(zhì)疏松癥藥物，其主要成分為淫羊藿苷(Icarrin)，分子式為 C33H40O15，分子量為 676.65，結(jié)構(gòu)上屬于8－異戊烯基黃酮醇苷類化合物［1］.淫羊藿苷是多年生的草本植物淫羊藿(Herba epimedii)主要的有效成分，在傳統(tǒng)中醫(yī)藥中，淫羊藿屬補益藥，具有補腎壯陽、強筋骨、祛風(fēng)除濕的功效，可增強機體免疫力，降壓理氣［2］，對治療骨質(zhì)疏松癥有顯著作用［3～5］.

本試驗選擇健康志愿者，進(jìn)行壯骨膠囊單次口服給藥的安全性和耐受性試驗，評價其耐受性和安全性，為制定Ⅱ期臨床試驗方案和指導(dǎo)臨床用藥提供依據(jù).

1 對象與方法

1.1 志愿者選擇 納入標(biāo)準(zhǔn):34名健康志愿者，男女各半，年齡19～26歲，身高、體重不超常;不嗜煙酒，并同意在試驗期間內(nèi)不吸煙、飲酒以及含乙醇、咖啡因等飲料，身體健康，體格檢查心肺聽診及血壓正常，胸、腹部叩診、觸診無異常發(fā)現(xiàn)，無明顯淺表淋巴結(jié)腫大，無心、肺、肝、腎、消化道、代謝異常等病史;實驗室檢查血常規(guī)、凝血功能、尿常規(guī)、血液生化、性激素、肝功能、腎功能正常，心電圖檢查正常，B超(腎、肝、膽、脾、胰)及胸部透視檢查正常;無藥物過敏史和神經(jīng)精神系統(tǒng)疾病史;無體位低血壓史，心率60～90次·min－1;試驗前2周及試驗期間不服用任何其他藥物;無影響藥物吸收、分布、代謝和排泄等因素;3個月內(nèi)未用過已知對某臟器有損害的藥物，4周內(nèi)未參加過其他新藥臨床試驗;女性志愿者排除懷孕、月經(jīng)期;簽署知情同意書.

排除標(biāo)準(zhǔn):健康檢查不符合標(biāo)準(zhǔn);經(jīng)常用藥、嗜煙酒，4周內(nèi)參加過其他臨床試驗;3個月內(nèi)用過已知對某臟器有損害的藥物，或目前正在使用藥物.試驗前患過重病;有胃腸、肝、腎疾病史，或現(xiàn)有上述疾病;有其他影響藥物吸收、分布、代謝和排泄的因素.

1.2 藥品 壯骨膠囊，規(guī)格:200 mg/粒，含淫羊藿提取物100 mg/粒.北京世佳九生源藥業(yè)科技有限公司提供，批號:070105.試驗用藥，為中試放大產(chǎn)品，經(jīng)檢驗合格，按臨床研究要求包裝.

1.3 試驗設(shè)計 根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局2003L03779臨床研究批件及藥物臨床研究指導(dǎo)原則，設(shè)計臨床試驗方案，報山東大學(xué)齊魯醫(yī)院國家藥品臨床研究基地倫理委員會討論通過.所有志愿者人選后均自愿簽訂知情同意書.

1.3.1 劑量設(shè)計和志愿者分組 根據(jù)改良的Blach well法確定試驗的起始劑量.采用大鼠長期毒性實驗最大劑量的1/60計算起始劑量，確定最小初試劑量為600 mg，最大耐受劑量為3000 mg，共分5 個劑量組，分別為 600、1200、1800、2400及3000 mg.34名男女健康志愿者篩選合格后分別按性別、體重大小編號，隨機分配到5個劑量組中，其中600 mg劑量組4名，1200 mg劑量組6名，1800、2400和3000 mg劑量組每組8名.由最小劑量組開始逐組進(jìn)行試驗，在確定前一個劑量組安全耐受的前提下開始下個劑量，每人只接受一個劑量，未在同一志愿者中進(jìn)行劑量遞增連續(xù)試驗.

1.3.2 試驗方法 試驗在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院藥物臨床研究基地Ⅰ期病房內(nèi)進(jìn)行.病房條件符合GCP要求.志愿者于試驗前24～48 h內(nèi)進(jìn)行體格檢查、心電圖、B超檢查及實驗室檢查，包括尿常規(guī)、血常規(guī)、凝血酶原時間、血生化、性激素及病毒學(xué)指標(biāo)檢查，女性志愿者進(jìn)行尿HCG檢查，以排除懷孕可能.篩選合格的志愿者于試驗前1日入住Ⅰ期病房，晚上統(tǒng)一進(jìn)食清淡飲食，然后禁食10 h，不禁水過夜.試驗當(dāng)日統(tǒng)一在7點空腹給藥，給藥后2h進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)早餐.志愿者服藥后24 h完成各項檢查后方能離開Ⅰ期病房.

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 癥狀和體征 由經(jīng)過國家新藥臨床研究培訓(xùn)的臨床醫(yī)生對志愿者實施晝夜監(jiān)護(hù)，觀察、記錄志愿者服藥后不同時間的生命體征，包括體溫、脈搏、呼吸、血壓;觀察、記錄臨床表現(xiàn)，包括神經(jīng)、呼吸、泌尿、消化、心血管等系統(tǒng)癥狀和體征，以及志愿者自覺癥狀.

1.4.2 實驗室檢查 試驗前日、次日不同時間進(jìn)行實驗室檢查，包括尿常規(guī):pH值、尿蛋白、尿糖、酮體、尿膽原、尿膽素等;血常規(guī):紅細(xì)胞(RBC)、白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞(NEU)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)等，凝血酶原時間(PT);血生化:鉀(K+)、鈉(Na+)、氯(Cl－)、鈣(Ca2+)、磷(P)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、堿性磷酸酶(AKP)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、間接膽紅素(IBIL)，空腹血糖(GLU);性激素(雌二醇E2，睪酮T).試驗前、試驗當(dāng)日和試驗次日進(jìn)行心電圖檢查;試驗前和試驗次日進(jìn)行胸部透視.

1.4.3 不良事件 記錄志愿者用藥后主觀癥狀及理化檢查，不良事件出現(xiàn)的時間、程度、持續(xù)時間及處理經(jīng)過.判斷不良事件的發(fā)生與藥物的關(guān)系，按“肯定、很可能、可能、可疑、不可能”5級分類.確定不良事件的程度:輕度(不處理、不停藥)、中度(停藥、不處理)、重度(停藥、對癥處理)、危重(住院治療、搶救).一旦出現(xiàn)嚴(yán)重不良事件，及時搶救，并按規(guī)定記錄和上報.對試驗中出現(xiàn)不良反應(yīng)者，應(yīng)觀察和隨訪至癥狀或體征及相應(yīng)理化檢查恢復(fù)正常.

1.5 數(shù)據(jù)處理 將病例資料核對無誤后，雙份錄入計算機，建立數(shù)據(jù)庫.數(shù)值變量資料以表示，用SAS軟件對志愿者給藥前后實驗室檢查指標(biāo)的差異進(jìn)行配對t檢驗，給藥后的組間差異進(jìn)行方差分析，對不良事件進(jìn)行描述性分析.

2 結(jié)果

2.1 志愿者一般資料 各組志愿者一般資料見表1.各組志愿者用藥前體格檢查合格，心電圖、胸透及B超檢查正常，實驗室檢查除極個別指標(biāo)超過正常參考值范圍，但無臨床意義外，其余檢查指標(biāo)均正常.試驗期間無退出和剔除病例.各組性別相當(dāng)，無既往病史和藥物過敏史.各組志愿者年齡、身高、體重及體重指數(shù)方差分析無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05).提示各組志愿者一般條件均衡，具有較好可比性，試驗結(jié)果具有合理性及可信性.

表1 志愿者一般資料

2.2 心電圖變化 各組志愿者用藥前、后12 h、用藥后24 h進(jìn)行心電圖檢查，未發(fā)現(xiàn)有臨床意義的異常變化.

2.3 尿常規(guī)變化 用藥后，600 mg、3000 mg組各有1名，1200 mg、1800 mg組各有2名志愿者RBC出現(xiàn)升高，無臨床意義;1200 mg、1800 mg組各有1名志愿者EC出現(xiàn)升高，無臨床意義.

2.4 血常規(guī)及凝血酶原時間變化 各組志愿者用藥前后血常規(guī)及凝血酶原時間檢查指標(biāo)見表2.各檢查指標(biāo)同一劑量組用藥前后進(jìn)行配對t檢驗、不同劑量組的組間差異進(jìn)行方差分析.用藥后個別指標(biāo)超過正常值范圍，但無臨床意義.

表2 志愿者用藥前后血常規(guī)及凝血酶原時間檢查結(jié)果()

表2 志愿者用藥前后血常規(guī)及凝血酶原時間檢查結(jié)果()

檢查指標(biāo) 600 mg組1200 mg 組1800 mg 組2400 mg 組3000 mg 組±1.28 5.62 ±1.60 NEU(%) 59.45 ±7.47 59.03 ±4.20 53.40 ±4.43 53.78 ±4.66 52.75 ±9.50 52.63 ±5.90 50.97 ±7.35 53.05 ±6.87 61.02 ±6.20 849.17 ±1953.65 RBC(1012· L －1) 4.85 ±0.52 16.05 ±23.31 4.52 ±0.40 4.25 ±0.45 4.53 ±0.48 4.53 ±0.43 4.50 ±1.01 4.43 ±1.01 4.50 ±0.43 4.47 ±0.45 LYM(%) 34.33 ±6.54 34.85 ±6.56 37.75 ±8.62 37.32 ±8.61 40.40 ±10.08 39.94 ±7.87 40.03 ±7.08 38.90 ±6.35 30.92 ±14.60 40.62 ±6.50 PLT(109·L －1)212.75 ±21.06210.25 ±29.44 205.17 ±39.03184.33 ±28.58 203.83 ±24.15201.67 ±34.45 276.50 ±54.75210.67 ±30.84 313.50 ±33.05 223.00 ±27.76用藥前 用藥后WBC(109·L －1) 6.73 ±1.20 6.53 ±0.50 6.13 ±1.81 12.58 ±15.46 5.43 ±0.58 4.85 ±0.45 5.70 ±1.53 5.55 ±1.91 5.37用藥前 用藥后 用藥前 用藥后 用藥前 用藥后 用藥前 用藥后

續(xù)表2:

2.5 血液生化變化 各組志愿者用藥前后血液生化檢查指標(biāo)見表3.各檢查指標(biāo)同一劑量組用藥前后進(jìn)行配對t檢驗、不同劑量組的組間差異進(jìn)行方差分析.

表3 志愿者用藥前后血生化檢查結(jié)果()

表3 志愿者用藥前后血生化檢查結(jié)果()

3 討論

本研究結(jié)果表明，壯骨膠囊600～3000 mg的劑量遞增耐受性方案是安全、科學(xué)、可行的.淫羊藿在中醫(yī)臨床應(yīng)用已有千年的歷史，為小檗科植物.據(jù)?中國藥典?記載，淫羊藿味辛、甘，性溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補腎壯陽、強筋骨、祛風(fēng)除濕的功效，可增強機體免疫力，降壓理氣.

用藥前后尿常規(guī)實驗室指標(biāo)檢查，600 mg、3000 mg組各有1名，1200 mg、1800 mg組各有2名志愿者RBC出現(xiàn)升高;1200 mg、1800 mg組各有1名志愿者EC出現(xiàn)升高，t檢驗無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，其組間差異經(jīng)方差分析無統(tǒng)計學(xué)意義，且均未超過正常參考值范圍，故無臨床意義.

血常規(guī)指標(biāo)，600 mg、1800 mg組各1名，3000 mg組2名志愿者LYM(%)升高;1800、2400 mg組各1名志愿者NEU(%)升高;3000 mg組2名志愿者NEU(%)降低.

血液生化指標(biāo)，1800 mg組1名志愿者GLU降低，2400 mg組1名志愿者GLU升高;3000 mg組4名志愿者GLB升高;1名志愿者TBIL及P升高;各劑量組的組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義.

此外，本試驗中未發(fā)現(xiàn)性別差異.因樣本量較少，尚無法明確判定，有待于臨床試驗及上市后大樣本研究.

本試驗進(jìn)行中國健康志愿者單次口服壯骨膠囊的耐受性研究，壯骨膠囊給藥劑量在3000 mg內(nèi)較安全，志愿者耐受性良好.

［1］李梨，周岐新，石京山.淫羊藿苷藥理作用研究進(jìn)展［J］.中國藥房，2005，16(12):952 －954.

［2］張藝，肖崇厚，孟憲麗，等.HPLC法測定川產(chǎn)淫羊藿屬植物的淫羊藿疳含量［J］.中國中藥雜志，1995，20(5):265－266.

［3］李青南，廖進(jìn)民，吳鐵，等.淫羊藿提取液防治激素所致大鼠骨質(zhì)疏松的實驗研究［J］.中國藥學(xué)雜志，1996，31(8):19－22.

［4］季暉，劉康，李紹平，等.淫羊藿總黃酮對維A酸誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松癥的防治作用［J］.中國藥科大學(xué)學(xué)報，2000，31(3):64 －67.

［5］季暉，劉康，龔曉健，等.淫羊藿總黃酮對摘除卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的防治作用［J］.中國骨質(zhì)疏松雜志，2001，7(1):8－12.